| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 缩写表 | 第8-12页 |
| 1 文献综述 | 第12-18页 |
| 1.1 HIV及HIV疫苗 | 第12-13页 |
| 1.2 抗体的作用 | 第13-15页 |
| 1.3 单克隆抗体的筛选方法 | 第15-18页 |
| 2 HIV-1感染者血浆中和活性的检测 | 第18-21页 |
| 2.1 材料 | 第18-19页 |
| 2.1.1 血样 | 第18页 |
| 2.1.2 细胞 | 第18页 |
| 2.1.3 假病毒 | 第18-19页 |
| 2.1.4 试剂配制 | 第19页 |
| 2.1.5 其他材料 | 第19页 |
| 2.1.6 主要仪器 | 第19页 |
| 2.2 方法 | 第19-21页 |
| 2.2.1 HIV-1 env假病毒的包装和病毒滴度测定 | 第19-20页 |
| 2.2.2 感染者血浆中和活性的检测 | 第20-21页 |
| 2.3 结果与分析 | 第21页 |
| 3 PBMC的分离和记忆性B细胞的分选、活化培养 | 第21-24页 |
| 3.1 材料 | 第21-22页 |
| 3.1.1 主要材料 | 第21-22页 |
| 3.1.2 主要仪器 | 第22页 |
| 3.2 方法 | 第22-23页 |
| 3.2.1 血样PBMC的分离和记忆性B细胞的分选 | 第22-23页 |
| 3.2.2 记忆性B细胞的活化培养 | 第23页 |
| 3.3 结果与分析 | 第23-24页 |
| 3.3.1 刺激培养后Bmem形态变化 | 第23-24页 |
| 4 ENV阳性孔的筛选和抗体轻链类型的确定 | 第24-28页 |
| 4.1 材料 | 第24-25页 |
| 4.1.1 主要材料 | 第24页 |
| 4.1.2 试剂配制 | 第24-25页 |
| 4.1.3 主要仪器 | 第25页 |
| 4.2 方法 | 第25-26页 |
| 4.2.1 Env阳性孔的筛选 | 第25-26页 |
| 4.2.2 抗体轻链类型的确定 | 第26页 |
| 4.3 结果 | 第26-28页 |
| 4.3.1 记忆性B细胞培养上清中Env特异性抗体产生情况 | 第26-28页 |
| 5 抗体可变区基因的扩增、筛选和分析 | 第28-48页 |
| 5.1 材料 | 第28-29页 |
| 5.1.1 主要材料 | 第28-29页 |
| 5.1.2 试剂配制 | 第29页 |
| 5.1.3 主要仪器 | 第29页 |
| 5.2 方法 | 第29-41页 |
| 5.2.1 阳性孔B细胞RNA的提取 | 第29-30页 |
| 5.2.2 抗体重链可变区和轻链可变区基因的扩增 | 第30-33页 |
| 5.2.3 阳性孔细胞抗体基因重链可变区和轻链可变区迷你文库的构建 | 第33-38页 |
| 5.2.4 抗体重链可变区和轻链可变区基因的筛选 | 第38-41页 |
| 5.3 结果 | 第41-48页 |
| 5.3.1 抗体基因可变区的扩增、克隆和筛选结果 | 第41-44页 |
| 5.3.2 阳性抗体基因序列分析 | 第44-47页 |
| 5.3.3 阳性单克隆抗体与Env抗原的结合活性 | 第47-48页 |
| 6 抗体的大量表达和纯化以及活性鉴定 | 第48-54页 |
| 6.1 材料 | 第48-49页 |
| 6.1.1 主要材料 | 第48-49页 |
| 6.1.2 试剂配制 | 第49页 |
| 6.1.3 主要仪器 | 第49页 |
| 6.2 方法 | 第49-53页 |
| 6.2.1 单克隆抗体的大量表达 | 第49-50页 |
| 6.2.2 单克隆抗体的制备和纯化 | 第50-51页 |
| 6.2.3 抗体中和活性的检测 | 第51页 |
| 6.2.4 抗体ADCC活性检测 | 第51-53页 |
| 6.3 结果 | 第53-54页 |
| 6.3.1 单克隆抗体中和活性 | 第53页 |
| 6.3.2 单克隆抗体的ADCC活性 | 第53-54页 |
| 7 讨论 | 第54-56页 |
| 8 结论与展望 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-60页 |
| 致谢 | 第60-62页 |
| 攻读硕士学位期间所取得的成果 | 第62页 |
