| 中文摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 英文缩略词表 | 第14-15页 |
| 引言 | 第15-17页 |
| 第一章 文献综述 布鲁氏菌的致病机制及免疫生物学研究进展 | 第17-30页 |
| 1 布鲁氏菌的致病机制的研究进展 | 第17-20页 |
| 1.1 布鲁氏菌的主要毒力因子 | 第17-19页 |
| 1.1.1 布鲁氏菌LPS | 第17-18页 |
| 1.1.2 布鲁氏菌外膜蛋白 | 第18-19页 |
| 1.1.3 其他毒力因子 | 第19页 |
| 1.2 布鲁氏菌的致病机制 | 第19-20页 |
| 2 布鲁氏菌与宿主免疫的相互作用 | 第20-22页 |
| 2.1 布鲁氏菌调节先天性免疫应答 | 第20-21页 |
| 2.2 布鲁氏菌调节适应性免疫应答 | 第21-22页 |
| 3 树突状细胞在宿主免疫中的作用 | 第22-25页 |
| 3.1 树突状细胞的生物学特性 | 第22-23页 |
| 3.2 树突状细胞的成熟及抗原递呈作用 | 第23-24页 |
| 3.2.1 树突状细胞的成熟 | 第23-24页 |
| 3.2.2 树突状细胞的抗原递呈作用 | 第24页 |
| 3.3 树突状细胞在宿主免疫中的作用 | 第24-25页 |
| 4 布鲁氏菌与树突状细胞免疫的相互作用 | 第25-26页 |
| 5 布鲁氏菌疫苗的研究现状 | 第26-30页 |
| 5.1 传统型商业疫苗 | 第27页 |
| 5.2 布鲁氏菌转基因突变株 | 第27-28页 |
| 5.3 灭活疫苗 | 第28-30页 |
| 第二章 试验研究 | 第30-70页 |
| 试验一布鲁氏菌外膜蛋白对BMDCs成熟及抗原递呈的影响 | 第30-52页 |
| 1 材料与方法 | 第31-40页 |
| 1.1 材料 | 第31页 |
| 1.1.1 试验动物 | 第31页 |
| 1.1.2 菌株及血清 | 第31页 |
| 1.1.3 仪器 | 第31页 |
| 1.1.4 试剂 | 第31页 |
| 1.2 方法 | 第31-40页 |
| 1.2.1 试验所需溶液的配制 | 第31-32页 |
| 1.2.2 小鼠骨髓源性树突状细胞的制备和鉴定 | 第32-34页 |
| 1.2.3 布鲁氏菌外膜蛋白的表达、纯化及鉴定 | 第34-37页 |
| 1.2.4 布鲁氏菌LPS的提取 | 第37页 |
| 1.2.5 布鲁氏菌外膜蛋白对小鼠BMDCs成熟度的影响 | 第37-39页 |
| 1.2.6 布鲁氏菌外膜蛋白对小鼠BMDCs抗原递呈的影响 | 第39-40页 |
| 2 结果 | 第40-50页 |
| 2.1 小鼠骨髓源树突状细胞的鉴定 | 第40-42页 |
| 2.1.1 小鼠BMDCs形态的鉴定 | 第40-41页 |
| 2.1.2 小鼠BMDCs细胞表型的鉴定 | 第41-42页 |
| 2.2 SDS-PAGE检测布鲁氏菌外膜蛋白的表达及纯化情况 | 第42-43页 |
| 2.3 布鲁氏菌外膜蛋白刺激对BMDCs细胞表型的影响 | 第43-45页 |
| 2.4 布鲁氏菌外膜蛋白刺激对BMDCs表面MHC-I、MHC-II表达情况的影响 | 第45-46页 |
| 2.5 布鲁氏菌外膜蛋白刺激对BMDCs细胞因子分泌的影响 | 第46-48页 |
| 2.6 布鲁氏菌外膜蛋白刺激BMDCs对TLRsmRNA转录水平的影响 | 第48-49页 |
| 2.7 布鲁氏菌外膜蛋白刺激对BMDCs引发同种异体小鼠脾脏T细胞增殖的影响 | 第49-50页 |
| 3 讨论 | 第50-51页 |
| 3.1 布鲁氏菌外膜蛋白OMP10,OMP19,BP26刺激BMDCs诱导细胞表面共刺激分子和MHC分子的表达 | 第50页 |
| 3.2 布鲁氏菌外膜蛋白OMP10,OMP19,BP26刺激BMDCs诱导炎性细胞因子的分泌 | 第50-51页 |
| 3.3 TLRs介导的信号通路参与布鲁氏菌外膜蛋白对BMDCs成熟度及抗原提呈效率的调节 | 第51页 |
