| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-41页 |
| ·γ-亚麻酸研究进展 | 第11-14页 |
| ·γ-亚麻酸的生物代谢与生理功能 | 第11-13页 |
| ·γ-亚麻酸的生物来源与资源开发 | 第13-14页 |
| ·△6-脂肪酸脱氢酶研究进展 | 第14-22页 |
| ·脂肪酸脱氢酶的分类 | 第14-15页 |
| ·△6-脂肪酸脱氢酶基因的克隆与表达 | 第15-18页 |
| ·△6-脂肪酸脱氢酶的结构与功能 | 第18-19页 |
| ·△6-脂肪酸脱氢酶的系统进化 | 第19-22页 |
| ·RACE技术研究进展 | 第22-29页 |
| ·RACE技术的原理与方法 | 第23-24页 |
| ·RACE技术的优点与缺陷 | 第24页 |
| ·RACE技术的改进与优化 | 第24-25页 |
| ·新型RACE技术 | 第25-29页 |
| ·RACE技术的现状与前景 | 第29页 |
| ·油菜基因工程研究进展 | 第29-39页 |
| ·油菜转化方法研究进展 | 第30-33页 |
| ·油菜转化外源基因的研究进展 | 第33-38页 |
| ·转基因油菜的安全性分析 | 第38页 |
| ·问题与展望 | 第38-39页 |
| ·本研究的目的意义 | 第39-41页 |
| 第二章 ObD6D基因cDNA的克隆 | 第41-60页 |
| ·实验材料 | 第41-42页 |
| ·植物材料 | 第41页 |
| ·菌种质粒 | 第41页 |
| ·主要试剂 | 第41页 |
| ·主要溶液的配制 | 第41-42页 |
| ·实验方法 | 第42-50页 |
| ·序列比对与引物设计 | 第42-43页 |
| ·月见草总RNA的提取 | 第43-44页 |
| ·ObD6D基因cDNA部分序列的克隆 | 第44-47页 |
| ·ObD6D基因cDNA 3'序列的获得 | 第47页 |
| ·ObD6D基因cDNA 5'序列的获得 | 第47-50页 |
| ·ObD6D基因cDNA全长的拼接 | 第50页 |
| ·结果与分析 | 第50-58页 |
| ·月见草总RNA的提取 | 第50-51页 |
| ·ObD6D基因cDNA部分序列的克隆 | 第51-52页 |
| ·ObD6D基因cDNA 3'序列的获得 | 第52-54页 |
| ·ObD6D基因cDNA 5'序列的获得 | 第54-55页 |
| ·ObD6D基因cDNA全长的拼接与分析 | 第55-58页 |
| ·讨论 | 第58-60页 |
| ·月见草总RNA的提取 | 第58页 |
| ·ObD6D基因的表达 | 第58-59页 |
| ·RACE技术的应用 | 第59-60页 |
| 第三章 ObD6D基因的功能验证与分析 | 第60-72页 |
| ·实验材料 | 第60-61页 |
| ·菌种质粒 | 第60页 |
| ·主要试剂 | 第60页 |
| ·主要溶液的配制 | 第60-61页 |
| ·实验方法 | 第61-66页 |
| ·引物设计 | 第61页 |
| ·质粒提取 | 第61页 |
| ·ObD6D基因ORF框的PCR扩增 | 第61-62页 |
| ·酵母表达载体pYES2-D6D的构建 | 第62-64页 |
| ·酵母感受态细胞的制备、转化及鉴定 | 第64页 |
| ·酵母工程菌的诱导表达 | 第64页 |
| ·酵母工程菌的脂肪酸甲酯化方法 | 第64-65页 |
| ·脂肪酸甲酯的气相色谱分析 | 第65页 |
| ·基因组ObD6D基因的分析 | 第65-66页 |
| ·结果与分析 | 第66-70页 |
| ·ObD6D基因ORF框的PCR扩增 | 第66页 |
| ·酵母表达载体pYES2-D6D的构建 | 第66-67页 |
| ·pYES2-D6D转化酿酒酵母 | 第67页 |
| ·酵母脂肪酸甲酯的气相色谱分析 | 第67-68页 |
| ·基因组ObD6D基因的分析 | 第68-70页 |
| ·讨论 | 第70-72页 |
| ·月见草叶片DNA的提取 | 第70页 |
| ·ObD6D的系统进化 | 第70页 |
| ·ObD6D的9个串联终止密码子 | 第70-71页 |
| ·酿酒酵母表达体系 | 第71页 |
| ·ObD6D的功能验证 | 第71-72页 |
| 第四章 ObD6D基因转化油菜的研究 | 第72-82页 |
| ·实验材料 | 第72-73页 |
| ·植物材料 | 第72页 |
| ·菌种质粒 | 第72页 |
| ·主要试剂 | 第72页 |
| ·主要溶液的配制 | 第72-73页 |
| ·实验方法 | 第73-76页 |
| ·引物设计 | 第73页 |
| ·油菜总DNA提取 | 第73页 |
| ·启动子NAPIN的PCR扩增 | 第73-74页 |
| ·表达载体pPZP221(35S-D6D-NOS)和pPZP221(NAPIN-D6D-NOS)的构建 | 第74-76页 |
| ·目的基因花粉管通道法导入油菜 | 第76页 |
| ·结果与分析 | 第76-80页 |
| ·油菜总DNA的提取 | 第76页 |
| ·启动子NAPIN的PCR扩增 | 第76-77页 |
| ·植物表达载体pPZP221-SDN和pPZP221-NDN的构建 | 第77-79页 |
| ·转ObD6D基因油菜T_0代植株的筛选和检测 | 第79-80页 |
| ·讨论 | 第80-82页 |
| ·酶切位点甲基化影响 | 第80-81页 |
| ·ObD6D基因导入油菜及转基因油菜的检测 | 第81页 |
| ·下一步研究计划 | 第81-82页 |
| 结论 | 第82-83页 |
| 参考文献 | 第83-96页 |
| 致谢 | 第96-97页 |
| 个人简历 | 第97页 |