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猪繁殖与呼吸综合征病毒多基因重组真核表达质粒的构建及免疫学研究

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-11页
第一章 猪繁殖与呼吸综合征研究概述第11-16页
   ·猪繁殖与呼吸综合征的流行病学特点第11-12页
   ·猪繁殖与呼吸综合征的临床症状和病理学变化第12-14页
     ·临床症状第12-13页
     ·病理变化第13-14页
   ·猪繁殖与呼吸综合征的诊断第14-15页
     ·血清学诊断技术第14页
     ·分子生物学诊断技术第14-15页
     ·其它检测技术第15页
   ·猪繁殖与呼吸综合征的防治第15-16页
第二章 猪繁殖与呼吸综合征病毒概述第16-23页
   ·猪繁殖与呼吸综合征病毒的理化性质第16页
   ·猪繁殖与呼吸综合征病毒基因组结构及其研究进展第16-17页
   ·猪繁殖与呼吸综合征病毒基因变异与侵入机理第17-19页
     ·病毒基因变异与重组第17-18页
     ·病毒的侵入机理第18-19页
   ·猪繁殖与呼吸综合征病毒基因组编码蛋白的结构与功能第19-23页
     ·主要结构蛋白第19-21页
     ·次要结构蛋白第21-23页
第三章 猪繁殖与呼吸综合征疫苗的研究进展第23-29页
   ·PRRS 传统疫苗第23-25页
     ·PRRS 灭活疫苗第23-24页
     ·PRRS 弱毒疫苗第24-25页
   ·PRRS 新型疫苗研究进展第25-28页
     ·基因疫苗第25-26页
     ·亚单位疫苗第26-27页
     ·活载体疫苗第27-28页
   ·展望第28-29页
第四章 猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF3、ORF5 双基因重组真核表达载体的构建第29-43页
   ·材料第29-30页
     ·PRRSV 病料与工程菌第29页
     ·引物的设计和合成第29页
     ·主要试剂第29-30页
     ·主要仪器第30页
     ·培养基及配制第30页
   ·方法第30-38页
     ·ORF3、ORF5 基因的获得第30-32页
     ·克隆载体pMD-ORF3 的构建第32-33页
     ·克隆载体pMD-ORF3 的PCR 与酶切鉴定第33-34页
     ·克隆载体pMD-ORF3-ORF5 的构建第34-35页
     ·克隆载体pMD-ORF3-ORF5 的鉴定第35-36页
     ·重组真核表达载体pcDNA4.0-ORF3-ORF5 的构建第36-37页
     ·真核表达载体pcDNA4.0-ORF3-ORF5 的鉴定第37-38页
   ·结果第38-41页
     ·ORF3、ORF5 基因的获得第38页
     ·克隆载体pMD-ORF3 的PCR 与酶切鉴定第38-39页
     ·克隆载体pMD-ORF3-ORF5 的鉴定第39页
     ·真核表达载体pcDNA4.0-ORF3-ORF5 的鉴定第39-41页
   ·讨论第41-42页
   ·小结第42-43页
第五章 猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF3、ORF5、ORF6 三基因重组真核表达载体的构建第43-53页
   ·材料第43-44页
     ·质粒、PRRSV 病料与工程菌第43页
     ·引物的设计和合成第43页
     ·主要试剂第43页
     ·主要仪器第43页
     ·培养基及配制第43-44页
   ·方法第44-48页
     ·ORF6 基因的获得第44-45页
     ·重组真核表达载体pcDNA4.0-ORF6 的构建第45页
     ·真核表达载体pcDNA4.0-ORF6 的鉴定第45-46页
     ·真核表达载体pcDNA4.0-ORF6-ORF3-ORF5 的构建第46-47页
     ·真核表达载体pcDNA4.0-ORF6-ORF3-ORF5 的鉴定第47-48页
   ·结果第48-51页
     ·ORF6 基因的获得第48页
     ·真核表达载体pcDNA4.0-ORF6 的鉴定第48-49页
     ·真核表达载体pcDNA4.0-ORF6-ORF3-ORF5 的鉴定第49-51页
   ·讨论第51-52页
   ·小结第52-53页
第六章 重组真核表达质粒注射小鼠的免疫学研究第53-61页
   ·材料第53-54页
     ·质粒和菌种第53页
     ·试验动物第53页
     ·主要试剂及配制第53页
     ·主要仪器第53-54页
   ·方法第54-56页
     ·重组质粒的大量提取与纯化第54-55页
     ·试验小鼠分组及采样第55页
     ·血清抗体的ELISA 检测第55-56页
     ·血清中和抗体的检测第56页
     ·pcDNA4.0-ORF6-ORF3-ORF5 在小鼠体内的动态分布第56页
   ·结果第56-59页
     ·血清抗体的ELISA 检测第56页
     ·血清中和抗体的检测第56-57页
     ·pcDNA4.0-ORF6-ORF3-ORF5 在小鼠体内的动态分布第57-59页
   ·讨论第59-60页
     ·重组真核表达质粒疫苗的免疫保护效果第59页
     ·影响重组真核表达载体疫苗免疫效果的因素第59页
     ·重组真核表达载体疫苗面临的问题及应用前景第59-60页
   ·小结第60-61页
结论第61-62页
参考文献第62-71页
致谢第71-72页
作者简介第72页

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