| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 第1章 前言 | 第14-41页 |
| 1.1 超氧化物歧化酶与肌萎缩侧索硬化症 | 第14-22页 |
| 1.1.1 铜锌超氧化物歧化酶 | 第14-17页 |
| 1.1.2 肌萎缩侧索硬化症 | 第17页 |
| 1.1.3 SOD1与肌萎缩侧索硬化症 | 第17-19页 |
| 1.1.4 异常SOD1可能的致病机制 | 第19-22页 |
| 1.2 基于质谱方法的结构生物学研究 | 第22-31页 |
| 1.2.1 电喷雾质谱原理 | 第23-25页 |
| 1.2.2 天然电喷雾质谱 | 第25-29页 |
| 1.2.3 常见的研究结构生物学的质谱方法 | 第29-31页 |
| 1.3 基于离子淌度质谱方法的结构生物学研究 | 第31-35页 |
| 1.3.1 离子淌度的基本要素 | 第31-33页 |
| 1.3.2 IMS技术分类 | 第33-35页 |
| 1.4 天然电喷雾离子淌度质谱的应用 | 第35-40页 |
| 1.5 本论文研究的内容和目的 | 第40-41页 |
| 第2章 超氧化物歧化酶及其不成熟形式的稳定性比较 | 第41-56页 |
| 2.1 引言 | 第41-42页 |
| 2.2 实验部分 | 第42-46页 |
| 2.2.1 实验材料 | 第42页 |
| 2.2.2 样品制备 | 第42-43页 |
| 2.2.3 质谱实验 | 第43-44页 |
| 2.2.4 行波离子淌度采集 | 第44-45页 |
| 2.2.5 数据处理 | 第45-46页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第46-55页 |
| 2.3.1 SOD1及apo-SOD1的质谱表征 | 第46-47页 |
| 2.3.2 SOD1及apo-SOD1碰撞截面积的计算 | 第47-49页 |
| 2.3.3 CID比较SOD1和apo-SOD1的结构稳定性 | 第49-51页 |
| 2.3.4 CIU比较SOD1和apo-SOD1的构型变化 | 第51-53页 |
| 2.3.5 DTT诱导SOD1和apo-SOD1的结构变化 | 第53-55页 |
| 2.4 本章小结 | 第55-56页 |
| 第3章 非质子极性溶剂对超氧化物歧化酶结构稳定性的研究 | 第56-73页 |
| 3.1 引言 | 第56-58页 |
| 3.2 实验部分 | 第58-59页 |
| 3.2.1 实验材料 | 第58页 |
| 3.2.2 样品准备 | 第58页 |
| 3.2.3 质谱实验 | 第58-59页 |
| 3.2.4 数据处理 | 第59页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第59-71页 |
| 3.3.1 五种非质子极性溶剂对蛋白带电荷和解离的影响 | 第59-64页 |
| 3.3.2 DMF有助于减少apo-SOD1在源内的碰撞诱导解离 | 第64-65页 |
| 3.3.3 DMF能够减少酸诱导的蛋白解离和去折叠 | 第65-67页 |
| 3.3.4 CIU评估DMF对蛋白构型的影响 | 第67-71页 |
| 3.3.5 CCS评估DMF对蛋白结构的影响 | 第71页 |
| 3.4 本章小结 | 第71-73页 |
| 第4章 5-氟尿苷与超氧化物歧化酶的相互作用 | 第73-83页 |
| 4.1 引言 | 第73页 |
| 4.2 实验部分 | 第73-75页 |
| 4.2.1 实验材料 | 第73-74页 |
| 4.2.2 样品制备 | 第74页 |
| 4.2.3 质谱实验 | 第74-75页 |
| 4.2.4 ThT荧光光谱实验 | 第75页 |
| 4.2.5 内源性荧光光谱实验 | 第75页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第75-82页 |
| 4.3.1 SOD1与5-Furd的相互作用的ESI-MS | 第76页 |
| 4.3.2 5-Furd与SOD1相互作用的M-MS | 第76-78页 |
