中文摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
英文缩略语 | 第10-11页 |
文献综述 | 第11-22页 |
1 芳香类化合物异戊烯基转移酶的杂泛性 | 第11-16页 |
1.1 芳香类化合物异戊烯基转移酶简介 | 第11页 |
1.2 异戊烯基芳香类化合物简介 | 第11页 |
1.3 芳香类化合物异戊烯基转移酶的分类 | 第11-12页 |
1.4 芳香类化合物异戊烯基转移酶的杂泛性 | 第12-16页 |
2 喜树碱的研究进展 | 第16-22页 |
2.1 喜树碱的植物来源 | 第16页 |
2.2 喜树碱的结构与性质 | 第16-17页 |
2.3 喜树碱的生物合成途径 | 第17页 |
2.4 喜树碱的抗肿瘤活性及其作用机制 | 第17-19页 |
2.5 喜树碱其它的药理活性 | 第19-20页 |
2.6 喜树碱衍生物 | 第20页 |
2.7 喜树碱的构效关系研究 | 第20-22页 |
第一部分 重组异戊烯基转移酶AtPT对10-羟基喜树碱等芳香类化合物的异戊烯基化 | 第22-71页 |
前言 | 第22-23页 |
材料和方法 | 第23-31页 |
1 实验材料 | 第23-25页 |
1.1 仪器与设备 | 第23页 |
1.2 药品与试剂 | 第23-24页 |
1.3 菌种 | 第24页 |
1.4 培养基的配制 | 第24页 |
1.5 抗生素和IPTG的配制 | 第24页 |
1.6 蛋白分离纯化相关缓冲液的配制 | 第24页 |
1.7 蛋白电泳相关试剂和缓冲液的配制 | 第24-25页 |
2 实验方法 | 第25-31页 |
2.1 重组菌Rosetta-pET28a-AtPT发酵 | 第25页 |
2.2 重组AtPT分离纯化(低温操作) | 第25-28页 |
2.3 重组AtPT对20种芳香类化合物异戊烯基化反应的筛选 | 第28-29页 |
2.4 异戊烯基化产物制备 | 第29-30页 |
2.5 各酶反应时间曲线的绘制 | 第30页 |
2.6 酶动力学分析 | 第30-31页 |
结果 | 第31-71页 |
1 重组AtPT对20种芳香类化合物异戊烯基化反应的筛选 | 第31-47页 |
2 重组AtPT对10-羟基喜树碱等芳香类化合物的异戊烯基化的产物制备与结构鉴定 | 第47-71页 |
2.1 重组AtPT以DMAPP为供体催化厚朴酚异戊烯基化的产物制备与结构鉴定 | 第48-54页 |
2.2 重组AtPT以GPP为供体催化厚朴酚异戊烯基化的产物制备与结构鉴定 | 第54-57页 |
2.3 重组AtPT以GPP为供体催化和厚朴酚异戊烯基化的产物制备与结构鉴定 | 第57-61页 |
2.4 重组AtPT以GPP为供体催化10-羟基异戌烯基化的产物制备与结构鉴定 | 第61-64页 |
2.5 重组AtPT以FPP为供体催化10-羟基喜树碱异戊烯基化的产物制备与结构鉴定 | 第64-65页 |
2.6 重组AtPT以GPP为供体催化9-氨基喜树碱异戊烯基化的产物制备与结构鉴定 | 第65-68页 |
2.7 各酶反应时间曲线的绘制 | 第68页 |
2.8 酶动力学分析 | 第68-71页 |
第二部分 毛霉对柚皮素的硫酸酯化 | 第71-78页 |
前言 | 第71-72页 |
材料和方法 | 第72-74页 |
1 实验材料 | 第72页 |
1.1 仪器 | 第72页 |
1.2 药品与试剂 | 第72页 |
1.3 真菌菌种 | 第72页 |
1.4 培养基 | 第72页 |
2 实验方法 | 第72-74页 |
2.1 毛霉种子液的制备 | 第72-73页 |
2.2 毛霉对柚皮素的微生物转化筛选 | 第73页 |
2.3 毛霉对柚皮素的微生物转化的放大实验 | 第73页 |
2.4 毛霉转化柚皮素的动态考察 | 第73-74页 |
结果 | 第74-78页 |
1 毛霉对柚皮素的微生物转化筛选 | 第74-75页 |
2 毛霉对柚皮素的微生物转化的放大实验 | 第75-76页 |
3 柚皮素微生物转化的动态 | 第76-78页 |
讨论与总结 | 第78-79页 |
参考文献 | 第79-83页 |
致谢 | 第83-84页 |
个人简历 | 第84-85页 |
附录 | 第85-105页 |
第一部分 | 第85-100页 |
第二部分 | 第100-105页 |