| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-18页 |
| 第一章 绪论 | 第18-41页 |
| ·外来生物入侵 | 第18页 |
| ·外来入侵生物适应性的重要意义 | 第18-24页 |
| ·外来入侵生物的适应性 | 第18-19页 |
| ·外来入侵生物生态适应性的作用机制－表型可塑性 | 第19-20页 |
| ·表型可塑性在外来植物入侵过程中的适应作用 | 第20-21页 |
| ·外来入侵生物的适应性进化 | 第21-22页 |
| ·增强竞争力的进化假说 | 第22-23页 |
| ·外来入侵生物适应性的主要研究方法 | 第23-24页 |
| ·生态适应性的分子机理研究 | 第24-28页 |
| ·生态适应与生态进化的耦合过程 | 第25页 |
| ·特异蛋白 | 第25-26页 |
| ·诱导表达的基因 | 第26-28页 |
| ·紫茎泽兰的危害与入侵机制 | 第28-30页 |
| ·紫茎泽兰的危害 | 第28-29页 |
| ·紫茎泽兰对温度的生态适应机制 | 第29-30页 |
| ·紫茎泽兰入侵扩张的分子机理 | 第30页 |
| ·热激蛋白在植物温度胁迫适应性方面的研究意义 | 第30-39页 |
| ·热激蛋白的定义 | 第30-31页 |
| ·热激蛋白的分类和定位 | 第31页 |
| ·热激蛋白的特征 | 第31-32页 |
| ·热激蛋白基因表达的调控 | 第32-33页 |
| ·热激蛋白的生物学功能 | 第33-39页 |
| ·本研究的目的及意义 | 第39-41页 |
| 第二章 低温胁迫下紫茎泽兰高海拔种群的生理生化分析 | 第41-54页 |
| ·实验材料 | 第42页 |
| ·植物材料的收集 | 第42页 |
| ·实验方法 | 第42-45页 |
| ·植物材料的培养 | 第42页 |
| ·低温处理 | 第42-44页 |
| ·耐寒性生理生化指标的测定 | 第44-45页 |
| ·结果与分析 | 第45-51页 |
| ·紫茎泽兰种群的采集与扩繁 | 第45-46页 |
| ·高海拔种群紫茎泽兰低温处理下受害症状 | 第46页 |
| ·低温处理后各种群生理指标的变化 | 第46-51页 |
| ·小结与讨论 | 第51-54页 |
| 第三章 紫茎泽兰热激蛋白基因的克隆与序列分析 | 第54-79页 |
| ·实验材料 | 第54-55页 |
| ·植物材料和菌种载体 | 第54-55页 |
| ·工具酶和生化试剂 | 第55页 |
| ·试剂盒与其它 | 第55页 |
| ·溶液配制 | 第55页 |
| ·实验方法 | 第55-66页 |
| ·RNA 提取 | 第55页 |
| ·cDNA 的合成 | 第55-56页 |
| ·引物设计与合成 | 第56-57页 |
| ·PCR 扩增目的基因片段 | 第57-58页 |
| ·目的基因的回收与连接 | 第58-59页 |
| ·E.coli Top10 感受态细胞制备及转化 | 第59-60页 |
| ·SDS 碱裂解法小量制备质粒DNA 与重组子筛选 | 第60-61页 |
| ·RACE 方法获得目的基因全长序列 | 第61-65页 |
| ·全长基因序列的获得与分析 | 第65-66页 |
| ·全长基因蛋白序列的结构、进化分析 | 第66页 |
| ·结果与分析 | 第66-77页 |
| ·热激蛋白基因的全长序列获得结果 | 第66页 |
| ·序列分析 | 第66-75页 |
| ·运用生物信息软件进行蛋白结构与功能预测 | 第75-77页 |
| ·小结与讨论 | 第77-79页 |
| 第四章 紫茎泽兰热激蛋白基因温度逆境下的表达动态分析 | 第79-93页 |
| ·实验材料 | 第79-80页 |
| ·菌种载体 | 第79页 |
| ·工具酶和生化试剂 | 第79页 |
| ·试剂盒与其它 | 第79页 |
| ·溶液配制 | 第79-80页 |
| ·实验方法 | 第80-87页 |
| ·半定量PCR 验证 | 第80-82页 |
| ·Northern 杂交分析热激蛋白温度逆境下的表达模式 | 第82-85页 |
| ·Southern 杂交 | 第85-87页 |
| ·结果与分析 | 第87-90页 |
| ·紫茎泽兰HSPs 基因的表达组织特异性分析 | 第87-88页 |
| ·HSPs 基因在温度逆境下的表达动态 | 第88页 |
| ·HSPs 基因家族分析 | 第88-90页 |
| ·小结与讨论 | 第90-93页 |
| 第五章 紫茎泽兰 HSPS 的原核表达和功能分析 | 第93-102页 |
| ·实验材料 | 第93页 |
| ·菌株载体 | 第93页 |
