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巴西橡胶树REF、RT和SRPP基因物理定位的研究

摘要第1-5页
Abstract第5-6页
目录第6-8页
1 前言第8-24页
   ·橡胶树种质资源概述第8-9页
   ·巴西橡胶树REF、RT、SRPP基因的国内外研究现状第9-11页
     ·橡胶延长因子(Rubber Elongation Factor,REF)第9-10页
     ·橡胶转移酶(Rubber Transferase,RT)第10-11页
     ·小橡胶粒子蛋白(small rubber particle protein,SRPP)第11页
   ·橡胶核型研究进展第11页
   ·植物原位PCR的研究进展第11-16页
     ·原位PCR的基本原理第12-13页
     ·植物原位PCR技术的主要操作步骤第13-15页
     ·植物原位PCR应用进展第15-16页
   ·植物荧光原位杂交技术的研究进展第16-23页
     ·荧光原位杂交技术的主要操作步骤第16-20页
     ·多色荧光原位杂交技术第20页
     ·植物原位杂交的应用进展第20-23页
   ·橡胶树基因定位研究进展第23页
   ·本研究的目的意义和技术路线第23-24页
     ·本研究的目的意义第23-24页
     ·技术路线第24页
2 材料和方法第24-33页
   ·试验材料与试剂第24-25页
     ·供试材料第24-25页
     ·主要的仪器第25页
     ·试剂第25页
   ·试验方法第25-33页
     ·染色体标本的制备第25-26页
     ·橡胶树DNA提取第26-27页
     ·特异引物合成与筛选第27-29页
     ·原位PCR技术流程第29-31页
     ·荧光原位杂交技术流程第31-33页
     ·信号位置的确定第33页
3 结果与分析第33-47页
   ·橡胶树染色体制片技术体系的优化第33-34页
   ·基因特异DNA序列的扩增与分析第34-37页
     ·橡胶树基因组DNA的提取第34-35页
     ·基因特异DNA序列的PCR扩增与测序结果第35-37页
   ·原位PCR体系的优化第37-39页
     ·甲酰胺的处理第38页
     ·后处理的优化第38-39页
   ·橡胶树荧光原位杂交技术体系的建立第39-42页
     ·探针的制备及标记效果的检测第39页
     ·标本预处理的优化第39-41页
     ·橡胶树基因特异DNA序列的荧光原位杂交体系的建立第41-42页
   ·橡胶树REF、RT和SRPP基因的染色体定位分析第42-47页
     ·橡胶树REF基因的原位PCR和FISH分析第42-44页
     ·橡胶树RT和SRPP基因的FISH定位分析第44-47页
4 讨论第47-51页
   ·关于染色体标本制备的问题第47页
   ·关于原位PCR技术的改进第47-48页
   ·关于FISH技术的信号问题第48-49页
   ·关于原位PCR与FISH检测的灵敏度第49-51页
5 结论第51-52页
参考文献第52-60页
附录第60-63页
缩略语第63-64页
致谢第64页

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