产单核细胞李氏杆菌溶血素基因的克隆与表达
| 摘要 | 第1-4页 |
| SUMMARY | 第4-7页 |
| 第一篇 文献综述 | 第7-22页 |
| 1 LMO的分布及危害 | 第7-8页 |
| 2 LMO的生物学特性 | 第8-9页 |
| 3 LMO的分类 | 第9-12页 |
| 4 LMO的主要毒力基因 | 第12-14页 |
| 5 致病机理 | 第14-15页 |
| 6 活载体疫苗的研究 | 第15-16页 |
| 7 检测技术研究进展 | 第16-22页 |
| 第二篇 研究报告 | 第22-43页 |
| 1 材料与方法 | 第23-34页 |
| ·菌种 | 第23页 |
| ·实验动物 | 第23页 |
| ·LMO培养 | 第23页 |
| ·溶血素基因的克隆 | 第23-28页 |
| ·重组表达载体的构建 | 第28-30页 |
| ·重组质粒的诱导表达 | 第30-31页 |
| ·表达溶血素的纯化 | 第31-32页 |
| ·表达产物的SDS-PAGE电泳分析 | 第32页 |
| ·表达溶血素的免疫学活性分析 | 第32-33页 |
| ·表达溶血素的免疫保护力试验 | 第33-34页 |
| ·LLO间接ELISA方法的建立 | 第34页 |
| 2 结果 | 第34-41页 |
| ·hlyA保守区序列的扩增 | 第34-35页 |
| ·重组质粒的序列分析 | 第35页 |
| ·表达载体的构建及鉴定 | 第35页 |
| ·表达产物的SDS—PAGE电泳 | 第35-36页 |
| ·表达条件的优化 | 第36-38页 |
| ·表达溶血素的纯化 | 第38-39页 |
| ·Western-blot分析 | 第39页 |
| ·ELISA方法的建立 | 第39-40页 |
| ·表达的溶血素免疫小鼠及家兔的抗体动态变化 | 第40-41页 |
| ·免疫保护试验结果 | 第41页 |
| 3 讨论 | 第41-42页 |
| 4 结论 | 第42-43页 |
| 致谢 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-50页 |
| 附录1 试验所用溶液及其配制 | 第50-53页 |
| 附表2 缩略词 | 第53-56页 |