| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-10页 |
| 1 文献综述 | 第10-21页 |
| ·几丁质及几丁质酶简介 | 第10-16页 |
| ·几丁质的结构和生物学活性 | 第10-11页 |
| ·几丁质酶的分类 | 第11-12页 |
| ·几丁质酶的结构及催化机理 | 第12-14页 |
| ·动物几丁质酶的研究进展 | 第14页 |
| ·几丁质酶的生物学功能 | 第14-16页 |
| ·七鳃鳗简介 | 第16-17页 |
| ·七鳃鳗的进化地位 | 第16页 |
| ·七鳃鳗的生活史 | 第16-17页 |
| ·七鳃鳗的适应性免疫 | 第17页 |
| ·本研究的目的与意义 | 第17-19页 |
| ·本研究的技术路线 | 第19-21页 |
| ·日本七鳃鳗几丁质酶基因的克隆和原核表达 | 第19-20页 |
| ·几丁质酶抗菌功能研究 | 第20-21页 |
| 2 日本七鳃鳗几丁质酶基因的克隆与原核表达 | 第21-43页 |
| ·实验材料与仪器 | 第21-22页 |
| ·实验材料 | 第21页 |
| ·试剂配制 | 第21页 |
| ·实验仪器 | 第21-22页 |
| ·实验方法 | 第22-36页 |
| ·几丁质酶基因cDNA 全序列的克隆 | 第22-32页 |
| ·几丁质酶基因原核表达载体的构建 | 第32-33页 |
| ·几丁质酶基因的原核表达 | 第33-35页 |
| ·包涵体复性 | 第35-36页 |
| ·结果与分析 | 第36-41页 |
| ·日本七鳃鳗肝脏组织总RNA 的提取 | 第36页 |
| ·几丁质酶基因中间片段的克隆 | 第36-37页 |
| ·几丁质酶基因全长的扩增 | 第37-39页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第39-40页 |
| ·重组几丁质酶在E.coil 中的表达分析 | 第40-41页 |
| ·包涵体复性 | 第41页 |
| ·讨论 | 第41-43页 |
| 3 日本七鳃鳗几丁质酶基因生物信息学分析 | 第43-49页 |
| ·实验材料与仪器 | 第43页 |
| ·实验方法 | 第43-44页 |
| ·几丁质酶理化性质分析 | 第43页 |
| ·几丁质酶基因同源性及进化分析 | 第43-44页 |
| ·结果与分析 | 第44-48页 |
| ·几丁质酶理化性质分析 | 第44页 |
| ·信号肽分析 | 第44-45页 |
| ·氨基酸序列同源性比较分析 | 第45-47页 |
| ·日本七鳃鳗几丁质酶基因的进化分析 | 第47-48页 |
| ·讨论 | 第48-49页 |
| 4 日本七鳃鳗几丁质酶基因抗菌功能的初步鉴定 | 第49-58页 |
| ·实验材料与仪器 | 第49页 |
| ·实验材料 | 第49页 |
| ·试剂配制 | 第49页 |
| ·实验仪器 | 第49页 |
| ·实验方法 | 第49-53页 |
| ·实时定量PCR 法检测几丁质酶基因在各组织中的表达 | 第49-50页 |
| ·Northern blotting 检测几丁质酶基因的表达 | 第50-52页 |
| ·真菌和细菌刺激试验 | 第52-53页 |
| ·统计学分析 | 第53页 |
| ·结果与分析 | 第53-56页 |
| ·几丁质酶基因在不同组织及性别中的表达 | 第53-54页 |
| ·真菌和细菌刺激对几丁质酶基因表达量变化的影响 | 第54-56页 |
| ·讨论 | 第56-58页 |
| 结论 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
| 附录 | 第65-68页 |