| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-10页 |
| 1 文献综述 | 第10-22页 |
| ·课题提出的背景 | 第10-11页 |
| ·前人的研究进展 | 第11-20页 |
| ·烟草及其在植物研究领域中的应用概况 | 第11页 |
| ·热激蛋白 | 第11-13页 |
| ·热激蛋白的分类 | 第11-12页 |
| ·热激蛋白的功能 | 第12页 |
| ·热激蛋白基因的结构特征 | 第12-13页 |
| ·植物小分子热激蛋白(small heat shock proteins,sHSPs) | 第13-18页 |
| ·植物小分子热激蛋白(sHSPs)的种类及其结构 | 第13-14页 |
| ·植物sHSPs的分子伴侣功能 | 第14-15页 |
| ·植物sHSPs的生成诱因 | 第15-16页 |
| ·植物小分子热激蛋白基因 | 第16页 |
| ·植物sHSPs基因的表达调控 | 第16-17页 |
| ·胁迫作用与小分子热激蛋白(sHSPs) | 第17-18页 |
| ·全基因克隆技术 | 第18-20页 |
| ·cDNA末端快速扩增技术(rapid amplification of cDNA ends,RACE)研究进展 | 第18-20页 |
| ·RACE技术的应用 | 第20页 |
| ·研究的目的与意义 | 第20-22页 |
| 2 材料与方法 | 第22-39页 |
| ·材料 | 第22-23页 |
| ·供试烟草 | 第22页 |
| ·菌种和质粒 | 第22页 |
| ·主要生化试剂与酶类 | 第22页 |
| ·试剂及溶液 | 第22-23页 |
| ·主要仪器 | 第23页 |
| ·供试软件 | 第23页 |
| ·实验方法 | 第23-39页 |
| ·烟草植株的获得 | 第23页 |
| ·烟草植株的处理 | 第23-24页 |
| ·用于克隆基因的烟草苗的热激处理 | 第23-24页 |
| ·用于分析烟草苗基因表达的逆境处理 | 第24页 |
| ·烟草NtHSP17.8基因片段的克隆 | 第24-30页 |
| ·扩增烟草NtHSP17.8基因片段的引物 | 第24页 |
| ·烟草RNA的提取 | 第24-25页 |
| ·第一链cDNA的合成 | 第25-26页 |
| ·烟草NtHSP17.8基因的cDNA片段PCR扩增 | 第26页 |
| ·琼脂糖凝胶上DNA片段的回收 | 第26-27页 |
| ·大肠杆菌感受态的制备 | 第27-28页 |
| ·克隆片段的连接、转化及测序 | 第28-29页 |
| ·质粒DNA的小量制备 | 第29-30页 |
| ·RACE方法克隆烟草NtHSP17.8基因 | 第30-33页 |
| ·5'-RACE获得目的基因的5'-端 | 第30-31页 |
| ·3'-RACE获得目的基因的3'端 | 第31-33页 |
| ·烟草NtHSP17.8基因序列生物信息学分析 | 第33页 |
| ·Northern杂交分析 | 第33-39页 |
| ·器皿和容器的处理 | 第33页 |
| ·RNA的提取 | 第33-34页 |
| ·探针制备 | 第34页 |
| ·标记结果的检测 | 第34-35页 |
| ·Northern-Blot | 第35-39页 |
| 3 结果与分析 | 第39-54页 |
| ·烟草NtHSP17.8基因的克隆 | 第39-45页 |
| ·烟草NtHSP17.8的RNA提取结果 | 第39页 |
| ·烟草NtHSP17.8基因片段的扩增结果 | 第39-40页 |
| ·烟草NtHSP17.8基因的cDNA片段测序及比对结果 | 第40-41页 |
| ·5'-RACE扩增结果 | 第41-43页 |
| ·3'-RACE扩增结果 | 第43-45页 |
| ·生物信息学分析 | 第45-48页 |
| ·烟草NtHSP17.8基因全长cDNA的序列分析 | 第45-46页 |
| ·烟草NtHSP17.8二级结构预测 | 第46-48页 |
| ·烟草NtHSP17.8的三维结构 | 第48页 |
| ·植物小分子热激蛋白基因氨基酸序列比较与分析 | 第48-51页 |
| ·NtHSP17.8基因在不同胁迫条件下的表达差异 | 第51-52页 |
| ·热胁迫下NtHSP17.8在烟草叶中的表达 | 第51页 |
| ·干旱胁迫下NtHSP17.8在烟草叶中的表达 | 第51-52页 |
| ·交叉胁迫下NtHSP17.8在烟草叶中的表达 | 第52页 |
| ·植物sHSPs在各种胁迫环境下的表达归纳 | 第52-54页 |
| 4 讨论 | 第54-57页 |
| ·RNA提取与RACE的成败 | 第54-55页 |
| ·NtHSP17.8基因序列特征 | 第55页 |
| ·NtHSP17.8基因与胁迫抗性 | 第55-56页 |
| ·需继续开展的研究 | 第56-57页 |
| 5 结论 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-63页 |
| 附录 | 第63-66页 |
| 附录1 主要仪器设备 | 第63-64页 |
| 附录2 常用术语缩写与中英文对照 | 第64-66页 |
| 攻读硕士期间的主要研究成果简介 | 第66-67页 |
| 致谢 | 第67页 |
