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陆地棉TM-1BAC文库及12和26号染色体初步物理图谱的构建

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-9页
本文所用主要缩略词第9-11页
第一章 基因组文库的研究进展第11-19页
   ·λ噬菌体文库和Cosmid文库第11页
   ·酵母人工染色体(YAC)第11-12页
   ·细菌人工染色体(BAC)第12-16页
     ·BAC文库载体的发展第12-13页
     ·BAC文库的构建第13-14页
     ·BAC文库的分类第14-15页
     ·BAC文库的优点第15页
     ·BAC文库的应用第15-16页
   ·P1克隆系统和源于P1的人工染色体(PAC)第16页
   ·双元细菌人工染色体(BIBAC)第16-17页
   ·可转化人工染色体文库(transformation-competent artificial chromosome,TAC)第17-18页
   ·各克隆系统之间的比较第18-19页
第二章 BAC文库在棉花基因组研究的进展第19-27页
   ·已构建的棉花BAC文库第19-21页
   ·BAC与基因的图位克隆第21-23页
     ·质量性状基因的图位克隆第21-22页
     ·数量性状基因的图位克隆第22-23页
   ·BAC与基因组物理图谱的构建第23-25页
     ·棉花高密度分子遗传图谱的构建第23-24页
     ·棉花的物理作图第24-25页
   ·BAC-FISH技术的应用第25页
   ·BAC与新的分子标记的开发第25-26页
   ·BAC与比较基因组学第26-27页
研究的目的和意义第27-28页
第三章 陆地棉遗传标准系TM-1BAC文库的构建第28-50页
   ·引言第28页
   ·实验材料第28-29页
     ·文库构建材料第28页
     ·菌株和载体第28页
     ·试验试剂第28-29页
   ·实验方法第29-40页
     ·棉花高分子量DNA(high molecular weigth,HMW)的制备第29-30页
     ·非目的片段的去除第30页
     ·部分酶切最佳酶量的确定第30-31页
     ·大片段DNA的大量酶切第31页
     ·酶切DNA片段的两次选择第31-33页
     ·电洗脱回收大片段DNA第33-34页
     ·大片段DNA与载体的连接第34页
     ·连接产物的转化第34-35页
     ·单克隆文库与混合池的构建第35-38页
     ·BAC文库的检测第38-39页
     ·细菌质粒DNA的提取第39-40页
     ·主要试剂第40页
   ·结果与分析第40-47页
     ·棉花HMW-DNA的提取第40-41页
     ·最佳部分酶切酶浓度的确定第41-43页
     ·酶切片段的第二次选择第43页
     ·电洗脱回收大片段DNA第43-44页
     ·连接与转化第44-45页
     ·单克隆的挑取与混合池的构建第45页
     ·文库质量检测第45-47页
   ·讨论第47-50页
     ·高质量棉花基因组DNA的提取第47-48页
     ·载体的制备第48页
     ·部分酶切和大片段的选择第48页
     ·目的片段的连接与转化第48-50页
第四章 陆地棉12和26号染色体物理图谱的构建第50-65页
   ·引言第50页
   ·实验材料第50-51页
     ·文库来源第50页
     ·标记来源第50-51页
     ·限制性内切酶第51页
   ·实验方法第51-55页
     ·TM-1BAC文库的构建第51页
     ·高密度遗传图谱的构建第51-52页
     ·PCR法筛选BAC文库第52-54页
     ·BAC克隆的纯化第54页
     ·BAC克隆质粒的提取第54页
     ·酶切分析第54-55页
     ·重叠群的构建第55页
   ·结果与分析第55-63页
     ·文库的筛选第55-56页
     ·质粒的提取与酶切第56-58页
     ·重叠群的构建第58-63页
   ·讨论第63-65页
     ·物理图谱的构建第63-64页
     ·BAC文库的筛选第64-65页
全文结论第65页
参考文献第65-73页
附录第73-79页
致谢第79页

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