| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 本论文主要创新点 | 第9-10页 |
| 主要缩写词表 | 第10-14页 |
| 第一章 绪论 | 第14-28页 |
| 1.1 铜锌超氧化物歧化酶的结构与功能 | 第14-15页 |
| 1.2 蛋白质治疗与SOD1的胞内释放 | 第15-18页 |
| 1.3 非病毒基因载体 | 第18-19页 |
| 1.4 蛋白质作为非病毒基因载体的研究 | 第19-20页 |
| 1.5 SOD1氧化损伤的研究 | 第20-24页 |
| 1.6 核酸促使蛋白质聚集的研究 | 第24-26页 |
| 1.7 本论文的研究内容和意义 | 第26-28页 |
| 1.7.1 工作基础 | 第26-27页 |
| 1.7.2 研究内容 | 第27页 |
| 1.7.3 研究意义 | 第27-28页 |
| 第二章 维生素C、双氧水对wtSOD1损伤的研究 | 第28-42页 |
| 2.1 引言 | 第28页 |
| 2.2 实验材料与方法 | 第28-33页 |
| 2.2.1 实验仪器与试剂 | 第28-29页 |
| 2.2.2 溶液配制 | 第29-30页 |
| 2.2.3 Vc、H_2O_2对wtSOD1疏水性的影响 | 第30页 |
| 2.2.4 Vc、H_2O_2对wtSOD1内源荧光的影响 | 第30-31页 |
| 2.2.5 Vc、H_2O_2对wtSOD1二级结构的改变 | 第31页 |
| 2.2.6 小角散射SAXS研究Vc、H_2O_2对wtSOD1结构的影响 | 第31-32页 |
| 2.2.7 Vc、H_2O_2对wtSOD1活力的影响 | 第32-33页 |
| 2.2.8 不同条件下wtSOD1表面电荷的变化 | 第33页 |
| 2.3 实验结果和讨论 | 第33-41页 |
| 2.3.1 wtSOD1疏水性的变化 | 第33-35页 |
| 2.3.2 wtSOD1内源荧光的变化 | 第35-36页 |
| 2.3.3 Vc、H_2O_2与wtSOD1相互作用后蛋白质二级结构的分析 | 第36-37页 |
| 2.3.4 Vc、H_2O_2与wtSOD1相互作用后蛋白质结构的小角散射分析 | 第37-39页 |
| 2.3.5 Vc、H_2O_2损伤对SOD1活力的影响 | 第39-40页 |
| 2.3.6 wtSOD1表面电荷变化 | 第40-41页 |
| 2.4 本章小结 | 第41-42页 |
| 第三章 酸性及近生理环境中Vc损伤条件下不同结构的DNA片段与SOD1相互作用的研究 | 第42-60页 |
| 3.1 引言 | 第42页 |
| 3.2 实验材料与方法 | 第42-48页 |
| 3.2.1 实验仪器与试剂 | 第42-43页 |
| 3.2.2 溶液配制 | 第43-44页 |
| 3.2.3 圆二色谱研究DNA的二级结构 | 第44-45页 |
| 3.2.4 90°直角光散射(RALS)追踪SOD1聚集过程 | 第45页 |
| 3.2.5 ANS荧光法研究SOD1疏水性变化 | 第45-46页 |
| 3.2.6 激光散射粒度仪研究SOD1聚集体粒径的大小 | 第46页 |
| 3.2.7 Zeta电位粒度仪研究SOD1聚集体表面电荷量 | 第46页 |
| 3.2.8 荧光双染色观察聚集体形态 | 第46-47页 |
| 3.2.9 透射电子显微镜(TEM)研究SOD1聚集体的形貌 | 第47页 |
| 3.2.10 酸性体系中,SOD1聚集与解聚后活力变化研究 | 第47-48页 |
| 3.3 实验结果与讨论 | 第48-59页 |
| 3.3.1 圆二色谱研究DNA的二级结构 | 第48-49页 |
| 3.3.2 RALS追踪SOD1聚集过程 | 第49-51页 |
| 3.3.3 SOD1疏水性的变化 | 第51-53页 |
| 3.3.4 SOD1聚集体表面电荷研究 | 第53-54页 |
| 3.3.5 不同SOD1与DNA浓度比对SOD1聚集体粒径与表面电荷的影响 | 第54-55页 |
| 3.3.6 SOD1聚集形貌的表征 | 第55-58页 |
| 3.3.7 酸性体系中SOD1聚集与解聚后活力的检测 | 第58-59页 |
| 3.4 本章小结 | 第59-60页 |
| 第四章 SOD1-DNA聚集体作为双功能基因载体的研究 | 第60-71页 |
| 4.1 引言 | 第60页 |
| 4.2 实验材料及溶液配制 | 第60-62页 |
| 4.2.1 实验仪器与试剂 | 第60-61页 |
| 4.2.2 溶液配制 | 第61-62页 |
| 4.3 FAM - DNA对SOD1聚集的影响 | 第62-63页 |
| 4.3.1 实验方法与步骤 | 第62页 |
| 4.3.2 结果与讨论 | 第62-63页 |
| 4.4 聚集前后FAM- DNA荧光的变化 | 第63-64页 |
| 4.4.1 实验方法与步骤 | 第63页 |
| 4.4.2 结果与讨论 | 第63-64页 |
| 4.5 去Vc的SOD1与FAM- DNA的聚集及荧光的变化 | 第64-65页 |
| 4.5.1 实验方法与步骤 | 第64页 |
| 4.5.2 结果与讨论 | 第64-65页 |
| 4.6 SOD1-DNA聚集体的细胞跨膜实验 | 第65-70页 |
| 4.6.1 实验方法与步骤 | 第65-66页 |
| 4.6.2 结果与讨论 | 第66-70页 |
| 4.7 本章小结 | 第70-71页 |
| 第五章 结论与展望 | 第71-73页 |
| 参考文献 | 第73-82页 |
| 致谢 | 第82页 |
