中文摘要 | 第4-7页 |
abstract | 第7-9页 |
前言 | 第13-16页 |
1.研究背景 | 第13-14页 |
2.研究目的 | 第14页 |
3.研究方法 | 第14页 |
4.研究意义 | 第14页 |
5.预期结果 | 第14-15页 |
附:技术路线 | 第15-16页 |
第一章 文献综述 | 第16-25页 |
第一节 家蚕丝蛋白的研究进展 | 第16-20页 |
1.家蚕丝腺的结构和功能 | 第16-17页 |
2.丝蛋白的研究现状 | 第17-18页 |
3.TiO_2 NPs对家蚕丝蛋白合成的影响 | 第18-20页 |
第二节 PI3K/AKT信号通路的研究进展 | 第20-24页 |
1.PI3K/AKT信号通路的概述 | 第20-22页 |
2.家蚕PI3K/AKT信号通路的相关研究 | 第22-24页 |
第三节 总结与展望 | 第24-25页 |
第二章 家蚕后部丝腺差异表达基因分析 | 第25-40页 |
第一节 前言 | 第25页 |
第二节 材料与方法 | 第25-30页 |
1.实验昆虫 | 第25页 |
2.TiO_2 NPs的制备及添食 | 第25-26页 |
3.家蚕饲养及取材 | 第26页 |
4.总RNA抽提 | 第26页 |
5.RNA纯化 | 第26-27页 |
6.反转录 | 第27-28页 |
7.内参基因检验cDNA质量 | 第28页 |
8.Digital gene expression(DGE)测序 | 第28-29页 |
9.引物设计 | 第29-30页 |
10.实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测mRNA表达 | 第30页 |
第三节 实验结果 | 第30-37页 |
1.DGE文库的整体分析 | 第30-33页 |
2.标签映射的分析 | 第33-34页 |
3.差异表达基因的鉴定 | 第34-35页 |
4.Gene Ontology功能显著性富集和KEGGPathway显著性富集分析 | 第35-36页 |
5.QRT-PCR验证差异表达的基因 | 第36-37页 |
第四节 讨论 | 第37-39页 |
第五节 小结 | 第39-40页 |
第三章 TiO_2 NPs对家蚕丝腺AKT/TOR信号通路的影响 | 第40-55页 |
第一节 前言 | 第40页 |
第二节 材料与方法 | 第40-46页 |
1.实验昆虫 | 第40页 |
2.TiO_2 NPs的制备及添食 | 第40页 |
3.家蚕饲养及取材 | 第40-41页 |
4.总RNA抽提 | 第41页 |
5.RNA纯化 | 第41页 |
6.反转录 | 第41页 |
7.内参基因检验cDNA质量 | 第41页 |
8.引物设计 | 第41-42页 |
9.qRT-PCR检测mRNA表达 | 第42页 |
10.Westernblot检测蛋白表达 | 第42-46页 |
第三节 实验结果 | 第46-53页 |
1.外源物质处理对Akt/Tor信号通路相关基因的mRNA表达的影响 | 第46-49页 |
2.外源物质对Akt/Tor信号通路蛋白表达水平的影响 | 第49-52页 |
3.Akt/Tor信号通路对丝蛋白基因表达的影响 | 第52-53页 |
第四节 讨论 | 第53-54页 |
第五节 小结 | 第54-55页 |
第四章 丝蛋白合成转录因子对丝蛋白合成的调控 | 第55-62页 |
第一节 前言 | 第55页 |
第二节 材料与方法 | 第55-57页 |
1.实验昆虫 | 第55页 |
2.TiO_2 NPs的制备及添食 | 第55页 |
3.家蚕饲养及取材 | 第55-56页 |
4.总RNA抽提 | 第56页 |
5.RNA纯化 | 第56页 |
6.反转录 | 第56页 |
7.内参基因检验cDNA质量 | 第56页 |
8.引物设计 | 第56-57页 |
9.qRT-PCR检测mRNA表达 | 第57页 |
10.Westernblot检测蛋白表达 | 第57页 |
11.丝腺中总蛋白含量的测定 | 第57页 |
第三节 实验结果 | 第57-60页 |
1.LY294002处理对家蚕丝蛋白相关基因的影响 | 第57-58页 |
2.雷帕霉素处理对家蚕丝蛋白相关基因的影响 | 第58-59页 |
3.LY294002和雷帕霉素处理对家蚕丝蛋白相关蛋白的影响 | 第59页 |
4.LY294002和雷帕霉素处理对家蚕后部丝腺蛋白含量的影响 | 第59-60页 |
第四节 讨论 | 第60-61页 |
第五节 小结 | 第61-62页 |
总结 | 第62-63页 |
参考文献 | 第63-75页 |
攻读学位期间公开发表的论文 | 第75-77页 |
致谢 | 第77-78页 |