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绵羊CAST、MC4R和BTG1基因的克隆、组织表达和遗传多态性分析

摘要第1-7页
Abstract第7-12页
第一章 文献综述第12-20页
   ·影响绵羊产肉性状的候选基因第12-16页
     ·MRFs 基因家族的研究进展第12-13页
     ·肌肉生长抑制素(Myostatin)基因第13页
     ·胰岛素样生长因子(IGF)基因第13-14页
     ·Pax 基因第14页
     ·CAST 基因的研究进展第14-16页
     ·MC4R 的研究进展第16页
     ·BTG1 的研究进展第16页
   ·PCR-SSCP 技术的原理和应用第16-17页
   ·PCR-RFLP 技术的原理和应用第17页
   ·PIRA-PCR 技术第17页
   ·REAL-TIME PCR 基本原理与方法第17-19页
     ·Real-time PCR 原理第17-18页
     ·技术方法第18-19页
   ·研究的目的和意义第19-20页
第二章 CAST、MC4R 和BTG1 基因CDNA 片段克隆及序列分析第20-40页
   ·实验材料第20-23页
     ·实验样品第20页
     ·主要仪器设备第20-21页
     ·实验试剂第21页
     ·主要试剂的配制第21-23页
   ·实验方法第23-28页
     ·组织DNA 的提取第23-24页
     ·DNA 纯度和浓度的检测第24页
     ·组织总RNA 的提取第24页
     ·总 RNA 的检测第24-25页
     ·cDNA 第一链的合成第25页
     ·cDNA 第一链检测第25-26页
     ·引物的设计与合成第26-27页
     ·PCR 扩增反应第27页
     ·克隆及测序第27-28页
   ·结果第28-37页
     ·基因组和总RNA 的提取结果第28-29页
     ·CAST 基因cDNA 片段的克隆及序列分析第29-32页
     ·MC4R 基因的克隆及序列分析第32-35页
     ·BTG1 基因cDNA 片段的克隆及序列分析第35-37页
   ·讨论第37-40页
     ·关于CAST 基因第37-38页
     ·关于MC4R 基因第38页
     ·关于BTG1 基因第38-40页
第三章 CAST、MC4R 和BTG1MRNA 的组织表达分析第40-52页
   ·实验材料第40页
     ·实验样品第40页
     ·主要仪器第40页
     ·主要试剂第40页
   ·实验方法第40-43页
     ·总RNA 的提取及反转录第40页
     ·半定量RT-PCR第40-42页
     ·荧光定量PCR第42-43页
   ·结果与分析第43-50页
     ·半定量的结果第43-47页
     ·荧光定量PCR 的结果第47-50页
   ·讨论第50-52页
     ·CAST 基因组织表达谱第50页
     ·关于MC4R 基因组织表达谱第50-51页
     ·关于BTG1 基因组织表达谱第51-52页
第四章 CAST、MC4R 和BTG1 基因的遗传多态性分析第52-69页
   ·实验材料第52-53页
     ·实验样品第52页
     ·主要仪器设备第52页
     ·实验试剂第52页
     ·聚丙烯酰胺凝胶电泳所用的相关试剂的配制第52-53页
   ·实验方法第53-55页
     ·PCR 扩增第53页
     ·聚丙烯酰胺凝胶电泳PCR-SSCP 分析方法第53-54页
     ·PCR-RFLP第54页
     ·PIRA-PCR第54页
     ·统计分析方法第54-55页
   ·结果第55-67页
     ·CAST 基因3’-UTR 区的 PCR-SSCP 的结果第55-59页
     ·MC4R 基因多态性检测第59-62页
     ·BTG1 基因多态性检测第62-63页
     ·统计分析结果第63-67页
   ·讨论第67-69页
     ·PCR-RFLP、PIRA-PCR、PCR-SSCP 和克隆测序分析第67-68页
     ·CAST 和 MC4R 基因的突变第68页
     ·CAST 和 MC4R 基因的SNP 与生产性状的关联分析第68-69页
第五章 全文结论第69-70页
参考文献第70-76页
附录第76-79页
致谢第79-80页
作者简介第80页

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