摘要 | 第1-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
1 前言 | 第11-21页 |
·转基因动物简介 | 第11-14页 |
·转基因动物的生产 | 第11-13页 |
·转基因动物的检测方法 | 第13-14页 |
·转基因动物的发展前景 | 第14页 |
·体细胞核移植技术(克隆)在转基因动物生产中的应用 | 第14-15页 |
·外源基因拷贝数的检测 | 第15-16页 |
·Southern 印迹杂交法 | 第15-16页 |
·实时荧光定量PCR 法 | 第16页 |
·外源基因整合位点的检测 | 第16-20页 |
·反向PCR 法 | 第17页 |
·连接介导 PCR 法 | 第17-18页 |
·热不对称交错 PCR 法 | 第18-20页 |
·本研究的目的和意义 | 第20-21页 |
2 材料与方法 | 第21-33页 |
·实验材料 | 第21-23页 |
·转基因猪、质粒和猪胎儿 | 第21页 |
·工具酶、试剂盒及其它试剂 | 第21页 |
·主要器材 | 第21-22页 |
·缓冲液及主要试剂的配制 | 第22-23页 |
·DNA 分析软件 | 第23页 |
·实验方法 | 第23-33页 |
·基因组 DNA 的提取 | 第23-24页 |
·转基因猪的鉴定 | 第24-26页 |
·绝对定量PCR 对外源基因拷贝数的检测 | 第26页 |
·外源基因整合位点的克隆与分析 | 第26-31页 |
·整合位点纯合性分析 | 第31-32页 |
·数据分析 | 第32-33页 |
3 结果与分析 | 第33-44页 |
·转基因猪鉴定结果 | 第33-35页 |
·PCR 对 F1 子代的鉴定结果 | 第33页 |
·Southern blot 的鉴定结果 | 第33-35页 |
·绝对定量PCR 对外源基因拷贝数的检测结果 | 第35-38页 |
·绝对定量标准曲线 | 第35-37页 |
·转基因拷贝数的鉴定 | 第37-38页 |
·外源基因整合位点鉴定结果 | 第38-43页 |
·整合位点纯合性分析结果 | 第43-44页 |
4 讨论 | 第44-47页 |
·关于转基因动物的鉴定 | 第44页 |
·关于外源基因拷贝数的检测 | 第44-45页 |
·关于整合位点的克隆 | 第45-46页 |
·关于整合位点的纯合性 | 第46页 |
·关于外源基因拷贝数的减少 | 第46-47页 |
5 结论 | 第47-48页 |
致谢 | 第48-49页 |
参考文献 | 第49-53页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第53页 |