摘要 | 第4-7页 |
ABSTRACT | 第7-10页 |
缩略词表 | 第13-15页 |
第一章 N-3多不饱和脂肪酸调节脂肪和肌肉生理功能的研究进展 | 第15-28页 |
1.N-3多不饱和脂肪酸在脂肪组织中的功能 | 第16-20页 |
1.1 N-3多不饱和脂肪酸在脂肪中的储存 | 第16页 |
1.2 N-3多不饱和脂肪酸抑制脂肪酸沉积和脂肪细胞的成熟分化 | 第16-18页 |
1.3 N-3多不饱和脂肪酸促进脂肪细胞凋亡 | 第18页 |
1.4 N-3多不饱和脂肪酸促进脂肪细胞氧化 | 第18-20页 |
1.5 N-3多不饱和脂肪酸的抗炎功能 | 第20页 |
2.N-3多不饱和脂肪酸在肌肉组织中的功能 | 第20-27页 |
2.1 蛋白质合成中的作用 | 第20-23页 |
2.2 脂肪酸对骨骼肌运动能力的影响 | 第23-26页 |
2.3 N-3多不饱和脂肪酸对肌肉运动代谢的影响 | 第26-27页 |
3.结语与展望 | 第27-28页 |
第二章 N-3多不饱和脂肪酸调控肌肉细胞能量代谢的研究 | 第28-95页 |
1.引言 | 第28-30页 |
1.1 n-3多不饱和脂肪酸及其脱氢酶的转基因动物模型 | 第28-29页 |
1.2 骨骼肌组织中的能量代谢 | 第29-30页 |
1.3 研究目的和意义 | 第30页 |
2.材料和方法 | 第30-39页 |
2.1 材料 | 第30-31页 |
2.2 试剂及仪器 | 第31页 |
2.3 人源化fad3b基因的获得及表达载体构建 | 第31-32页 |
2.4 细胞转染 | 第32页 |
2.5 转基因小鼠制备 | 第32页 |
2.6 转基因小鼠外源基因拷贝数分析 | 第32-33页 |
2.7 实时定量PCR | 第33-34页 |
2.8 细胞和组织的脂肪酸分析 | 第34页 |
2.9 转录物组分析 | 第34-35页 |
2.10 蛋白质组分析 | 第35-36页 |
2.11 转录组-蛋白质组关联分析 | 第36-37页 |
2.12 肌肉卫星细胞培养 | 第37页 |
2.13 细胞免疫组化检测 | 第37页 |
2.14 体外培养的细胞线粒体形态观察 | 第37-38页 |
2.15 微量法检测代谢物 | 第38页 |
2.16 数据分析 | 第38-39页 |
3.结果 | 第39-87页 |
3.1 Fad3b小鼠模型的建立 | 第39-43页 |
3.1.1 Fad3b在细胞水平的功能检测 | 第39-41页 |
3.1.2 Fad3b转基因小鼠制备 | 第41页 |
3.1.3 转基因小鼠fad3b拷贝数分析 | 第41-42页 |
3.1.4 Fad3b基因在转基因小鼠体内的表达分析 | 第42-43页 |
3.1.5 Fad3b转基因小鼠不同组织中脂肪酸含量变化分析 | 第43页 |
3.2 Fad3b转基因与非转基因小鼠肌肉组织转录物组分析 | 第43-55页 |
3.2.1 测序数据质量评估 | 第43-45页 |
3.2.2 差异表达基因筛选 | 第45-47页 |
3.2.3 差异基因GO分类统计 | 第47-53页 |
3.2.4 差异基因的pathway信号通路统计 | 第53-55页 |
3.3 Fad3b转基因与非转基因小鼠肌肉组织蛋白质组比较分析 | 第55-73页 |
3.3.1 全部鉴定蛋白的质量分析 | 第55-56页 |
3.3.2 全部鉴定蛋白的蛋白质组COG分析 | 第56-57页 |
3.3.3 全部鉴定蛋白的蛋白质组GO和pathway富集分析 | 第57页 |
3.3.4 差异蛋白统计 | 第57-58页 |
3.3.5 差异蛋白的COG分类 | 第58-59页 |
3.3.6 差异蛋白的GO分类 | 第59-63页 |
3.3.7 差异蛋白的Pathway富集分析 | 第63-65页 |
3.3.8 蛋白质互作网络 | 第65-68页 |
3.3.9 转录组和蛋白质组的关联分析 | 第68-73页 |
3.4 Fad3b小鼠肌卫星细胞线粒体能量代谢分析 | 第73-87页 |
3.4.1 Fad3b转基因小鼠肌卫星细胞体外培养与脂肪酸性状分析 | 第73-76页 |
3.4.2 Fad3bMSCs线粒体形态观察 | 第76页 |
3.4.3 Fad3bMSCs脂肪酸代谢检测分析 | 第76-79页 |
3.4.4 Fad3bMSCs葡萄糖代谢检测分析 | 第79-83页 |
3.4.5 Fad3bMSCs三羧酸循环检测分析 | 第83-85页 |
3.4.6 Fad3bMSCs线粒体氧化磷酸化检测分析 | 第85-87页 |
4.讨论 | 第87-94页 |
4.1 Fad3b转基因小鼠模型 | 第87-88页 |
4.2 N-3多不饱和脂肪酸对葡萄糖代谢的影响 | 第88-89页 |
4.3 N-3多不饱和脂肪酸对脂肪酸代谢的影响 | 第89-92页 |
4.4 N-3多不饱和脂肪酸对氧化磷酸化和三羧酸循环的影响 | 第92-94页 |
5.结论 | 第94-95页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第95-96页 |
致谢 | 第96-97页 |
参考文献 | 第97-108页 |