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亚洲玉米螟硫氧还蛋白基因的分子鉴定

致谢第4-7页
摘要第7-8页
1 文献综述第8-17页
    1.1 硫氧还蛋白(Tioredoxin,Trx)概述第8-13页
        1.1.1 硫氧还蛋白的研究概况第8页
        1.1.2 硫氧还蛋白分类以及在生物体内的分布第8-9页
        1.1.3 硫氧还蛋白的结构特点和作用机制第9-10页
        1.1.4 Trx的生物学活性第10-11页
        1.1.5 Trx与人类疾病第11-13页
        1.1.6 昆虫硫氧还蛋白的研究第13页
    1.2 保幼激素、蜕皮激素的研究第13-17页
        1.2.1 昆虫激素的分类第13页
        1.2.2 保幼激素的生物学特性第13-15页
        1.2.3 蜕皮激素的生物学特性第15-16页
        1.2.4 昆虫激素类似物的应用第16-17页
2 引言第17-18页
3 材料与方法第18-28页
    3.1 供试材料第18-19页
        3.1.1 供试昆虫第18页
        3.1.2 仪器设备第18页
        3.1.3 试验试剂第18页
        3.1.4 试验中所用的主要溶液及培养基的制备第18-19页
    3.2 试验方法第19-27页
        3.2.1 亚洲玉米螟Trx基因的克隆第19-22页
            3.2.1.1 亚洲玉米螟总RNA提取第19页
            3.2.1.2 反转录第19-20页
            3.2.1.3 引物设计与合成第20页
            3.2.1.4 c DNA片段的PCR扩增第20页
            3.2.1.5 PCR产物的纯化第20-21页
            3.2.1.6 PCR纯化产物与克隆载体的连接第21页
            3.2.1.7 制备感受态细胞及转化质粒第21-22页
            3.2.1.8 质粒DNA提取第22页
            3.2.1.9 阳性克隆的筛选第22页
        3.2.2 3'-RACE第22-23页
            3.2.2.1 3'-RACE-Ready c DNA的合成第22-23页
            3.2.2.2 3'-RACE c DNA的巣式PCR、克隆及测序第23页
        3.2.3 亚洲玉米螟TRX氨基酸序列比对及进化树构建第23页
        3.2.4 亚洲玉米螟Trx基因的时空表达分析第23页
        3.2.5 逆境处理对Ofur Trx基因转录水平的影响第23-25页
            3.2.5.1 逆境处理第23-24页
            3.2.5.2 反转录与Real Time PCR反应第24页
            3.2.5.3 引物设计与合成第24页
            3.2.5.4 实时荧光定量PCR第24-25页
        3.2.6 保幼激素和蜕皮激素处理第25页
        3.2.7 体外转录合成蜕皮激素受体ECR、USP基因ds RNA第25-27页
            3.2.7.1 ds RNA的合成第25-26页
            3.2.7.2 ds RNA注射第26-27页
    3.3 数据分析第27-28页
4 结果与分析第28-39页
    4.1 Ofur Trx基因c DNA片段序列分析第28-29页
    4.2 Ofur Trx基因在亚洲玉米螟中的时空表达第29-30页
    4.3 逆境处理对Ofur Trx基因转录水平的影响第30-35页
        4.3.1 高温处理对Ofur Trx转录水平的影响第30-31页
        4.3.2 低温处理对Ofur Trx转录水平的影响第31-32页
        4.3.3 饥饿处理对Ofur Trx转录水平的影响第32-33页
        4.3.4 紫外线照射处理对Ofur Trx转录水平的影响第33-34页
        4.3.5 机械损伤处理对Ofur Trx转录水平的影响第34页
        4.3.6 双氧水处理对Ofur Trx转录水平的影响第34-35页
    4.4 注射激素对Ofur Trx基因转录水平的影响第35-36页
        4.4.1 注射保幼激素对Ofur Trx转录水平的影响第35页
        4.4.2 注射蜕皮激素对Ofur Trx转录水平的影响第35-36页
    4.5 蜕皮激素受体缺失对亚洲玉米螟Ofur Trx基因表达的影响第36-39页
        4.5.1 RNA干涉对usp和ecr表达的影响第36-37页
        4.5.2 蜕皮激素受体干涉对Ofur Trx表达的影响第37-39页
5 结论与讨论第39-43页
    5.1 结论第39页
    5.2 讨论第39-43页
参考文献 (References)第43-52页
ABSTRACT第52-53页
附录:硕士期间发表的论文第54页

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