| 4.3.3 5-Furd对SOD1荧光的淬灭机制 | 第78-81页 |
| 4.3.4 5-Furd对apo-SOD1体外聚集的影响 | 第81-82页 |
| 4.4 本章小结 | 第82-83页 |
| 第5章 茶多酚类化合物与超氧化物歧化酶的相互作用 | 第83-101页 |
| 5.1 引言 | 第83-85页 |
| 5.2 实验部分 | 第85-88页 |
| 5.2.1 实验材料 | 第85页 |
| 5.2.2 样品制备 | 第85-86页 |
| 5.2.3 质谱实验 | 第86页 |
| 5.2.4 ThT外源荧光聚集动力学实验 | 第86-87页 |
| 5.2.5 ANS外源荧光实验 | 第87页 |
| 5.2.6 圆二色谱实验 | 第87页 |
| 5.2.7 细胞培养及MTT法检测细胞活力实验 | 第87-88页 |
| 5.3 结果与讨论 | 第88-100页 |
| 5.3.1 儿茶素配体与SOD1的键合亲和力分析 | 第88-92页 |
| 5.3.2 ESI-MS/MS比较儿茶素-SOD1复合物气相稳定性 | 第92-93页 |
| 5.3.3 Vc_(50)及竞争性结合实验 | 第93-95页 |
| 5.3.4 CIU考察EGCG对SOD1构型的影响 | 第95-97页 |
| 5.3.5 ThT荧光法检测EGCG对apo-SOD1聚集的影响 | 第97-98页 |
| 5.3.6 ANS荧光法检测EGCG对apo-SOD1聚集时疏水区暴露的影响 | 第98-99页 |
| 5.3.7 CD法检测EGCG对apo-SOD1纤维化二级结构的影响 | 第99页 |
| 5.3.8 EGCG对SOD1聚集物诱导PC12细胞毒性的抑制作用 | 第99-100页 |
| 5.4 本章小结 | 第100-101页 |
| 第6章 咖啡酰奎宁酸类化合物与超氧化物歧化酶的相互作用 | 第101-121页 |
| 6.1 引言 | 第101-102页 |
| 6.2 实验部分 | 第102-104页 |
| 6.2.1 实验材料 | 第102页 |
| 6.2.2 样品制备 | 第102-103页 |
| 6.2.3 ESI-MS及ESI-MS/MS实验 | 第103页 |
| 6.2.4 ESI-IM-MS实验 | 第103-104页 |
| 6.3 结果与讨论 | 第104-120页 |
| 6.3.1 咖啡酰奎宁酸类化合物与apo-SOD1的ESI-MS分析 | 第104-105页 |
| 6.3.2 咖啡酰奎宁酸类化合物与apo-SOD1的ESI-MS/MS分析 | 第105-107页 |
| 6.3.3 同分异构体与apo-SOD1键合亲和性比较 | 第107-119页 |
| 6.3.4 二咖啡酰奎宁酸对apo-SOD1构型的影响 | 第119-120页 |
| 6.4 本章小结 | 第120-121页 |
| 第7章 黄烷酮类化合物与超氧化物歧化酶的相互作用 | 第121-131页 |
| 7.1 引言 | 第121-122页 |
| 7.2 实验部分 | 第122-123页 |
| 7.2.1 实验材料 | 第122页 |
| 7.2.2 样品制备 | 第122-123页 |
| 7.2.3 质谱及荧光实验 | 第123页 |
| 7.3 结果与讨论 | 第123-129页 |
| 7.3.1 黄烷酮类化合物与apo-SOD1键合亲和力比较 | 第124-126页 |
| 7.3.2 黄烷酮类化合物与apo-SOD1复合物的MS/MS | 第126-127页 |
| 7.3.3 黄烷酮类化合物对apo-SOD1体外聚集的影响 | 第127-128页 |
| 7.3.4 芹糖甘草苷对apo-SOD1构型的影响 | 第128-129页 |
| 7.4 本章小结 | 第129-131页 |
| 第8章 结论与展望 | 第131-134页 |
| 8.1 主要结论 | 第131-132页 |
| 8.2 创新及展望 | 第132-134页 |
| 参考文献 | 第134-156页 |
| 附录 | 第156-160页 |
| 个人简历 | 第160-162页 |
| 致谢 | 第162-164页 |
| 硕博连读期间发表的学术论文 | 第164页 |
