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人参皂苷Rb1及Rg3上调神经内肽酶表达抑制β-淀粉样肽神经毒性作用的研究

中文摘要第1-18页
英文摘要第18-27页
符号说明第27-28页
前言第28-31页
第一部分 筛选能够提高神经内肽酶活性的药物第31-43页
 材料第31-32页
 方法第32-33页
  细胞的培养第32页
  MTT试验第32页
  神经内肽酶活性检测第32-33页
  统计学处理第33页
 结果第33-39页
  最佳药物浓度及作用时间的确定第33-35页
  各天然药物对神经内肽酶活性的影响第35页
  人参皂苷Rb1与Rg3对神经内肽酶活性的影响第35-39页
 讨论第39-42页
 第一部分总结第42-43页
第二部分 表达瑞典突变型APP695的SK-N-SH细胞的制备与鉴定以及人参皂苷Rb1与人参皂苷Rg3神经保护作用的研究第43-73页
 材料第43-45页
 方法第45-56页
  瑞典突变型APP695表达载体pcDNA3.1-sweAPP695的构建第45-48页
  细胞的培养第48-49页
  细胞转染实验第49页
  Western Blot检测第49-51页
  酸联免疫吸附试验检测Aβ_(42)和Aβ_(40)分泌情况第51-54页
  流式细胞术检测细胞内氧自由基水平第54页
  流式细胞术检测细胞内钙离子水平第54-55页
  流式细胞术检测细胞凋亡第55-56页
  统计学处理第56页
 结果第56-65页
  pcDNA3.1-sweAPP695重组质粒的鉴定第56-58页
  Western Blot检测转染后sweAPP695蛋白的表达第58-59页
  ELISA检测转染后细胞外Aβ_(42)和Aβ_(40)浓度第59-60页
  sweAPP-SK细胞增殖能力变化第60页
  sweAPP-SK细胞凋亡检测及人参皂苷Rb1与Rg3对细胞凋亡的影响第60-61页
  sweAPP-SK细胞内活性氧水平检测及人参皂苷Rb1与Rg3对细胞内活性氧水平的影响第61-63页
  sweAPP-SK细胞内钙离子水平检测及人参皂苷Rb1与Rg3对细胞内钙离子水平的影响第63-64页
  人参皂苷Rb1及人参皂苷Rg3对凋亡相关蛋白的影响第64-65页
 讨论第65-72页
 第二部分总结第72-73页
第三部分 人参皂苷Rb1及人参皂苷Rg3升高神经内肽酶活性机制的研究第73-99页
 材料第73-75页
 方法第75-90页
  细胞的培齐第75页
  Western Blot检测第75-78页
  实时定量PCR及逆转录PCR检测第78-80页
  人nep基因转录起始点上游2.9Kb调控序列的扩增第80-82页
   ·Kb启动子片段的T-载体亚克隆第82-84页
  荧光素酶报道基因载体pGL3-nep2.9Kb质粒的构建第84-86页
  荧光素酶报道基因载体pGL3-nep2.4Kb质粒的构建第86-88页
  细胞转染实验第88-89页
  双荧光素酶活性测定第89-90页
 结果第90-95页
  蛋白水平检测人参皂苷Rb1和人参皂苷Rg3对nep基因表达的影响第90-91页
  RNA水平检测人参皂苷Rb1和人参皂苷Rg3对nep基因表达的影响第91页
  荧光素酶报道基因载体-nep启动子( pGL3-nep2.9Kb)启动子质粒的鉴定第91-94页
  荧光素酶报道基因载体-nep启动子(pGL3-nep2.4Kb)启动子质粒的鉴定第94页
  人参皂Rb1与Rg3对pGL3-nep2.4Kb启动子活性影响第94-95页
 讨论第95-97页
 第三部分总结第97-99页
附图第99-109页
参考文献第109-117页
致谢第117-118页
攻读博士学位期间发表的学术论文目录第118-119页
学位论文评阅及答辩情况表第119-120页
已发表英文文章第120-130页

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