| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-27页 |
| ·马铃薯和番茄晚疫病 | 第12-15页 |
| ·晚疫病对马铃薯和番茄生产的危害 | 第12页 |
| ·晚疫病致病菌 | 第12-13页 |
| ·番茄和马铃薯晚疫病菌 | 第13页 |
| ·番茄抗晚疫病资源及其研究进展 | 第13-14页 |
| ·马铃薯抗晚疫病资源及其研究进展 | 第14-15页 |
| ·植物抗病信号传导 | 第15-20页 |
| ·植物抗病类型 | 第15-16页 |
| ·基因对基因假说 | 第16页 |
| ·抗病基因的类型和结构域功能 | 第16-17页 |
| ·无毒基因 | 第17-18页 |
| ·R 基因下游抗病信号传导的关键基因 | 第18-20页 |
| ·培育无标记基因转基因作物的研究进展 | 第20-22页 |
| ·转基因作物的种植情况 | 第20-21页 |
| ·标记基因的安全性问题 | 第21页 |
| ·无选择性标记的转基因技术 | 第21-22页 |
| ·病毒诱导基因沉默和农杆菌瞬时表达 | 第22-25页 |
| ·病毒诱导基因沉默的机理 | 第22-23页 |
| ·病毒诱导基因沉默载体的构建 | 第23页 |
| ·病毒诱导基因沉默的应用 | 第23-24页 |
| ·农杆菌介导的瞬时表达的原理及应用 | 第24-25页 |
| ·论文的立题依据、研究目的及意义和研究内容 | 第25-27页 |
| ·立题依据 | 第25-26页 |
| ·研究目的和意义 | 第26页 |
| ·研究内容 | 第26-27页 |
| 第二章 抗晚疫病基因 RB 的番茄转化 | 第27-34页 |
| ·前言 | 第27页 |
| ·材料与方法 | 第27-29页 |
| ·材料 | 第27-28页 |
| ·方法 | 第28-29页 |
| ·结果与分析 | 第29-32页 |
| ·转基因番茄标记基因NPTⅡ的PCR 鉴定 | 第29-30页 |
| ·转基因番茄目的基因PCR 鉴定 | 第30页 |
| ·RB 转基因植株对马铃薯晚疫病菌株显示抗性 | 第30-31页 |
| ·RB 转基因植株对番茄晚疫病菌株显示广谱抗性 | 第31-32页 |
| ·RB 在T1 代中的分离 | 第32页 |
| ·讨论 | 第32-33页 |
| ·马铃薯抗晚疫病基因RB 在番茄中具有晚疫病抗性 | 第32-33页 |
| ·马铃薯抗晚疫病基因RB 可用于番茄的抗晚疫病育种 | 第33页 |
| ·RB 基因可稳定遗传 | 第33页 |
| ·结论 | 第33-34页 |
| 第三章 抗晚疫病基因 RB 的无标记载体构建 | 第34-42页 |
| ·前言 | 第34-35页 |
| ·材料与方法 | 第35-37页 |
| ·材料 | 第35页 |
| ·方法 | 第35-37页 |
| ·结果与分析 | 第37-41页 |
| ·目的片段RB 的获得 | 第37-38页 |
| ·BamHI酶切无标记载体pBINMF | 第38-39页 |
| ·pBINMF线性载体去磷酸化梯度筛选 | 第39页 |
| ·RB 片段连接到pBINMF 载体PCR 检测 | 第39-40页 |
| ·SalI/EcoRI双酶切检测重组质粒 | 第40-41页 |
| ·RB无标记载体与Avrblb1 农杆菌瞬时表达 | 第41页 |
| ·讨论 | 第41页 |
| ·结论 | 第41-42页 |
| 第四章 用VIGS研究已知信号转导关键基因是否参与 RB-Avrblb1 互作 | 第42-54页 |
| ·前言 | 第42-43页 |
| ·材料与方法 | 第43-48页 |
| ·材料 | 第43-44页 |
| ·RNA 的提取 | 第44页 |
| ·反转录RT-PCR | 第44-45页 |
| ·VIGS 重组载体的构建 | 第45页 |
| ·PCR产物酶切体 | 第45-46页 |
| ·载体连接 | 第46页 |
| ·热击转化大肠杆菌DH5α | 第46页 |
| ·农杆菌GV3101 感受细胞的制备 | 第46-47页 |
| ·电击转化农杆菌GV3101 | 第47页 |
| ·VIGS 操作步骤 | 第47页 |
| ·瞬时表达操作步骤 | 第47页 |
| ·半定量RT-PCR | 第47-48页 |
| ·结果与分析 | 第48-52页 |
| ·pTV00 重组载体的构建 | 第48-49页 |
| ·VIGS 体系建立 | 第49页 |
| ·RB-Avrblb1 瞬时表达体系建立 | 第49-50页 |
| ·VIGS 沉默后的RT-PCR 验证和烟草植株表型 | 第50-51页 |
| ·SGT1、HSP90 参与RB-Avrblb1 及INF1 的信号传导途径 | 第51-52页 |
| ·讨论 | 第52-53页 |
| ·VIGS 和瞬时表达结合是研究马铃薯晚疫病抗病信号途径的有效方法 | 第52页 |
| ·SGT1 和HSP90 参与RB-Avrblb1 信号传导途径 | 第52-53页 |
| ·其它信号途径关键基因没有阻断RB-Avrblb1 诱导HR反应的原因 | 第53页 |
| ·结论 | 第53-54页 |
| 第五章 全文结论 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-65页 |
| 附录 | 第65-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |
| 作者简历 | 第69页 |
