| 中文摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 前言 | 第11-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-29页 |
| 1 低温诱导蛋白研究进展 | 第13-16页 |
| ·低温诱导蛋白起源 | 第13页 |
| ·低温诱导蛋白分类 | 第13-16页 |
| 2 绿色荧光蛋白研究进展 | 第16-20页 |
| ·绿色荧光蛋白的结构特征 | 第16-17页 |
| ·绿色荧光蛋白的应用优势 | 第17-18页 |
| ·绿色荧光蛋白的研究进展 | 第18-20页 |
| 3 RNA 干扰技术与应用 | 第20-22页 |
| ·RNA 干扰的作用机制 | 第20-21页 |
| ·RNA 干扰的应用 | 第21-22页 |
| 4 基因枪介导技术与应用 | 第22-23页 |
| ·基因枪的类型和特性 | 第22页 |
| ·基因枪的影响因素 | 第22-23页 |
| ·基因枪技术的应用 | 第23页 |
| 5 本课题研究背景 | 第23-26页 |
| 6 本课题研究意义 | 第26-27页 |
| 7 本课题研究技术路线 | 第27-29页 |
| 第二章 材料与方法 | 第29-38页 |
| 1 材料与试剂 | 第29-32页 |
| ·实验材料 | 第29页 |
| ·酶和试剂 | 第29页 |
| ·培养基 | 第29页 |
| ·碱性质粒抽提试剂 | 第29-30页 |
| ·核酸电泳相关试剂 | 第30页 |
| ·SDS-PAGE 蛋白质电泳试剂的配制 | 第30-31页 |
| ·常用缓冲液和试剂 | 第31-32页 |
| 2 主要实验方法 | 第32-37页 |
| ·目的片段的扩增 | 第32页 |
| ·连接反应 | 第32-33页 |
| ·大肠杆菌E.coli TG1 感受态细胞制备 | 第33页 |
| ·连接产物的转化 | 第33页 |
| ·重组质粒的筛选 | 第33-34页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第34-35页 |
| ·酶切目的片段回收 | 第35-36页 |
| ·SDS-PAGE 蛋白质电泳 | 第36页 |
| ·SDS-PAGE 凝胶的染色和脱色 | 第36页 |
| ·基因枪轰击洋葱表皮细胞 | 第36-37页 |
| 3 实验常用仪器设备 | 第37-38页 |
| 第三章 Wap25 基因生物信息学分析 | 第38-45页 |
| 1 材料与方法 | 第38页 |
| 2 分析与结果 | 第38-41页 |
| ·桑WAP25 基因编码蛋白的理化性质 | 第38-39页 |
| ·桑WAP25 基因编码蛋白的信号肽预测 | 第39-40页 |
| ·桑WAP25 基因编码蛋白的跨膜结构域和亚细胞定位分析 | 第40-41页 |
| 3 讨论 | 第41-45页 |
| ·序列信息 | 第41-42页 |
| ·稀有密码子与表达量 | 第42-43页 |
| ·WAP25 的信号肽 | 第43页 |
| ·WAP25 的亲水性 | 第43-44页 |
| ·WAP25 的定位 | 第44-45页 |
| 第四章 Wap25 原核表达载体的构建及融合表达 | 第45-51页 |
| 1 材料与方法 | 第45-46页 |
| ·原核表达载体构建 | 第45-46页 |
| ·WAP25 基因蛋白的诱导表达 | 第46页 |
| 2 结果 | 第46-49页 |
| ·WAP25 基因蛋白原核表达载体的鉴定 | 第46-47页 |
| ·不同诱导温度及不同诱导时间对目的蛋白表达量的影响 | 第47-48页 |
| ·不同载体表达的影响 | 第48-49页 |
| 3 讨论 | 第49-50页 |
| 4 本章小结 | 第50-51页 |
| 第五章 WAP25 亚细胞定位 | 第51-57页 |
| 1 材料与方法 | 第52页 |
| ·融合蛋白基因pA7- GFP- Wap25 构建 | 第52页 |
| ·Wap25 产物的细胞定位 | 第52页 |
| 2 结果 | 第52-56页 |
| ·融合蛋白基因pA7- GFP- Wap25 构建 | 第52-54页 |
| ·WAP25 产物的细胞定位 | 第54-56页 |
| 3 讨论 | 第56页 |
| 4 本章小结 | 第56-57页 |
| 第六章 用于RNA 干扰的表达载体构建 | 第57-61页 |
| 1 材料与方法 | 第57-59页 |
| ·材料 | 第57页 |
| ·方法 | 第57页 |
| ·Wap25 基因干扰表达载体的构建 | 第57-59页 |
| 2 结果 | 第59页 |
| 3 讨论 | 第59-60页 |
| ·酶切位点的选择 | 第59-60页 |
| ·构建方式的选择 | 第60页 |
| 4 本章小结 | 第60-61页 |
| 总结 | 第61-63页 |
| 参考文献 | 第63-68页 |
| 附录 | 第68-69页 |
| 研究生在校期间发表的学术论文与研究成果 | 第69-70页 |
| 致谢 | 第70-71页 |
