| 目录 | 第1-8页 |
| 缩略词表 | 第8-9页 |
| 摘要 | 第9-11页 |
| Abstract | 第11-14页 |
| 引言 | 第14-16页 |
| 第一章 文献综述 | 第16-36页 |
| 第一节 植物自交不亲和性 | 第16-25页 |
| 1.植物自交不亲和性概述 | 第16-17页 |
| 2.配子体型自交不亲和性分子机制 | 第17-24页 |
| ·雌蕊S特异性识别决定因子,S-RNase基因 | 第17-19页 |
| ·S-蛋白/S-RNase的生化及结构特征 | 第17-18页 |
| ·S-RNase基因的功能验证 | 第18-19页 |
| ·S-RNase的S-等位基因特异性识别决定部位 | 第19页 |
| ·雄蕊S特异性识别决定因子,SFB基因 | 第19-21页 |
| ·花粉S-位点F-box基因 | 第19-20页 |
| ·F-box基因的功能验证 | 第20-21页 |
| ·S-RNase介导的自交不亲和性可能与泛素化(ubiquitination)有关 | 第21-22页 |
| ·调控自交不亲和性反应的修饰基因 | 第22-23页 |
| ·S-RNase的工作假说 | 第23-24页 |
| 3.研究展望 | 第24-25页 |
| 第二节 蔷薇科果树自交不亲和性 | 第25-36页 |
| 1.蔷薇科果树S-RNase基因的结构特点 | 第25-26页 |
| 2.蔷薇科果树SFB基因的结构特点 | 第26-27页 |
| 3.蔷薇科果树的S基因型及其分子鉴定 | 第27-30页 |
| ·田间授粉试验 | 第27-28页 |
| ·授粉花柱离体培养法 | 第28页 |
| ·花柱S糖蛋白电泳分析法 | 第28页 |
| ·S基因特异性PCR分析 | 第28-29页 |
| ·基于花粉S特异性识别决定因子的S基因型鉴定方法 | 第29页 |
| ·S基因芯片法 | 第29-30页 |
| 4.蔷薇科果树自交不亲和性的克服及其机制 | 第30-36页 |
| ·蕾期或延迟授粉 | 第30-31页 |
| ·基因突变 | 第31-33页 |
| ·染色体数目变异 | 第33-34页 |
| ·转基因方法创造自交亲和性 | 第34-36页 |
| 第二章 中国李的自交不亲和性鉴定 | 第36-54页 |
| 第一节 中国李花粉量和萌发率的数量分析 | 第36-46页 |
| 1.材料与方法 | 第38-39页 |
| ·植物材料 | 第38页 |
| ·方法 | 第38-39页 |
| ·花粉悬浮剂筛选及每个花药的花粉量(m)的计算 | 第38页 |
| ·每朵花的花药数(n)的测定 | 第38页 |
| ·每朵花的花粉量(k)的计算 | 第38页 |
| ·花粉萌发率(t)的测定 | 第38-39页 |
| ·数据处理方法 | 第39页 |
| 2.结果与分析 | 第39-44页 |
| ·10%葡萄糖水溶液是中国李较适合的花粉悬浮剂 | 第39页 |
| ·中国李花粉量的品种间差异 | 第39-44页 |
| 3.讨论 | 第44-46页 |
| ·中国李品种的花粉量比同属物种桃和杏低 | 第44页 |
| ·本研究获得了较高的中国李品种的花粉萌发率 | 第44-45页 |
| ·根据花粉量和萌发率综合选择授粉树 | 第45-46页 |
| 第二节 中国李的配子体型自交不亲和性 | 第46-54页 |
| 1.材料与方法 | 第47-49页 |
| ·植物材料 | 第47页 |
| ·实验方法 | 第47-49页 |
| ·花粉采集 | 第47页 |
| ·自然自交授粉 | 第47-48页 |
| ·人工自交、杂交授粉 | 第48页 |
| ·花粉管荧光观察 | 第48-49页 |
| 2.结果与分析 | 第49-51页 |
| ·中国李32个品种的自然自交坐果率 | 第49页 |
| ·中国李人工自交、杂交授粉坐果率 | 第49-50页 |
| ·中国李人工授粉后花粉管的荧光观察 | 第50-51页 |
| 3.讨论 | 第51-54页 |
| ·中国李的配子体型自交不亲和性 | 第51-52页 |
| ·授粉后40天为中国李坐果率统计的适宜时期 | 第52-54页 |
| 第三章 中国李S-RNase基因型的鉴定及新S-RNase基因的克隆 | 第54-72页 |
| 1.材料与方法 | 第55-59页 |
| ·植物材料 | 第55页 |
| ·实验方法 | 第55-59页 |
| ·DNA的提取 | 第55-56页 |
| ·RNA的提取 | 第56-57页 |
