| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-15页 |
| 第一章 前言 | 第15-38页 |
| 一、类风湿关节炎的发病因素 | 第15-22页 |
| 1 细胞因子与类风湿关节炎 | 第16-19页 |
| 2 Th1/Th2平衡与类风湿关节炎 | 第19-20页 |
| 3 细胞凋亡与类风湿关节炎 | 第20页 |
| 4 性激素与类风湿关节炎 | 第20-21页 |
| 5 原癌基因与类风湿关节炎 | 第21-22页 |
| 二、类风湿关节炎的治疗 | 第22-29页 |
| 1 外科治疗 | 第22页 |
| 2 内科治疗 | 第22-24页 |
| 3 生物治疗 | 第24-27页 |
| 4 基因治疗 | 第27-28页 |
| 5 造血干细胞移植疗法 | 第28页 |
| 6 新的治疗靶向 | 第28-29页 |
| 三、作为免疫相关性疾病靶点的死亡受体5(DR5)的研究进展 | 第29-36页 |
| 1 死亡受体5(DR5)的结构和分布 | 第30页 |
| 2 死亡受体5(DR5)与肿瘤细胞凋亡 | 第30-35页 |
| 3 死亡受体5(DR5)与类风湿关节炎 | 第35-36页 |
| 四、实验方案设计 | 第36-38页 |
| 1 研究目的和意义 | 第36-37页 |
| 2 研究内容 | 第37-38页 |
| 第二章 抗人DR5单克隆抗体的制备及作用分析 | 第38-58页 |
| 一、材料和方法 | 第38-51页 |
| 1 材料 | 第38-43页 |
| ·实验动物及细胞株 | 第38页 |
| ·主要试剂及耗材 | 第38-39页 |
| ·主要仪器及设备 | 第39页 |
| ·主要溶液的配制 | 第39-43页 |
| 2 方法 | 第43-51页 |
| ·杂交瘤细胞系的建立 | 第43-45页 |
| ·单克隆抗体的制备和纯化 | 第45页 |
| ·单克隆抗体的特异性鉴定 | 第45-47页 |
| ·单克隆抗体的效价及Ig亚类鉴定 | 第47-48页 |
| ·流式细胞仪检测L342细胞表面DR5的表达 | 第48页 |
| ·RT-PCR检测肿瘤细胞Fas和DR5的表达 | 第48-50页 |
| ·MTT法检测FasL、Anti-DR5 mAb对肿瘤细胞L342增殖的影响 | 第50页 |
| ·流式细胞仪检测Anti-DR5 mAb对肿瘤细胞L342的凋亡诱导作用 | 第50页 |
| ·统计学方法处理实验数据 | 第50-51页 |
| 二、结果与分析 | 第51-56页 |
| 1 杂交瘤细胞系的建立 | 第51页 |
| 2 单克隆抗体的纯化 | 第51页 |
| 3 单克隆抗体的特异性鉴定 | 第51-53页 |
| 4 单克隆抗体的效价测定及Ig亚类鉴定 | 第53-54页 |
| 5 流式细胞仪检测L342细胞表面DR5的表达 | 第54页 |
| 6 Fas和DR5在肿瘤细胞的表达(mRNA水平) | 第54页 |
| 7 FasL、Anti-DR5 mAb对肿瘤细胞L342增殖的影响 | 第54-56页 |
| 8 流式细胞仪检测Anti-DR5 mAb对肿瘤细胞L342的凋亡诱导作用 | 第56页 |
| 三、讨论 | 第56-58页 |
| 第三章 佐剂型关节炎(AA)大鼠模型的建立和Anti-DR5 mAb作用机理的研究 | 第58-72页 |
| 一、材料和方法 | 第58-66页 |
| 1 材料 | 第58-61页 |
| ·实验大鼠 | 第58页 |
| ·主要试剂及耗材 | 第58-59页 |
| ·主要仪器及设备 | 第59页 |
| ·主要溶液的配制 | 第59-61页 |
| 2 方法 | 第61-66页 |
| ·佐剂型关节炎(AA)大鼠模型的建立、分组及给药治疗 | 第61页 |
| ·滑膜组织细胞的分离 | 第61页 |
| ·血液淋巴细胞的分离 | 第61-62页 |
| ·滑膜与淋巴细胞总蛋白的提取 | 第62页 |
| ·关节滑膜液的获取与检测 | 第62页 |
| ·各组织器官总蛋白的提取 | 第62-63页 |
| ·各组织器官和滑膜细胞膜蛋白的提取 | 第63页 |
| ·各项指标的检测 | 第63-66页 |
| ·数据处理 | 第66页 |
| 二、结果与分析 | 第66-70页 |
| 1 Anti-DR5 mAb对AA大鼠关节炎症的影响 | 第66页 |
| 2 Anti-DR5 mAb对AA大鼠关节病理改变的影响 | 第66-67页 |
| 3 Anti-DR5 mAb治疗后血清和滑液中IL-1β,TNF-α,IFN-γ水平的变化 | 第67-68页 |
| 4 RT-PCR分析DR5 mRNA的表达 | 第68-69页 |
| 5 Western blot分析各组织Caspase-8、Bcl-2蛋白的表达 | 第69-70页 |
| 三、讨论 | 第70-72页 |
| 总结 | 第72-73页 |
| 参考文献 | 第73-82页 |
| 致谢 | 第82页 |
