| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-22页 |
| 第一节 细菌性病原的鉴定和检测 | 第12-16页 |
| 引言 | 第12页 |
| 1 传统的经典细菌鉴定 | 第12-13页 |
| ·形态学鉴定 | 第12页 |
| ·生理生化鉴定 | 第12-13页 |
| ·快速细菌鉴定方法 | 第13页 |
| 2 分子生物学检测方法 | 第13-16页 |
| ·PCR检测方法 | 第13-15页 |
| ·免疫检测技术 | 第15-16页 |
| 第二节 迟缓爱德华氏菌的研究进展 | 第16-22页 |
| 引言 | 第16页 |
| 1 迟缓爱德华氏菌分类地位及分布特征 | 第16-17页 |
| 2 迟缓爱德华氏菌的致病机制 | 第17-20页 |
| ·黏附和入侵 | 第17页 |
| ·抗免疫杀伤机制 | 第17页 |
| ·细胞毒素和胞外酶 | 第17-18页 |
| ·细菌分泌系统 | 第18-20页 |
| 3 迟缓爱德华氏菌的防治 | 第20-22页 |
| ·化学治疗法 | 第20-21页 |
| ·免疫治疗防治法 | 第21-22页 |
| 第二章 致病性迟缓爱德华氏菌的分离、鉴定和检测 | 第22-38页 |
| 第一节 养殖大菱鲆致病性迟缓爱德华氏菌的分离和鉴定 | 第22-34页 |
| 引言 | 第22页 |
| 1、材料与方法 | 第22-27页 |
| ·材料 | 第22-23页 |
| ·试剂和溶液 | 第23页 |
| ·培养基 | 第23页 |
| ·试剂盒与试剂条 | 第23页 |
| ·仪器 | 第23-24页 |
| ·LD_(50)测定 | 第24页 |
| ·16srRNA基因的克隆和序列分析 | 第24-25页 |
| ·APIID32E试剂条生理生化鉴定 | 第25页 |
| ·API ZYM酶活检测 | 第25-27页 |
| 2 结果与分析 | 第27-32页 |
| ·JN、MHK_2 的对大菱鲆的半数致死量(LD_(50)) | 第27页 |
| ·JN、MHK_2 的16s rDNA 分子鉴定 | 第27-29页 |
| ·API ID32E 生化鉴定 | 第29-31页 |
| ·API ZYM 酶活检测 | 第31-32页 |
| 3 讨论 | 第32-34页 |
| 第二节 PCR检测致病性迟缓爱德华氏菌 | 第34-38页 |
| 引言 | 第34页 |
| 1 材料与方法 | 第34-36页 |
| ·引物设计 | 第34-35页 |
| ·迟缓爱德华氏菌株 | 第35页 |
| ·实验方法 | 第35-36页 |
| 2 结果与讨论 | 第36-38页 |
| 第三章 迟缓爱德华氏菌esaC基因缺失株的构建和鉴定 | 第38-50页 |
| 引言 | 第38页 |
| 1、材料与方法 | 第38-46页 |
| ·材料 | 第38-39页 |
| ·试剂和溶液 | 第39页 |
| ·仪器 | 第39-40页 |
| ·引物设计 | 第40页 |
| ·迟缓爱德华氏菌esaC 基因缺失突变株的构建 | 第40-44页 |
| ·迟缓爱德华氏菌胞外蛋白诱导表达和提取 | 第44页 |
| ·迟缓爱德华氏菌胞外蛋白和总蛋白的检测 | 第44-45页 |
| ·自凝集现象 | 第45页 |
| ·突变株半数致死剂量(LD_(50))的测定 | 第45-46页 |
| 2 结果和分析 | 第46-48页 |
| ·迟缓爱德华氏菌esaC 基因缺失片断的构建 | 第46页 |
| ·westernblotting | 第46-47页 |
| ·自凝集现象 | 第47页 |
| ·突变株半数致死量(LD_(50)) | 第47-48页 |
| 3 讨论和分析 | 第48-50页 |
| 第四章 迟缓爱德华氏菌多基因缺失突变株的构建 | 第50-57页 |
| 前言 | 第50-51页 |
| 1、材料与方法 | 第51-52页 |
| ·材料 | 第51页 |
| ·esrB、evpH基因双缺失突变株的构建 | 第51页 |
| ·aroA、esrB、evpH基因三缺失突变株的构建 | 第51页 |
| ·突变株检测引物的设计 | 第51-52页 |
| ·半数致死量的测定 | 第52页 |
| ·细菌在鱼体内存活时间的测定 | 第52页 |
| ·减毒株是否具有免疫效果的初步检测 | 第52页 |
| 2、实验结果 | 第52-55页 |
| ·基因缺失株的构建 | 第52-53页 |
| ·半数致死浓度的测定 | 第53页 |
| ·细菌在鱼体内存活时间的初步检测 | 第53-54页 |
| ·减毒株免疫效果的初步测定 | 第54-55页 |
| 3、讨论 | 第55-57页 |
| 参考文献 | 第57-65页 |
| 个人简历 | 第65页 |
| 参与和发表文章 | 第65-66页 |
| 致谢 | 第66页 |