| 3.4 布鲁氏菌外膜蛋白刺激BMDCs诱导其激活T淋巴细胞增殖的能力 | 第51页 |
| 4.小结 | 第51-52页 |
| 试验二 布鲁氏菌主要外膜蛋白缺失株对小鼠BMDCs成熟度及抗原递呈的影响 | 第52-63页 |
| 1 材料与方法 | 第53-54页 |
| 1.1 材料 | 第53页 |
| 1.1.1 试验动物 | 第53页 |
| 1.1.2 菌株 | 第53页 |
| 1.1.3 仪器 | 第53页 |
| 1.1.4 试剂 | 第53页 |
| 1.2 方法 | 第53-54页 |
| 1.2.1 布鲁氏菌外膜蛋白缺失株,疫苗株及亲本株的培养 | 第53页 |
| 1.2.2 布鲁氏菌外膜蛋白缺失株的鉴定 | 第53-54页 |
| 1.2.3 布鲁氏菌外膜蛋白基因缺失株侵染小鼠BMDCs | 第54页 |
| 1.2.4 流式细胞术检测布鲁氏菌侵染对小鼠BMDCs细胞表型的影响 | 第54页 |
| 1.2.5 ELISA检测BMDCs细胞上清液中细胞因子的分泌情况 | 第54页 |
| 1.2.6 RT-PCR检测BMDCs中TLRsmRNA的转录水平 | 第54页 |
| 1.2.7 同种混合淋巴细胞反应(MTT法) | 第54页 |
| 2 结果 | 第54-60页 |
| 2.1 布鲁氏菌外膜蛋白缺失株的鉴定 | 第54-55页 |
| 2.2 布鲁氏菌外膜蛋白缺失株侵染对BMDCs表型的影响 | 第55-58页 |
| 2.3 布鲁氏菌外膜蛋白缺失株对BMDCs细胞因子分泌的影响 | 第58-59页 |
| 2.4 布鲁氏菌外膜蛋白缺失株对BMDCs中TLRsmRNA转录水平的影响 | 第59页 |
| 2.5 布鲁氏菌外膜蛋白缺失株对BMDCs刺激T细胞增殖能力的影响 | 第59-60页 |
| 3 讨论 | 第60-62页 |
| 3.1 布鲁氏菌外膜蛋白缺失株和疫苗株RB51侵染诱导小鼠BMDCs表面共刺激分子和MHC分子的表达 | 第60-61页 |
| 3.2 布鲁氏菌外膜蛋白缺失株和疫苗株RB51侵染小鼠BMDCs诱导其炎性细胞因子的分泌增加 | 第61页 |
| 3.3 TLRs介导的信号通路参与布鲁氏菌侵染对BMDCs成熟及抗原递呈的调控.. | 第61页 |
| 3.4 布鲁氏菌外膜蛋白缺失株和疫苗株RB51的侵染可以显著诱导BMDCs刺激T细胞增殖的能力 | 第61-62页 |
| 4.小结 | 第62-63页 |
| 试验三布鲁氏菌外膜蛋白缺失株对小鼠BMDCs凋亡的影响 | 第63-70页 |
| 1 材料与方法 | 第63-65页 |
| 1.1 材料 | 第63-64页 |
| 1.1.1 菌株和细胞 | 第63-64页 |
| 1.1.2 主要试剂 | 第64页 |
| 1.1.3 主要仪器 | 第64页 |
| 1.2 方法 | 第64-65页 |
| 1.2.1 BMDCs的分离及培养 | 第64页 |
| 1.2.2 布鲁氏菌外膜蛋白缺失株的培养 | 第64页 |
| 1.2.3 布鲁氏菌外膜蛋白缺失株侵染小鼠BMDCs | 第64页 |
| 1.2.4 流式细胞术检测布鲁氏菌外膜蛋白缺失株侵染对BMDCs凋亡的影响 | 第64页 |
| 1.2.5 CFU计数检测布鲁氏菌外膜蛋白缺失株侵染BMDCs的胞内生存情况. | 第64-65页 |
| 2 结果 | 第65-68页 |
| 2.1 布鲁氏菌外膜蛋白缺失株侵染对BMDCs凋亡的影响 | 第65-67页 |
| 2.2 BMDCs中布鲁氏菌外膜蛋白缺失株的胞内生存和复制情况 | 第67-68页 |
| 3 讨论 | 第68-69页 |
| 3.1 布鲁氏菌侵染小鼠BMDCs显著诱导细胞凋亡,亲本株2308诱导更高水平的细胞凋亡 | 第68-69页 |
| 3.2 布鲁氏菌外膜蛋白缺失株和疫苗株RB51侵染小鼠BMDCs诱导较低水平的细胞内生存和复制 | 第69页 |
| 4 小结 | 第69-70页 |
| 第三章 结论 | 第70-71页 |
| 第四章 论文创新点 | 第71-72页 |
| 参考文献 | 第72-85页 |
| 致谢 | 第85-86页 |
| 作者简介 | 第86-87页 |
| 附件 | 第87页 |
