| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 第一章 文献综述 | 第8-14页 |
| ·幽门螺杆菌与胃部疾病 | 第8-10页 |
| ·幽门螺杆菌的相关致病因子 | 第10-11页 |
| ·幽门螺杆菌与细胞因子 | 第11-12页 |
| ·对幽门螺杆菌的治疗 | 第12页 |
| ·HP0596 | 第12-13页 |
| ·课题的意义 | 第13-14页 |
| 第二章 引言 | 第14-15页 |
| 第三章 蛋白定位的研究 | 第15-25页 |
| 1. 实验材料 | 第15-16页 |
| ·菌株和主要试剂 | 第15页 |
| ·溶液和培养基 | 第15-16页 |
| 2. 实验方法 | 第16-19页 |
| ·H.pylori 26695的培养 | 第16页 |
| ·H.pylori 26695基因组的提取 | 第16页 |
| ·设计引物序列 | 第16-17页 |
| ·目的基因的扩增 | 第17页 |
| ·酶切、连接与转化 | 第17-18页 |
| ·诱导表达目的蛋白 | 第18页 |
| ·表达产物的各部分提取 | 第18页 |
| ·Western Blot实验 | 第18-19页 |
| ·荧光共聚焦显微镜观察 | 第19页 |
| 3. 实验结果 | 第19-23页 |
| ·重组质粒的构建 | 第19-21页 |
| ·目的蛋白的表达 | 第21-22页 |
| ·Western Blot实验 | 第22页 |
| ·荧光共聚焦显微镜观察 | 第22-23页 |
| 4. 讨论 | 第23-25页 |
| 第四章 目标蛋白的表达纯化和抗体的制备 | 第25-37页 |
| 1. 实验材料 | 第25-26页 |
| ·菌株和质粒 | 第25页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第25页 |
| ·主要溶液 | 第25-26页 |
| 2. 实验方法 | 第26-30页 |
| ·H.pylori26695的培养 | 第26页 |
| ·H.pylori基因组的制备 | 第26页 |
| ·设计引物序列 | 第26-27页 |
| ·E.coli化学感受态细胞的制备 | 第27页 |
| ·目的基因的扩增 | 第27-28页 |
| ·酶切、连接与转化 | 第28页 |
| ·诱导表达目的蛋白 | 第28页 |
| ·目的蛋白的纯化及定量 | 第28-29页 |
| ·制备目的蛋白的多抗血清 | 第29-30页 |
| 3. 实验结果 | 第30-35页 |
| ·重组质粒的构建 | 第30-32页 |
| ·重组蛋白表达 | 第32页 |
| ·蛋白纯化和定量 | 第32-35页 |
| ·免疫动物和多抗血清的制备 | 第35页 |
| 4. 讨论 | 第35-37页 |
| 第五章 细胞因子的检测 | 第37-42页 |
| 1. 材料与方法 | 第37-38页 |
| ·主要试剂材料和仪器 | 第37页 |
| ·细胞培养 | 第37-38页 |
| 2. 实验方法 | 第38页 |
| ·检测培养上清制备 | 第38页 |
| ·细胞因子的检测 | 第38页 |
| 3. 实验结果 | 第38-40页 |
| ·肿瘤坏死因子α(TNF-α)的检测 | 第38-39页 |
| ·白细胞介素-6(IL-6)的检测 | 第39-40页 |
| ·干扰素-γ(IFN-γ)和白细胞介素-1β(IL-1p)的检测 | 第40页 |
| 4. 讨论 | 第40-42页 |
| 第六章 结论与讨论 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-46页 |
| 发表的文章 | 第46-47页 |
| 致谢 | 第47页 |