| 中文摘要 | 第4-5页 |
| 英文摘要 | 第5-7页 |
| 英文缩略表 | 第7-13页 |
| 第一章 前言 | 第13-18页 |
| 1. 结直肠癌与结直肠癌干细胞 | 第13-14页 |
| 2. Smad4基因 | 第14-15页 |
| 3. Smad4与肿瘤 | 第15页 |
| 4. ID3基因 | 第15-16页 |
| 5. ID3与肿瘤 | 第16-17页 |
| 6. 研究目的及意义 | 第17-18页 |
| 第二章 实验材料和方法 | 第18-37页 |
| 2.1 实验材料 | 第18-24页 |
| 2.1.1 细胞株 | 第18页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第18-19页 |
| 2.1.3 主要耗材 | 第19-20页 |
| 2.1.4 抗体和细胞因子 | 第20页 |
| 2.1.5 主要设备 | 第20-22页 |
| 2.1.6 主要溶液的配制 | 第22-24页 |
| 2.2 实验方法 | 第24-37页 |
| 2.2.1 细胞培养技术 | 第24-25页 |
| 2.2.2 细胞计数 | 第25页 |
| 2.2.3 质粒扩增技术 | 第25-27页 |
| 2.2.4 慢病毒包装和收集 | 第27-28页 |
| 2.2.5 慢病毒转染细胞实验 | 第28页 |
| 2.2.6 CCK8细胞增殖实验 | 第28页 |
| 2.2.7 克隆形成实验 | 第28-29页 |
| 2.2.8 微球体形成实验 | 第29页 |
| 2.2.9 流式细胞术 | 第29-30页 |
| 2.2.10 蛋白免疫印记实验 | 第30-33页 |
| 2.2.11 细胞总RNA提取(Trizol法) | 第33-34页 |
| 2.2.12 高通量测序样品制备 | 第34页 |
| 2.2.13 逆转录实验 | 第34-35页 |
| 2.2.14 荧光定量PCR实验 | 第35-36页 |
| 2.2.15 统计学分析 | 第36-37页 |
| 第三章 结果与分析 | 第37-51页 |
| 3.1 Smad4对结肠癌细胞干性生物学特性的影响 | 第37-45页 |
| 3.1.1. 不同结肠癌细胞Smad4表达水平差异很大 | 第37页 |
| 3.1.2 构建结肠癌细胞Smad4的敲减及过表达模型 | 第37-38页 |
| 3.1.3 Smad4抑制结肠癌细胞的增殖能力 | 第38-39页 |
| 3.1.4 Smad4抑制结肠癌细胞的克隆形成和微球体形成能力 | 第39-41页 |
| 3.1.5 Smad4抑制结肠癌细胞干性基因的表达 | 第41-45页 |
| 3.2 Smad4抑制结肠癌细胞干性的机制研究 | 第45-51页 |
| 3.2.1 高通量测序及基因验证 | 第45-46页 |
| 3.2.2 构建结肠癌细胞分化抑制因子-3(ID3)的敲减模型 | 第46-47页 |
| 3.2.3 ID3抑制结肠癌细胞的增殖能力 | 第47-48页 |
| 3.2.4 ID3抑制结肠癌细胞的克隆形成和微球体形成能力 | 第48-49页 |
| 3.2.5 ID3抑制结肠癌细胞干性基因的表达 | 第49-51页 |
| 第四章 讨论 | 第51-54页 |
| 第五章 结论 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
| 硕士期间发表的学术论文 | 第61页 |
