| 中文摘要 | 第1-11页 |
| Abstract | 第11-15页 |
| 前言 | 第15-17页 |
| 第一章 阳离子白蛋白结合聚乙二醇.聚乳酸.羟基乙酸共聚物纳米粒的构建与表征 | 第17-31页 |
| 1 仪器和材料 | 第17-19页 |
| ·仪器 | 第17-18页 |
| ·材料和试剂 | 第18-19页 |
| ·溶液的配制 | 第19页 |
| 2 实验方法 | 第19-25页 |
| ·PLGA纳米粒的制备 | 第19-20页 |
| ·NP的处方工艺优化 | 第20页 |
| ·阳离子化白蛋白(CBSA)的制备 | 第20-21页 |
| ·CBSA处方工艺的优化和鉴定 | 第21-22页 |
| ·CBSA的巯基化及巯基化程度鉴定 | 第22-23页 |
| ·CBSA-NP的制备 | 第23-24页 |
| ·NP和CBSA-NP的表征 | 第24-25页 |
| 3 实验结果 | 第25-28页 |
| ·CBSA的优化制备和表征 | 第25-26页 |
| ·纳米粒处方工艺的优化 | 第26-27页 |
| ·NP和CBSA-NP的表征 | 第27-28页 |
| 4 讨论 | 第28-29页 |
| ·CBSA的处方优化 | 第28-29页 |
| ·PLGA材料的选择 | 第29页 |
| ·纳米粒处方优化中PVA浓度和纳米粒粒径的关系 | 第29页 |
| 5 小结 | 第29-31页 |
| 第二章 CBSA-NP脑内递药特性的体内外研究 | 第31-55页 |
| 第一节 CBSA-NP脑内递药特性的体外评价 | 第31-44页 |
| 1 仪器和材料 | 第31-32页 |
| ·仪器 | 第31-32页 |
| ·材料和试剂 | 第32页 |
| ·实验动物 | 第32页 |
| 2 实验方法 | 第32-36页 |
| ·载香豆素-6的NP、CBSA-NP的制备与表征 | 第32-33页 |
| ·香豆素-6体外HPLC分析方法建立 | 第33-34页 |
| ·载药量测定 | 第34页 |
| ·载香豆素-6NP、CBSA-NP的体外泄露实验 | 第34页 |
| ·大鼠BCEC细胞培养和摄取载香豆素—6的NP和CBSA-NP的定性观察 | 第34-35页 |
| ·载香豆素—6NP和CBSA-NP的BCEC摄取定量分析 | 第35-36页 |
| ·CBSA-NP对大鼠BCEC的细胞毒性 | 第36页 |
| 3 实验结果 | 第36-43页 |
| ·载香豆素-6的NP、CBSA-NP粒径分布及Zeta电位 | 第36-37页 |
| ·香豆素-6体外HPLC分析方法建立 | 第37页 |
| ·纳米粒中香豆素-6的测定 | 第37-38页 |
| ·载药量测定和载香豆素—6的NP、CBSA-NP的体外泄露实验 | 第38-39页 |
| ·大鼠BCEC细胞培养和摄取载香豆素—6的NP和CBSA-NP的定性观察 | 第39-41页 |
| ·载香豆素—6NP和CBSA-NP细胞摄取定量分析 | 第41-42页 |
| ·NP和CBSA-NP对大鼠BCEC的细胞毒性 | 第42-43页 |
| 4 讨论 | 第43-44页 |
| ·吸附介导和受体介导的细胞转运机制比较 | 第43-44页 |
| 5 小结 | 第44页 |
| 第二节 CBSA-NP脑内递药的体内评价 | 第44-55页 |
| 1 仪器和试剂 | 第44-45页 |
| ·仪器 | 第44页 |
| ·材料和试剂 | 第44-45页 |
| ·实验动物 | 第45页 |
| 2 实验方法 | 第45-47页 |
| ·香豆素—6体内HPLC分析方法的建立 | 第45-46页 |
| ·纳米粒在小鼠血中的药动学和组织分布 | 第46页 |
| ·数据处理 | 第46页 |
| ·脑靶向特性评价 | 第46-47页 |
| ·载香豆素—6NP和CBSA-NP的脑组织分布观察 | 第47页 |
| 3 实验结果 | 第47-52页 |
| ·香豆素-6体内HPLC分析方法的建立 | 第47-49页 |
| ·CBSA-NP和NP的体内组织分布评价和药动学研究 | 第49-51页 |
| ·脑靶向特性评价 | 第51页 |
| ·载香豆素-6NP和CBSA-NP的脑组织分布观察 | 第51-52页 |
| 4 讨论 | 第52-54页 |
| ·关于细胞实验数据的体内外相关性问题 | 第52-53页 |
| ·关于CBSA-NP在脾脏和肝脏中蓄积量减少的分析 | 第53-54页 |
| 5 小结 | 第54-55页 |
| 第三章 阳离子白蛋白修饰载siRNA纳米粒基因治疗系统的构建及其体内外研究 | 第55-95页 |
