摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-9页 |
本文所用主要缩略词 | 第9-11页 |
第一章 基因组文库的研究进展 | 第11-19页 |
·λ噬菌体文库和Cosmid文库 | 第11页 |
·酵母人工染色体(YAC) | 第11-12页 |
·细菌人工染色体(BAC) | 第12-16页 |
·BAC文库载体的发展 | 第12-13页 |
·BAC文库的构建 | 第13-14页 |
·BAC文库的分类 | 第14-15页 |
·BAC文库的优点 | 第15页 |
·BAC文库的应用 | 第15-16页 |
·P1克隆系统和源于P1的人工染色体(PAC) | 第16页 |
·双元细菌人工染色体(BIBAC) | 第16-17页 |
·可转化人工染色体文库(transformation-competent artificial chromosome,TAC) | 第17-18页 |
·各克隆系统之间的比较 | 第18-19页 |
第二章 BAC文库在棉花基因组研究的进展 | 第19-27页 |
·已构建的棉花BAC文库 | 第19-21页 |
·BAC与基因的图位克隆 | 第21-23页 |
·质量性状基因的图位克隆 | 第21-22页 |
·数量性状基因的图位克隆 | 第22-23页 |
·BAC与基因组物理图谱的构建 | 第23-25页 |
·棉花高密度分子遗传图谱的构建 | 第23-24页 |
·棉花的物理作图 | 第24-25页 |
·BAC-FISH技术的应用 | 第25页 |
·BAC与新的分子标记的开发 | 第25-26页 |
·BAC与比较基因组学 | 第26-27页 |
研究的目的和意义 | 第27-28页 |
第三章 陆地棉遗传标准系TM-1BAC文库的构建 | 第28-50页 |
·引言 | 第28页 |
·实验材料 | 第28-29页 |
·文库构建材料 | 第28页 |
·菌株和载体 | 第28页 |
·试验试剂 | 第28-29页 |
·实验方法 | 第29-40页 |
·棉花高分子量DNA(high molecular weigth,HMW)的制备 | 第29-30页 |
·非目的片段的去除 | 第30页 |
·部分酶切最佳酶量的确定 | 第30-31页 |
·大片段DNA的大量酶切 | 第31页 |
·酶切DNA片段的两次选择 | 第31-33页 |
·电洗脱回收大片段DNA | 第33-34页 |
·大片段DNA与载体的连接 | 第34页 |
·连接产物的转化 | 第34-35页 |
·单克隆文库与混合池的构建 | 第35-38页 |
·BAC文库的检测 | 第38-39页 |
·细菌质粒DNA的提取 | 第39-40页 |
·主要试剂 | 第40页 |
·结果与分析 | 第40-47页 |
·棉花HMW-DNA的提取 | 第40-41页 |
·最佳部分酶切酶浓度的确定 | 第41-43页 |
·酶切片段的第二次选择 | 第43页 |
·电洗脱回收大片段DNA | 第43-44页 |
·连接与转化 | 第44-45页 |
·单克隆的挑取与混合池的构建 | 第45页 |
·文库质量检测 | 第45-47页 |
·讨论 | 第47-50页 |
·高质量棉花基因组DNA的提取 | 第47-48页 |
·载体的制备 | 第48页 |
·部分酶切和大片段的选择 | 第48页 |
·目的片段的连接与转化 | 第48-50页 |
第四章 陆地棉12和26号染色体物理图谱的构建 | 第50-65页 |
·引言 | 第50页 |
·实验材料 | 第50-51页 |
·文库来源 | 第50页 |
·标记来源 | 第50-51页 |
·限制性内切酶 | 第51页 |
·实验方法 | 第51-55页 |
·TM-1BAC文库的构建 | 第51页 |
·高密度遗传图谱的构建 | 第51-52页 |
·PCR法筛选BAC文库 | 第52-54页 |
·BAC克隆的纯化 | 第54页 |
·BAC克隆质粒的提取 | 第54页 |
·酶切分析 | 第54-55页 |
·重叠群的构建 | 第55页 |
·结果与分析 | 第55-63页 |
·文库的筛选 | 第55-56页 |
·质粒的提取与酶切 | 第56-58页 |
·重叠群的构建 | 第58-63页 |
·讨论 | 第63-65页 |
·物理图谱的构建 | 第63-64页 |
·BAC文库的筛选 | 第64-65页 |
全文结论 | 第65页 |
参考文献 | 第65-73页 |
附录 | 第73-79页 |
致谢 | 第79页 |