| 摘要 | 第8-11页 |
| Abstract | 第11-14页 |
| 缩略词表 | 第15-18页 |
| 第一章 前言 | 第18-24页 |
| 1.1 药物研发的基本流程 | 第18-19页 |
| 1.2 药物分析学科的研究内容 | 第19页 |
| 1.3 药物靶标鉴定的主要研究方法 | 第19-20页 |
| 1.4 细胞膜色谱技术在药物靶标研究中的现状 | 第20-22页 |
| 1.5 亲和探针技术在药物靶标研究中的现状 | 第22-23页 |
| 1.6 本课题的研究思路 | 第23-24页 |
| 第二章 整合细胞膜色谱系统的构建及在VEGFR-2受体抑制剂靶标鉴定上的应用 | 第24-35页 |
| 2.1 引言 | 第24-25页 |
| 2.2 实验部分 | 第25-30页 |
| 2.2.1 试剂 | 第25页 |
| 2.2.2 仪器 | 第25-26页 |
| 2.2.3 标准液和样品的配制 | 第26页 |
| 2.2.4 SMMC-7721和HepG2细胞的培养 | 第26页 |
| 2.2.5 SMMC-7721和HepG2细胞的冻存 | 第26页 |
| 2.2.6 SMMC-7721和HepG2的细胞复苏 | 第26-27页 |
| 2.2.7 细胞膜色谱模型的构建 | 第27页 |
| 2.2.8 整合细胞膜色谱-高效液相色谱-飞行时间质谱平台 | 第27-29页 |
| 2.2.9 整合CMC-HPLC-TOF-MS系统的选择性考察 | 第29页 |
| 2.2.10 整合CMC-HPLC-TOF-MS系统的应用 | 第29-30页 |
| 2.2.11 VEGFR-2的体外酶活性考察 | 第30页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第30-34页 |
| 2.3.1 细胞种类选择 | 第30页 |
| 2.3.2 整合CMC-HPLC-TOF-MS系统的选择性考察 | 第30-31页 |
| 2.3.3 应用整合CMC-HPLC-TOF-MS系统对潜在VEGFR-2抑制剂的活性评价 | 第31-33页 |
| 2.3.4 合成化合物对VEGFR-2激酶活性抑制的测定 | 第33-34页 |
| 2.4 本章小结 | 第34-35页 |
| 第三章 TCP-matrine探针的合成及在matrine靶标分析中的应用 | 第35-57页 |
| 3.1 引言 | 第35-36页 |
| 3.2 实验部分 | 第36-42页 |
| 3.2.1 试剂 | 第36页 |
| 3.2.2 仪器 | 第36-37页 |
| 3.2.3 探针的合成、纯化和表征 | 第37-39页 |
| 3.2.4 细胞划痕实验 | 第39-40页 |
| 3.2.5 亲和下拉实验 | 第40页 |
| 3.2.6 膜联蛋白和膜突蛋白的鉴定实验 | 第40页 |
| 3.2.7 表面等离子共振分析实验（SPR） | 第40-41页 |
| 3.2.8 RNA干扰实验 | 第41页 |
| 3.2.9 质粒转染实验 | 第41页 |
| 3.2.10 实时荧光定量PCR实验（Real-time PCR） | 第41-42页 |
| 3.2.11 蛋白质印迹实验 | 第42页 |
| 3.2.12 纤溶酶和纤溶酶原的含量测定实验 | 第42页 |
| 3.2.13 统计数据 | 第42页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第42-56页 |
| 3.3.1 光亲和探针的组成与功能 | 第42-43页 |
| 3.3.2 TCP-matrine探针的组成 | 第43-44页 |
| 3.3.3 TCP-matrine探针与苦参碱的活性比较 | 第44页 |
| 3.3.4 苦参碱的靶蛋白分离及鉴定 | 第44-46页 |
| 3.3.5 亲和力常数测定 | 第46-49页 |
| 3.3.6 苦参碱抑制细胞迁移 | 第49页 |
| 3.3.7 ANXA2抗体可以抑制苦参碱抗细胞迁移的药效 | 第49-52页 |
| 3.3.8 ANXA2低表达细胞系建立 | 第52-53页 |
| 3.3.9 ANXA2表达降低可以抑制细胞迁移 | 第53-55页 |
| 3.3.10 细胞上清中纤溶酶与纤溶酶原的含量测定 | 第55-56页 |
| 3.4 本章小结 | 第56-57页 |
| 第四章 TCP-MLN8237探针的合成及在MLN8237靶标分析中的应用 | 第57-71页 |
| 4.1 引言 | 第57页 |
| 4.2 实验部分 | 第57-67页 |
| 4.2.1 试剂 | 第57-58页 |
| 4.2.2 仪器 | 第58页 |
| 4.2.3 探针的合成、纯化和表征 | 第58-64页 |
| 4.2.4 细胞凋亡实验 | 第64-67页 |
| 4.2.5 亲和下拉实验 | 第67页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第67-70页 |
| 4.3.1 探针的设计和合成 | 第67-68页 |
| 4.3.2 TCP-MLN8237探针的活性比较 | 第68页 |
| 4.3.3 MLN8237的靶蛋白分离 | 第68页 |
| 4.3.4 MLN8237的靶蛋白的鉴定 | 第68-70页 |
| 4.4 本章小结 | 第70-71页 |
| 第五章 DNA-MLN8237探针的合成及在MLN8237靶标分析中的应用 | 第71-95页 |
| 5.1 引言 | 第71-72页 |
| 5.2 实验部分 | 第72-78页 |
| 5.2.1 试剂 | 第72页 |
| 5.2.2 仪器 | 第72-73页 |
| 5.2.3 DNA探针的结构、合成、纯化、表征 | 第73-76页 |
| 5.2.4 DPAL实验、胶内荧光成像及蛋白条带鉴定 | 第76页 |
| 5.2.5 表面等离子共振分析实验 | 第76-77页 |
| 5.2.6 p38激酶活性测定实验 | 第77页 |
| 5.2.7 MLN8237的分子对接实验 | 第77页 |
| 5.2.8 细胞凋亡的测定实验 | 第77页 |
| 5.2.9 蛋白质免疫印迹实验 | 第77-78页 |
| 5.2.10 细胞划痕实验 | 第78页 |
| 5.2.11 细胞侵袭实验 | 第78页 |
| 5.2.12 laminin浓度测定实验 | 第78页 |
| 5.3 结果与讨论 | 第78-93页 |
| 5.3.1 基于DNA探针的光亲和标记技术实验（DNA-programmed photoaffinity labeling，DPAL） | 第78-82页 |
| 5.3.2 p38可能是MLN8237的潜在靶点 | 第82-85页 |
| 5.3.3 lamininreceptor可能是MLN8237的潜在靶点 | 第85-93页 |
| 5.4 本章小结 | 第93-95页 |
| 全文总结及创新点 | 第95-97页 |
| 综述：光反应亲和探针与药物靶标鉴定研究 | 第97-110页 |
| 参考文献 | 第110-120页 |
| 在读期间发表论文情况 | 第120-121页 |
| 致谢 | 第121页 |
