| 致谢 | 第6-7页 |
| 摘要 | 第7-9页 |
| abstract | 第9-11页 |
| 1 绪论 | 第19-28页 |
| 1.1 β-兴奋剂 | 第19-23页 |
| 1.1.1 化学结构 | 第19页 |
| 1.1.2 理化性质 | 第19页 |
| 1.1.3 作用机制 | 第19页 |
| 1.1.4 药物作用 | 第19-20页 |
| 1.1.5 残留危害 | 第20页 |
| 1.1.6 β-兴奋剂检测的研究现状 | 第20-23页 |
| 1.2 苯乙醇胺A概述 | 第23-25页 |
| 1.2.1 苯乙醇胺A简介 | 第23-24页 |
| 1.2.2 苯乙醇胺A残留检测方法 | 第24-25页 |
| 1.3 免疫-PCR检测方法及研究进展 | 第25-27页 |
| 1.3.1 免疫PCR技术 | 第25页 |
| 1.3.2 免疫PCR的原理 | 第25页 |
| 1.3.3 实时荧光定量免疫PCR技术 | 第25-26页 |
| 1.3.4 免疫PCR研究进展 | 第26页 |
| 1.3.5 环介导等温扩增技术（LAMP） | 第26-27页 |
| 1.4 研究目的及意义 | 第27-28页 |
| 2 PEAA人工抗原与抗体制备 | 第28-38页 |
| 2.1 材料 | 第28-29页 |
| 2.1.1 试剂 | 第28页 |
| 2.1.2 实验动物 | 第28页 |
| 2.1.3 仪器设备 | 第28页 |
| 2.1.4 缓冲液配制 | 第28-29页 |
| 2.2 实验方法 | 第29-32页 |
| 2.2.1 PEAA的制备与鉴定 | 第29-30页 |
| 2.2.2 PEAA衍生物的制备与鉴定 | 第30-31页 |
| 2.2.3 免疫原和包被原的制备 | 第31页 |
| 2.2.4 人工抗原合成鉴定 | 第31-32页 |
| 2.3 PEAA兔多克隆抗体的制备与鉴定 | 第32-33页 |
| 2.3.1 兔多克隆抗体制备 | 第32页 |
| 2.3.2 兔多克隆抗体效价测定 | 第32-33页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第33-36页 |
| 2.4.1 PEAA的制备与鉴定 | 第33-34页 |
| 2.4.2 PEAA衍生物的制备与鉴定 | 第34页 |
| 2.4.3 人工抗原的鉴定 | 第34-36页 |
| 2.4.4 PEAA兔克隆抗体的制备与鉴定 | 第36页 |
| 2.5 小结 | 第36-38页 |
| 3 PEAA间接竞争ELISA方法的建立 | 第38-46页 |
| 3.1 实验材料 | 第38-39页 |
| 3.1.1 主要试剂 | 第38页 |
| 3.1.2 主要仪器设备 | 第38页 |
| 3.1.3 缓冲液配制 | 第38-39页 |
| 3.2 实验方法 | 第39-41页 |
| 3.2.1 PEAA多克隆抗体与人工抗原最佳工作浓度确定 | 第39页 |
| 3.2.2 PEAA间接竞争ELISA法的标准曲线和灵敏度 | 第39-40页 |
| 3.2.3 特异性 | 第40页 |
| 3.2.4 添加回收试验 | 第40-41页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第41-45页 |
| 3.3.1 PEAA多克隆抗体与人工抗原最佳工作浓度确定 | 第41-42页 |
| 3.3.2 PEAA间接竞争ELISA法的标准曲线和灵敏度 | 第42-43页 |
| 3.3.3 特异性 | 第43页 |
| 3.3.4 添加回收试验 | 第43-45页 |
| 3.4 小结 | 第45-46页 |
| 4 PEAA间接竞争免疫PCR（IPCR）方法的建立 | 第46-70页 |
| 4.1 实验材料 | 第46-48页 |
| 4.1.1 主要试剂 | 第46-47页 |
| 4.1.2 溶液配制 | 第47页 |
| 4.1.3 主要仪器 | 第47-48页 |
| 4.2 实验方法 | 第48-54页 |
| 4.2.1 报告DNA的筛选 | 第48页 |
| 4.2.2 生物素标记的报告DNA（Bio-DNA）的制备及鉴定 | 第48-50页 |
| 4.2.3 制备及鉴定生物素标记的PEAA多克隆抗体（Bio-PEAA p Ab） | 第50-51页 |
| 4.2.4 免疫PCR反应条件的优化 | 第51-53页 |
| 4.2.5 PEAA免疫PCR方法的建立 | 第53-54页 |
| 4.3 结果与分析 | 第54-68页 |
| 4.3.1 报告DNA的设计与筛选 | 第54-55页 |
| 4.3.2 Bio-DNA制备与鉴定 | 第55-57页 |
| 4.3.3 Bio-PEAA p Ab的鉴定 | 第57-59页 |
| 4.3.4 免疫PCR条件优化 | 第59-65页 |
| 4.3.5 PEAA免疫PCR检测方法研究 | 第65-68页 |
| 4.4 小结 | 第68-70页 |
| 5 基于间接竞争IPCR方法PEAA间接竞争免疫-LAMP方法的建立 | 第70-81页 |
| 5.1 实验材料 | 第70-71页 |
| 5.1.1 主要试剂和仪器设备 | 第70页 |
| 5.1.2 缓冲液配制 | 第70-71页 |
| 5.2 实验方法 | 第71-73页 |
| 5.2.1 LAMP引物的设计 | 第71页 |
| 5.2.2 高效扩增的LAMP反应体系优化 | 第71页 |
| 5.2.3 包被抗原PEAA-OVA与Bio-PEAA pAb1 | 第71-72页 |
| 5.2.4 PEAA免疫-LAMP方法的建立 | 第72-73页 |
| 5.3 结果与分析 | 第73-80页 |
| 5.3.1 LAMP引物的设计 | 第73页 |
| 5.3.2 高效扩增的LAMP反应体系优化 | 第73-75页 |
| 5.3.3 PEAA-OVA与Bio-PEAA pAb1 | 第75-76页 |
| 5.3.4 PEAA免疫LAMP检测方法步骤 | 第76-77页 |
| 5.3.5 线性范围与检测灵敏度 | 第77页 |
| 5.3.6 最低检测限 | 第77页 |
| 5.3.7 特异性 | 第77-78页 |
| 5.3.8 准确性 | 第78页 |
| 5.3.9 精密度 | 第78-80页 |
| 5.4 小结 | 第80-81页 |
| 6 结论与展望 | 第81-83页 |
| 6.1 全文总结 | 第81-82页 |
| 6.2 创新点 | 第82-83页 |
| 参考文献 | 第83-89页 |
| 作者简历 | 第89页 |
