致谢 | 第7-8页 |
摘要 | 第8-10页 |
ABSTRACT | 第10-11页 |
符号注释表 | 第17-18页 |
第一章 绪论 | 第18-28页 |
1.1 三羟异黄酮 | 第18-20页 |
1.1.1 三羟异黄酮的化学结构及生物活性 | 第18-19页 |
1.1.2 三羟基异黄酮的药理作用及研究现状 | 第19-20页 |
1.2 非酒精性脂肪肝 | 第20-21页 |
1.2.1 非酒精性脂肪肝的形成机制 | 第20页 |
1.2.2 非酒精性脂肪肝的治疗现状 | 第20-21页 |
1.3 过氧化物酶体增殖物激活受体PPARs | 第21-22页 |
1.3.1 PPARs的组成及结构 | 第21-22页 |
1.3.2 PPARs信号通路的研究现状 | 第22页 |
1.4 ChREBP碳水化合物反应元件结合蛋白 | 第22-24页 |
1.4.1 ChREBP组成和结构特性 | 第23页 |
1.4.2 ChREBP信号通路的研究现状 | 第23-24页 |
1.5 脂肪酸代谢 | 第24-26页 |
1.5.1 脂肪酸氧化的关键酶-肉碱棕桐酰转移酶I | 第24-25页 |
1.5.2 脂肪酸合成的关键酶-乙酰辅酶A羧化酶 | 第25-26页 |
1.6 脂肪细胞因子 | 第26页 |
1.7 研究目的及意义 | 第26-28页 |
第二章 非酒精性脂肪肝体外培养细胞模型的建立 | 第28-41页 |
2.1 实验材料 | 第28-29页 |
2.1.1 实验细胞 | 第28页 |
2.1.2 实验仪器与试剂 | 第28-29页 |
2.2 实验方法 | 第29-34页 |
2.2.1 细胞的复苏、传代培养及冻存 | 第29-30页 |
2.2.2 实验分组及处理 | 第30-31页 |
2.2.3 细胞活性的测定(MTT法) | 第31页 |
2.2.4 细胞谷丙转氨酶的测定 | 第31-32页 |
2.2.5 细胞谷草转氨酶的测定 | 第32-33页 |
2.2.6 细胞甘油三酯的测定 | 第33页 |
2.2.7 细胞游离脂肪酸的测定 | 第33-34页 |
2.3 结果与分析 | 第34-39页 |
2.3.1 油酸诱导对细胞活力的影响 | 第34-36页 |
2.3.2 油酸诱导对细胞谷丙转氨酶含量的影响 | 第36-37页 |
2.3.3 油酸诱导对细胞谷草转氨酶含量的影响 | 第37-38页 |
2.3.4 三羟基异黄酮对甘油三酯含量的影响 | 第38-39页 |
2.3.5 三羟基异黄酮对游离脂肪酸含量的影响 | 第39页 |
2.4 讨论 | 第39-41页 |
第三章 三羟异黄酮对脂肪酸代谢中转录因子和关键限速酶的调控 | 第41-63页 |
3.1 实验材料 | 第41-44页 |
3.1.1 实验细胞 | 第41页 |
3.1.2 实验仪器与试剂 | 第41-43页 |
3.1.3 引物设计 | 第43-44页 |
3.2 试验方法 | 第44-47页 |
3.2.1 细胞培养及分组处理 | 第44页 |
3.2.2 细胞总RNA提取 | 第44-45页 |
3.2.3 cDNA反转录 | 第45页 |
3.2.4 荧光定量PCR检测 | 第45-47页 |
3.2.5 丙二酰辅酶A含量的检测 | 第47页 |
3.3 实验结果 | 第47-60页 |
3.3.1 细胞RNA的质量检测 | 第47-48页 |
3.3.2 Gen对细胞PPARs mRNA表达的影响 | 第48-52页 |
3.3.3 Gen对细胞ChREBP mRNA表达的影响 | 第52-54页 |
3.3.4 Gen对细胞CPT-1 mRNA表达的影响 | 第54-56页 |
3.3.5 Gen对细胞ACC mRNA表达的影响 | 第56-57页 |
3.3.6 Gen对细胞Malonyl-CoA含量的影响 | 第57-60页 |
3.4 讨论 | 第60-63页 |
第四章 三羟异黄酮对细胞因子的调控研究 | 第63-71页 |
4.1 实验材料 | 第63-64页 |
4.1.1 实验细胞 | 第63页 |
4.1.2 实验器材 | 第63-64页 |
4.2 实验方法 | 第64-65页 |
4.2.1 细胞的培养与分化诱导 | 第64页 |
4.2.2 细胞的分组与样本制备 | 第64页 |
4.2.3 TNF-α、Leptin浓度的测定 | 第64-65页 |
4.2.4 实验具体操作 | 第65页 |
4.3 实验结果 | 第65-69页 |
4.3.1 TNF-α、Leptin含量的标准曲线 | 第65-67页 |
4.3.2 Gen对四种细胞中细胞因子TNF-α、LEP水平的影响 | 第67-69页 |
4.4 讨论 | 第69-71页 |
第五章 结论与展望 | 第71-73页 |
5.1 主要结论 | 第71-72页 |
5.2 展望 | 第72-73页 |
参考文献 | 第73-81页 |
攻读硕士学位期间的学术活动及成果情况 | 第81页 |