| ·引物设计 | 第57页 |
| ·S-RNase的基因组扩增 | 第57-58页 |
| ·S-RNase的cDNA克隆 | 第58页 |
| ·S基因扩增片段的回收、鉴定及测序 | 第58-59页 |
| ·序列分析 | 第59页 |
| 2.结果与分析 | 第59-68页 |
| ·中国李S-RNase的基因组扩增 | 第59-62页 |
| ·中国李S-RNase基因的序列分析 | 第62-68页 |
| ·中国李S-RNase基因的内含子分析 | 第62-64页 |
| ·中国李S-RNases的序列相似性比较 | 第64-65页 |
| ·中国李S-RNase-10和梅S-RNase-1的序列比较 | 第65-67页 |
| ·中国李S-RNases的蛋白质一级结构特征 | 第67-68页 |
| ·中国李S-RNase基因在花柱中特异性表达 | 第68页 |
| 3.讨论 | 第68-72页 |
| ·本研究成功克隆了S-RNases基因 | 第68-69页 |
| ·S-RNases基因型相同的中国李品种间授粉不能结实 | 第69页 |
| ·不同S基因型品种的授粉组合坐果率的差异 | 第69-71页 |
| ·中国李S-RNase-h在本研究样本中表现最高的基因频率 | 第71-72页 |
| 第四章 中国李自交不亲和性花粉S特异性识别决定因子(PsSFB基因)的克隆及其序列分析 | 第72-84页 |
| 1.材料与方法 | 第73-76页 |
| ·植物材料 | 第73-74页 |
| ·实验方法 | 第74-76页 |
| ·核酸的提取 | 第74页 |
| ·基因组的PCR扩增 | 第74-75页 |
| ·RT-PCR分析 | 第75页 |
| ·PCR产物的回收、克隆与测序 | 第75页 |
| ·序列分析 | 第75页 |
| ·系统树分析 | 第75-76页 |
| 2.结果与分析 | 第76-81页 |
| ·中国李SFB基因的基因组扩增 | 第76-77页 |
| ·中国李SFB基因的序列分析 | 第77-79页 |
| ·中国李SFB基因在花粉中特异性表达 | 第79-80页 |
| ·中国李SFB基因与S-RNase基因的物理距离 | 第80-81页 |
| 3.讨论 | 第81-84页 |
| ·中国李8个新SFB基因的成功克隆 | 第81-83页 |
| ·中国李SFB基因的应用 | 第83页 |
| ·中国李SFB基因的研究展望 | 第83-84页 |
| 第五章 中国樱桃‘南京垂丝’自交亲和性机制研究 | 第84-100页 |
| 1.材料与方法 | 第86-88页 |
| ·植物材料 | 第86页 |
| ·实验方法 | 第86-88页 |
| ·授粉试验与花粉管观察 | 第86页 |
| ·核酸的提取 | 第86页 |
| ·中国樱桃S-RNase基因和SFB基因的cDNA克隆 | 第86-87页 |
| ·区分中国樱桃SFB基因的CAPS标记 | 第87页 |
| ·中国樱桃S-RNase基因和SFB基因的基因组扩增 | 第87-88页 |
| ·中国樱桃S-RNase和SFB基因间区域的PCR扩增 | 第88页 |
| ·中国樱桃S-RNase基因和SFB基因的表达特异性分析 | 第88页 |
| 2.结果与分析 | 第88-96页 |
| ·中国樱桃‘南京垂丝’的自交亲和性鉴定 | 第88-89页 |
| ·中国樱桃S-RNase基因和SFB基因的鉴定 | 第89-93页 |
| ·中国樱桃S-RNase基因和SFB基因分别在花柱和花粉中特异性表达 | 第93-95页 |
| ·中国樱桃S单元型的连锁性分析 | 第95-96页 |
| 3.讨论 | 第96-100页 |
| ·中国樱桃4个S单元型的成功鉴定 | 第96页 |
| ·中国樱桃S单元型的四体遗传及其功能分析 | 第96-98页 |
| ·两个PpsS-haplotypes之间的‘竞争性效应’导致了中国樱桃表现自交亲和性 | 第98-100页 |
| 综合讨论 | 第100-110页 |
| 1.中国李的自交不亲和性 | 第100-103页 |
| 2.中国李传统品种的S-RNase基因多态性 | 第103-104页 |
| 3.‘南京垂丝’S单元型间的‘竞争性效应’ | 第104-107页 |
| 4.蔷薇科果树S单元型特异性识别位点 | 第107-110页 |
| 全文结论与创新点 | 第110-112页 |
| 参考文献 | 第112-126页 |
| 攻读博士学位期间发表的论文 | 第126-128页 |
| 致谢 | 第128页 |