| 第一节 促c-Myc基因凋亡的siRNA质粒的筛选和体外鉴定 | 第56-68页 |
| 1 仪器和材料 | 第56-57页 |
| ·仪器 | 第56页 |
| ·材料和试剂 | 第56-57页 |
| 2 实验方法 | 第57-60页 |
| ·siRNA的设计和载体构建 | 第57-58页 |
| ·质粒的浓度测定 | 第58页 |
| ·纯度鉴定和酶切鉴定 | 第58-59页 |
| ·细胞培养 | 第59页 |
| ·三种干扰质粒体外转染效率和促凋亡能力的检测及筛选 | 第59-60页 |
| 3 实验结果 | 第60-65页 |
| ·三种干扰质粒的筛选 | 第60页 |
| ·质粒的纯度鉴定和酶切电泳鉴定 | 第60-61页 |
| ·三种干扰质粒体外转染效率和促凋亡能力的检测及筛选 | 第61-65页 |
| 4 讨论 | 第65-67页 |
| ·关于RNA干扰技术的发展 | 第65-66页 |
| ·关于所选择的针对c-Myc的靶向序列 | 第66页 |
| ·关于直接使用siRNA片段和使用pDNA的形式的区别 | 第66-67页 |
| ·关于细胞凋亡和坏死 | 第67页 |
| 5 小结 | 第67-68页 |
| 第二节 阳离子白蛋白修饰载siRNA纳米粒基因治疗系统的构建及其体外评价 | 第68-82页 |
| 1 仪器和材料 | 第68-69页 |
| ·仪器 | 第68页 |
| ·材料和试剂 | 第68-69页 |
| 2 实验方法 | 第69-73页 |
| ·NP中DNA的体外测定方法 | 第69页 |
| ·载siRNA质粒的NP(NP-siRNA)的制备与表征 | 第69-70页 |
| ·CBSA-NP-siRNA的制备与表征 | 第70页 |
| ·制备工艺和其他外界因素对siRNA-pDNA稳定性的影响 | 第70-71页 |
| ·CBSA-NP-siRNA体外转染G6脑胶质瘤细胞 | 第71-72页 |
| ·CBSA-NP介导c-Myc-siRNA-pDNA基因传递的细胞内示踪 | 第72-73页 |
| 3 实验结果 | 第73-81页 |
| ·NP中DNA体外测定方法建立与评价 | 第73页 |
| ·载siRNA-pDNA的NP和CBSA-NP的表征 | 第73-74页 |
| ·制备工艺和其他外界因素对siRNA-pDNA稳定性的影响 | 第74-76页 |
| ·CBSA-NP-siRNA体外转染C6脑胶质瘤细胞 | 第76-79页 |
| ·CBSA-NP介导c-Myc-siRNA-pDNA基因传递的细胞内定位研究 | 第79-81页 |
| 4 讨论 | 第81-82页 |
| ·关于制备工艺和外部环境对包载基因药物稳定性的影响 | 第81页 |
| ·关于siRNA-pDNA体内外释放的区别 | 第81-82页 |
| 5 小结 | 第82页 |
| 第三节 CBSA-NP-siRNA基因递药系统治疗CA脑胶质瘤模型的体内药效学研究 | 第82-95页 |
| 1 仪器和材料 | 第82-83页 |
| ·仪器 | 第82页 |
| ·材料和试剂 | 第82-83页 |
| ·实验动物 | 第83页 |
| 2 实验方法 | 第83-85页 |
| ·溶液的配制 | 第83页 |
| ·CBSA-NP-siRNA和NP-siRNA载药量的测定 | 第83页 |
| ·C6脑胶质瘤模型建立方法的研究 | 第83页 |
| ·模型的验证 | 第83-84页 |
| ·实验分组与治疗方案 | 第84-85页 |
| ·药效学实验统计分析与效果评价 | 第85页 |
| 3 实验结果 | 第85-92页 |
| ·CBSA-NP-siRNA和NP-siRNA载药量的测定 | 第85-86页 |
| ·G6脑胶质瘤模型建立方法的研究 | 第86页 |
| ·模型的验证 | 第86-87页 |
| ·药效学实验统计分析与效果评价 | 第87-92页 |
| 4 讨论 | 第92-94页 |
| ·G6胶质瘤模型建立的相关问题和手术注意事项 | 第92页 |
| ·G6脑胶质瘤模型及其缺陷问题 | 第92-93页 |
| ·CBSA-NP-siRNA基因递药系统治疗G6脑胶质瘤模型的药效学研究 | 第93-94页 |
| ·CBSA-NP-siRNA基因递药系统仍需解决的问题 | 第94页 |
| 5 小结 | 第94-95页 |
| 总结 | 第95-97页 |
| 参考文献 | 第97-103页 |
| 综述 | 第103-111页 |
| 致谢 | 第111-114页 |
| 在校期间发表论文 | 第114页 |
| 参加科研项目 | 第114-115页 |
