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转基因猪中外源基因拷贝数和整合位点的研究

摘要第1-9页
Abstract第9-11页
1 前言第11-21页
   ·转基因动物简介第11-14页
     ·转基因动物的生产第11-13页
     ·转基因动物的检测方法第13-14页
     ·转基因动物的发展前景第14页
   ·体细胞核移植技术(克隆)在转基因动物生产中的应用第14-15页
   ·外源基因拷贝数的检测第15-16页
     ·Southern 印迹杂交法第15-16页
     ·实时荧光定量PCR 法第16页
   ·外源基因整合位点的检测第16-20页
     ·反向PCR 法第17页
     ·连接介导 PCR 法第17-18页
     ·热不对称交错 PCR 法第18-20页
   ·本研究的目的和意义第20-21页
2 材料与方法第21-33页
   ·实验材料第21-23页
     ·转基因猪、质粒和猪胎儿第21页
     ·工具酶、试剂盒及其它试剂第21页
     ·主要器材第21-22页
     ·缓冲液及主要试剂的配制第22-23页
     ·DNA 分析软件第23页
   ·实验方法第23-33页
     ·基因组 DNA 的提取第23-24页
     ·转基因猪的鉴定第24-26页
     ·绝对定量PCR 对外源基因拷贝数的检测第26页
     ·外源基因整合位点的克隆与分析第26-31页
     ·整合位点纯合性分析第31-32页
     ·数据分析第32-33页
3 结果与分析第33-44页
   ·转基因猪鉴定结果第33-35页
     ·PCR 对 F1 子代的鉴定结果第33页
     ·Southern blot 的鉴定结果第33-35页
   ·绝对定量PCR 对外源基因拷贝数的检测结果第35-38页
     ·绝对定量标准曲线第35-37页
     ·转基因拷贝数的鉴定第37-38页
   ·外源基因整合位点鉴定结果第38-43页
   ·整合位点纯合性分析结果第43-44页
4 讨论第44-47页
   ·关于转基因动物的鉴定第44页
   ·关于外源基因拷贝数的检测第44-45页
   ·关于整合位点的克隆第45-46页
   ·关于整合位点的纯合性第46页
   ·关于外源基因拷贝数的减少第46-47页
5 结论第47-48页
致谢第48-49页
参考文献第49-53页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第53页

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