| 摘要 | 第4-6页 |
| abstract | 第6-8页 |
| 第一章 绪论 | 第12-38页 |
| 1.1 肝癌的研究现状 | 第12-13页 |
| 1.2 细胞周期与Cyclin D1 | 第13-26页 |
| 1.2.1 细胞周期 | 第13-15页 |
| 1.2.2 Cyclin D1的发现及其结构特征 | 第15-16页 |
| 1.2.3 Cyclin D1的分子调控机制 | 第16-18页 |
| 1.2.4 Cyclin D1的生物学作用 | 第18-22页 |
| 1.2.5 Cyclin D1的降解 | 第22-24页 |
| 1.2.6 Cyclin D1与肿瘤 | 第24-26页 |
| 1.2.7 Cyclin D1为靶点的肝癌治疗 | 第26页 |
| 1.3 胞内抗体技术 | 第26-30页 |
| 1.3.1 胞内抗体技术的发展 | 第26-28页 |
| 1.3.2 胞内抗体技术的优势及应用 | 第28-30页 |
| 1.4 抗原抗体的相互作用分析 | 第30-34页 |
| 1.4.1 噬菌体展示技术与表位预测 | 第32-33页 |
| 1.4.2 计算机模拟 | 第33-34页 |
| 1.5 本论文的立题目的及意义 | 第34-38页 |
| 第二章 抗人Cyclin D1胞内抗体在体内外抑制肝癌细胞的生长和增殖 | 第38-62页 |
| 2.1 实验材料 | 第39-43页 |
| 2.1.1 细胞株及质粒 | 第39页 |
| 2.1.2 引物 | 第39页 |
| 2.1.3 主要药品及试剂 | 第39-41页 |
| 2.1.4 常用试剂配制 | 第41-43页 |
| 2.2 实验方法 | 第43-50页 |
| 2.2.1 去内毒素质粒的提取 | 第43-44页 |
| 2.2.2 细胞培养 | 第44页 |
| 2.2.3 脂质体介导的瞬时转染 | 第44-45页 |
| 2.2.4 瞬时转染细胞的相关分析 | 第45-47页 |
| 2.2.5 稳定转染细胞系建立与鉴定 | 第47-48页 |
| 2.2.6 肝癌裸鼠动物模型治疗分析 | 第48-49页 |
| 2.2.7 统计学分析 | 第49-50页 |
| 2.3 实验结果 | 第50-59页 |
| 2.3.1 HepG2细胞中Cyclin D1的表达 | 第50-51页 |
| 2.3.2 细胞瞬时转染实验鉴定ER-ADκ在HepG2细胞中的表达 | 第51-52页 |
| 2.3.3 稳定转染细胞系的建立及ER-ADκ的体外抑瘤效应分析 | 第52-57页 |
| 2.3.4 ER-ADκ体内抑瘤效应分析 | 第57-59页 |
| 2.4 讨论 | 第59-61页 |
| 2.4.1 治疗肝癌的新策略 | 第59-60页 |
| 2.4.2 靶向Cydin D1的胞内抗体是肝癌治疗的潜在手段 | 第60-61页 |
| 2.5 本章小结 | 第61-62页 |
| 第三章 抗Cyclin D1胞内抗体ER-ADK的抗肿瘤分子机制研究 | 第62-108页 |
| 3.1 实验材料 | 第63-67页 |
| 3.1.1 菌种及质粒 | 第63-64页 |
| 3.1.2 实验试剂 | 第64-65页 |
| 3.1.3 常用试剂配制 | 第65-67页 |
| 3.2 实验方法 | 第67-82页 |
| 3.2.1 相关蛋白质的原核表达与纯化 | 第67-68页 |
| 3.2.2 Cyclin D1与AD9相互作用的表位分析 | 第68-72页 |
| 3.2.3 Cyclin D1截短突变体的构建和验证 | 第72-75页 |
| 3.2.4 计算机模拟 | 第75-76页 |
| 3.2.5 Cyclin D1定点突变体的构建及鉴定 | 第76-78页 |
| 3.2.6 胞内抗体在肿瘤细胞内对Cyclin D1下游信号的影响 | 第78-82页 |
| 3.3 实验结果 | 第82-104页 |
| 3.3.1 Cyclin D1与AD9的纯化 | 第82-84页 |
| 3.3.2 ELISA分析Cyclin D1与AD9作用的表位类型 | 第84-85页 |
| 3.3.3 噬菌体随机环七肽库筛选结合单链抗体的小肽 | 第85-87页 |
| 3.3.4 Cyclin D1截短突变体验证AD9识别的模拟表位区间 | 第87-93页 |
| 3.3.5 计算机模拟 | 第93-97页 |
| 3.3.6 Cyclin D1定点突变实验回复验证抗体-抗原相互作用关键氨基酸 | 第97-100页 |
| 3.3.7 抗Cyclin D1胞内抗体抑瘤效应的可能分子机制 | 第100-104页 |
| 3.4 讨论 | 第104-106页 |
| 3.4.1 Cyclin D1与抗Cyclin D1单链抗体相互作用的分子基础 | 第104-105页 |
| 3.4.2 ER-ADκ的抑瘤机制研究 | 第105-106页 |
| 3.5 本章小结 | 第106-108页 |
| 结论 | 第108-110页 |
| 参考文献 | 第110-130页 |
| 作者简介 | 第130-132页 |
| 攻读博士期间发表的论文 | 第132-134页 |
| 致谢 | 第134页 |