| ·工具酶和生化试剂 | 第93页 |
| ·试剂盒和其它材料 | 第93页 |
| ·培养基 | 第93页 |
| ·实验方法 | 第93-96页 |
| ·原核表达载体pET-30a-Aahsps 的构建 | 第93-96页 |
| ·重组pET-30a-Aahsps 的诱导表达 | 第96页 |
| ·大肠杆菌细胞活力实验 | 第96页 |
| ·大肠杆菌可溶性蛋白分析 | 第96页 |
| ·结果与分析 | 第96-100页 |
| ·原核表达SDS-PAGE 分析 | 第96-97页 |
| ·Aahsps 的转入对大肠杆菌在适温(37°C)条件下的生长没有影响 | 第97-98页 |
| ·异源表达Aahsps 提高大肠杆菌的耐热性 | 第98页 |
| ·低温条件下Aahsps 的表达对大肠杆菌的保护作用 | 第98-100页 |
| ·小结与讨论 | 第100-102页 |
| 第六章 紫茎泽兰 HSP90 和 HSP17.6 基因启动子的克隆及其序列分析 | 第102-114页 |
| ·材料与方法 | 第102-107页 |
| ·材料 | 第102页 |
| ·DNA 提取 | 第102页 |
| ·染色体步行法克隆hsp90 启动子 | 第102-103页 |
| ·TAIL-PCR 克隆紫茎泽兰hsp17.6 基因的启动子 | 第103-106页 |
| ·hsp90 和hsp17.6 启动子的突变表达载体的构建 | 第106-107页 |
| ·结果与分析 | 第107-111页 |
| ·紫茎泽兰hsp90 启动子克隆 | 第107页 |
| ·紫茎泽兰hsp17.6 启动子克隆 | 第107-108页 |
| ·hsp90 和hsp17.6 启动子序列的分析 | 第108-111页 |
| ·hsp90 和hsp17.6 启动子的突变表达载体的构建 | 第111页 |
| ·小结与讨论 | 第111-114页 |
| 第七章 紫茎泽兰sHSPs 的理化性质分析 | 第114-126页 |
| ·实验材料 | 第114-115页 |
| ·菌株载体 | 第114页 |
| ·工具酶和生化试剂 | 第114页 |
| ·试剂盒和其它材料 | 第114-115页 |
| ·实验方法 | 第115-117页 |
| ·大肠杆菌表达载体pET-30a-hsp17.6 和pET-30a-hsp17.7 的构建 | 第115-116页 |
| ·重组pET-30a-hsp17.6 和pET-30a-Ahsp17.7 的诱导表达 | 第116页 |
| ·重组pET-30a-hsp17.6 和pET-30a-hsp17.7 的纯化 | 第116-117页 |
| ·分子伴侣活性测定 | 第117页 |
| ·结果与分析 | 第117-124页 |
| ·紫茎泽兰HSP17.6 和HSP17.7 的蛋白序列的比对分析 | 第117-118页 |
| ·利用融合蛋白表达载体获得高纯度的纯化sHSPs | 第118-121页 |
| ·HSP17.6 和HSP17.7 可减缓CS 的热变性 | 第121页 |
| ·HSP17.6 和HSP17.7 促进热变性的CS 复性 | 第121-124页 |
| ·小结与讨论 | 第124-126页 |
| 第八章 转 Aahsp17.6 基因植物耐寒性分析 | 第126-140页 |
| ·实验材料 | 第126-127页 |
| ·植物材料 | 第126页 |
| ·菌种和质粒 | 第126页 |
| ·酶及化学试剂 | 第126-127页 |
| ·培养基 | 第127页 |
| ·主要仪器设备 | 第127页 |
| ·实验方法 | 第127-133页 |
| ·叶绿体sHSP 植物表达框架的构建及农杆菌的转化 | 第127-130页 |
| ·根癌农杆菌Ti 质粒介导的植物遗传转化 | 第130-132页 |
| ·转基因植物的分子鉴定 | 第132页 |
| ·指标测定 | 第132-133页 |
| ·结果与分析 | 第133-137页 |
| ·植物双元表达载体的构建 | 第133-134页 |
| ·抗生素浓度的筛选 | 第134页 |
| ·转基因番茄的获得 | 第134-135页 |
| ·转基因番茄的鉴定 | 第135-136页 |
| ·转Aahsp17.6 基因番茄的耐寒性分析 | 第136-137页 |
| ·小结与讨论 | 第137-140页 |
| 第九章 结论与展望 | 第140-142页 |
| ·本文结论 | 第140-141页 |
| ·本研究创新点 | 第141页 |
| ·展望 | 第141-142页 |
| 参考文献 | 第142-156页 |
| 致谢 | 第156-157页 |
| 作者简历 | 第157页 |
