致谢 | 第4-7页 |
摘要 | 第7-8页 |
1 文献综述 | 第8-17页 |
1.1 硫氧还蛋白(Tioredoxin,Trx)概述 | 第8-13页 |
1.1.1 硫氧还蛋白的研究概况 | 第8页 |
1.1.2 硫氧还蛋白分类以及在生物体内的分布 | 第8-9页 |
1.1.3 硫氧还蛋白的结构特点和作用机制 | 第9-10页 |
1.1.4 Trx的生物学活性 | 第10-11页 |
1.1.5 Trx与人类疾病 | 第11-13页 |
1.1.6 昆虫硫氧还蛋白的研究 | 第13页 |
1.2 保幼激素、蜕皮激素的研究 | 第13-17页 |
1.2.1 昆虫激素的分类 | 第13页 |
1.2.2 保幼激素的生物学特性 | 第13-15页 |
1.2.3 蜕皮激素的生物学特性 | 第15-16页 |
1.2.4 昆虫激素类似物的应用 | 第16-17页 |
2 引言 | 第17-18页 |
3 材料与方法 | 第18-28页 |
3.1 供试材料 | 第18-19页 |
3.1.1 供试昆虫 | 第18页 |
3.1.2 仪器设备 | 第18页 |
3.1.3 试验试剂 | 第18页 |
3.1.4 试验中所用的主要溶液及培养基的制备 | 第18-19页 |
3.2 试验方法 | 第19-27页 |
3.2.1 亚洲玉米螟Trx基因的克隆 | 第19-22页 |
3.2.1.1 亚洲玉米螟总RNA提取 | 第19页 |
3.2.1.2 反转录 | 第19-20页 |
3.2.1.3 引物设计与合成 | 第20页 |
3.2.1.4 c DNA片段的PCR扩增 | 第20页 |
3.2.1.5 PCR产物的纯化 | 第20-21页 |
3.2.1.6 PCR纯化产物与克隆载体的连接 | 第21页 |
3.2.1.7 制备感受态细胞及转化质粒 | 第21-22页 |
3.2.1.8 质粒DNA提取 | 第22页 |
3.2.1.9 阳性克隆的筛选 | 第22页 |
3.2.2 3'-RACE | 第22-23页 |
3.2.2.1 3'-RACE-Ready c DNA的合成 | 第22-23页 |
3.2.2.2 3'-RACE c DNA的巣式PCR、克隆及测序 | 第23页 |
3.2.3 亚洲玉米螟TRX氨基酸序列比对及进化树构建 | 第23页 |
3.2.4 亚洲玉米螟Trx基因的时空表达分析 | 第23页 |
3.2.5 逆境处理对Ofur Trx基因转录水平的影响 | 第23-25页 |
3.2.5.1 逆境处理 | 第23-24页 |
3.2.5.2 反转录与Real Time PCR反应 | 第24页 |
3.2.5.3 引物设计与合成 | 第24页 |
3.2.5.4 实时荧光定量PCR | 第24-25页 |
3.2.6 保幼激素和蜕皮激素处理 | 第25页 |
3.2.7 体外转录合成蜕皮激素受体ECR、USP基因ds RNA | 第25-27页 |
3.2.7.1 ds RNA的合成 | 第25-26页 |
3.2.7.2 ds RNA注射 | 第26-27页 |
3.3 数据分析 | 第27-28页 |
4 结果与分析 | 第28-39页 |
4.1 Ofur Trx基因c DNA片段序列分析 | 第28-29页 |
4.2 Ofur Trx基因在亚洲玉米螟中的时空表达 | 第29-30页 |
4.3 逆境处理对Ofur Trx基因转录水平的影响 | 第30-35页 |
4.3.1 高温处理对Ofur Trx转录水平的影响 | 第30-31页 |
4.3.2 低温处理对Ofur Trx转录水平的影响 | 第31-32页 |
4.3.3 饥饿处理对Ofur Trx转录水平的影响 | 第32-33页 |
4.3.4 紫外线照射处理对Ofur Trx转录水平的影响 | 第33-34页 |
4.3.5 机械损伤处理对Ofur Trx转录水平的影响 | 第34页 |
4.3.6 双氧水处理对Ofur Trx转录水平的影响 | 第34-35页 |
4.4 注射激素对Ofur Trx基因转录水平的影响 | 第35-36页 |
4.4.1 注射保幼激素对Ofur Trx转录水平的影响 | 第35页 |
4.4.2 注射蜕皮激素对Ofur Trx转录水平的影响 | 第35-36页 |
4.5 蜕皮激素受体缺失对亚洲玉米螟Ofur Trx基因表达的影响 | 第36-39页 |
4.5.1 RNA干涉对usp和ecr表达的影响 | 第36-37页 |
4.5.2 蜕皮激素受体干涉对Ofur Trx表达的影响 | 第37-39页 |
5 结论与讨论 | 第39-43页 |
5.1 结论 | 第39页 |
5.2 讨论 | 第39-43页 |
参考文献 (References) | 第43-52页 |
ABSTRACT | 第52-53页 |
附录:硕士期间发表的论文 | 第54页 |