| 中文摘要 | 第1-10页 |
| 英文摘要 | 第10-23页 |
| 英汉缩略词对照表 | 第23-25页 |
| 前言 | 第25-28页 |
| 第一章:CXCR7在人结肠癌组织及细胞系中的表达及其意义 | 第28-48页 |
| 前言 | 第28页 |
| 技术路线 | 第28-29页 |
| 1 材料和方法 | 第29-40页 |
| ·实验材料 | 第29-33页 |
| ·实验方法 | 第33-39页 |
| ·实时荧光定量PCR检测CXCR7mRNA的表达 | 第33-38页 |
| ·Western blotting检测CXCR7蛋白的表达 | 第38-39页 |
| ·统计学分析 | 第39-40页 |
| 2 结果 | 第40-45页 |
| ·CXCR7mRNA的表达 | 第40-42页 |
| ·总RNA浓度、纯度及质量鉴定结果 | 第40页 |
| ·人结肠癌组织和正常结肠组织中CXCR7mRNA的表达 | 第40-42页 |
| ·CXCR7mRNA的表达与结肠癌临床病理因素分析 | 第42页 |
| ·人结肠癌细胞系HT-29和SW-480中CXCR7mRNA的表达 | 第42页 |
| ·CXCR7蛋白的表达 | 第42-45页 |
| ·人结肠癌组织和正常结肠组织中CXCR7蛋白的表达 | 第42-45页 |
| ·CXCR7蛋白的表达与结肠癌临床病理因素分析 | 第45页 |
| 3 讨论 | 第45-47页 |
| 小结 | 第47-48页 |
| 第二章:构建CXCR7shRNA重组慢病毒表达载体 | 第48-69页 |
| 前言 | 第48-49页 |
| 技术路线 | 第49-50页 |
| 1 材料与方法 | 第50-61页 |
| ·实验材料 | 第50-54页 |
| ·实验方法 | 第54-61页 |
| ·筛选有效抑制人结肠癌细胞CXCR7表达的siRNA序列 | 第54-59页 |
| ·CXCR7shRNA慢病毒表达载体的大量包装与纯化 | 第59-60页 |
| ·慢病毒载体滴度测定 | 第60-61页 |
| 2 结果 | 第61-64页 |
| ·筛选有效抑制人结肠癌细胞CXCR7表达的siRNA序列 | 第61-64页 |
| ·Plvthm-CXCR7shRNA重组质粒的DNA测序 | 第61-62页 |
| ·小量CXCR7shRNA慢病毒表达载体的包装 | 第62页 |
| ·在目的细胞中筛选有效的CXCR7siRNA干扰序列 | 第62-64页 |
| ·大量包装的慢病毒表达载体LV-CXCR7shRNA滴度测定 | 第64页 |
| 3 讨论 | 第64-68页 |
| 小结 | 第68-69页 |
| 第三章:靶向抑制CXCR7的表达对人结肠癌细胞生物学特性的影响 | 第69-81页 |
| 前言 | 第69页 |
| 技术路线 | 第69-70页 |
| 1 材料和方法 | 第70-72页 |
| ·实验材料 | 第70页 |
| ·实验方法 | 第70-72页 |
| ·人结肠癌细胞HT-29的培养 | 第70页 |
| ·实验分组 | 第70页 |
| ·细胞转染 | 第70-71页 |
| ·实时荧光定量PCR检测各组HT-29细胞CXCR7mRNA的表达 | 第71页 |
| ·Western-blotting检测各组HT-29细胞CXCR7蛋白的表达 | 第71页 |
| ·噻唑蓝法(MTT)检测各组HT-29细胞的增殖能力 | 第71-72页 |
| ·Transwell细胞迁移实验 | 第72页 |
| ·统计学分析 | 第72页 |
| 2 结果 | 第72-77页 |
| ·慢病毒载体转染HT-29细胞的效率 | 第72-73页 |
| ·各组HT-29细胞中CXCR7mRNA的表达 | 第73-74页 |
| ·各组HT-29细胞中CXCR7蛋白的表达水平 | 第74-75页 |
| ·噻唑蓝法(MTT)检测细胞的增殖能力 | 第75-76页 |
| ·Transwell细胞迁移实验 | 第76-77页 |
| 3 讨论 | 第77-80页 |
| 小结 | 第80-81页 |
| 第四章:CXCR7shRNA重组慢病毒表达载体对人结肠癌荷瘤裸鼠皮下种植瘤的治疗作用 | 第81-92页 |
| 前言 | 第81页 |
| 技术路线 | 第81-82页 |
| 1 材料和方法 | 第82-84页 |
| ·实验材料 | 第82页 |
| ·方法 | 第82-83页 |
| ·人结肠癌动物模型的建立及分组 | 第82-83页 |
| ·给药后瘤体的体积与抑瘤率分析 | 第83页 |
| ·实时荧光定量PCR测定瘤体组织中CXCR7mRNA表达 | 第83页 |
| ·Western-blotting测定瘤体组织中CXCR7蛋白的表达 | 第83页 |
| ·统计学分析 | 第83-84页 |
| 2 结果 | 第84-88页 |
| ·瘤体内给药后的肿瘤体积 | 第84-85页 |
| ·瘤体内给药后24天的瘤重和抑瘤率 | 第85-86页 |
| ·瘤体组织中CXCR7mRNA的表达水平 | 第86-87页 |
| ·瘤体组织中CXCR7蛋白的表达水平 | 第87-88页 |
| 3 讨论 | 第88-91页 |
| 小结 | 第91-92页 |
| 结论 | 第92-93页 |
| 创新与意义 | 第93-94页 |
| 参考文献 | 第94-103页 |
| 综述 | 第103-153页 |
| 综述1:趋化因子受体CXCR与肿瘤相互关系的研究进展 | 第103-139页 |
| 参考文献 | 第122-139页 |
| 综述2:结直肠癌及其微转移的现代医学诊断技术 | 第139-146页 |
| 参考文献 | 第145-146页 |
| 综述3:抗独特型抗体疫苗与肿瘤治疗 | 第146-153页 |
| 参考文献 | 第151-153页 |
| 致谢 | 第153-154页 |
| 攻读博士学位期间获奖和主要研究成果 | 第154页 |
