提要 | 第4-5页 |
中文摘要 | 第5-9页 |
ABSTRACT | 第9-11页 |
英文缩略词 | 第15-16页 |
第1章 文献综述 | 第16-26页 |
1.1 Activin | 第16-19页 |
1.1.1 Activin分子特征 | 第16-17页 |
1.1.2 Activin受体 | 第17-18页 |
1.1.3 Activin的临床意义 | 第18-19页 |
1.2 Activin信号传导 | 第19-22页 |
1.2.1 Activin受体相互作用蛋白 | 第19-20页 |
1.2.2 Activin的信号通路 | 第20-22页 |
1.3 ActivinA的生物学作用 | 第22-23页 |
1.3.1 ActivinA在神经系统中的生物学作用 | 第22页 |
1.3.2 ActivinA抑制肿瘤细胞增殖 | 第22-23页 |
1.4 本课题的研究目的、内容与特色 | 第23-26页 |
1.4.1 研究内容 | 第23-24页 |
1.4.2 本课题的研究创新与特色 | 第24-26页 |
第2章 材料与方法 | 第26-38页 |
2.1 实验材料 | 第26-27页 |
2.1.1 细胞系 | 第26页 |
2.1.2 实验试剂 | 第26-27页 |
2.2 主要试剂的配制 | 第27-29页 |
2.2.1 磷酸盐缓冲液1xPBS的配制 | 第27页 |
2.2.2 胰蛋白酶消化液的配制 | 第27页 |
2.2.3 MTT溶液的配制 | 第27页 |
2.2.4 Hoechst33342溶液的配制 | 第27页 |
2.2.5 LB培养基的制备 | 第27-28页 |
2.2.6 电泳缓冲液(TAE)的配制 | 第28页 |
2.2.7 溴乙锭的配制 | 第28-29页 |
2.3 实验设备 | 第29页 |
2.4 实验方法 | 第29-36页 |
2.4.1 ARIP1和ARIP2以及Smad3体外转染Neuro-2a细胞 | 第29-30页 |
2.4.2 RT-PCR方法 | 第30-32页 |
2.4.2.1 RNA的提取 | 第30页 |
2.4.2.2 逆转录 | 第30-31页 |
2.4.2.3 PCR | 第31-32页 |
2.4.3 细胞活力和增殖实验 | 第32-33页 |
2.4.3.1 MTT实验 | 第32页 |
2.4.3.2 BrdU实验 | 第32-33页 |
2.4.4 流式细胞术 | 第33页 |
2.4.5 细胞形态学分析 | 第33-34页 |
2.4.5.1 Giemsa染色 | 第33-34页 |
2.4.5.2 Hoechst染色 | 第34页 |
2.4.6 ELISA方法 | 第34-35页 |
2.4.6.1 ELISA法检测细胞上清ActivinA水平 | 第34-35页 |
2.4.6.2 神经递质5-HT检测 | 第35页 |
2.4.7 划痕实验 | 第35-36页 |
2.5 统计学分析 | 第36-38页 |
第3章 实验结果 | 第38-54页 |
3.1 Neuro-2a细胞自分泌ActivinA | 第38-39页 |
3.2 ActivinA对Neuro-2a细胞生物学活性的影响 | 第39-48页 |
3.2.1 Activin受体在Neuro-2a细胞中表达 | 第39页 |
3.2.2 ActivinA抑制Neuro-2a细胞增殖 | 第39-41页 |
3.2.3 ActivinA处理的Neuro-2a细胞核形态学变化 | 第41-43页 |
3.2.4 ActivinA对Neuro-2a细胞凋亡的影响 | 第43-44页 |
3.2.5 ActivinA对Neuro-2a细胞形态学的影响 | 第44-45页 |
3.2.6 ActivinA对Neuro-2a细胞分泌5-HT的影响 | 第45-46页 |
3.2.7 ActivinA对Neuro-2a细胞迁移能力的影响 | 第46-48页 |
3.3 ActivinA对Neuro-2a细胞Activin受体和信号分子表达的影响 | 第48-49页 |
3.4 过表达ARIP1,2和Smad3对Neuro-2a细胞生物学功能的影响 | 第49-54页 |
3.4.1 Neuro-2a细胞瞬时转染ARIP1,2与Smad3质粒 | 第49-51页 |
3.4.2 过表达Smad3和ARIP1,2对Neuro-2a细胞活力影响 | 第51-53页 |
3.4.3 过表达ARIP1,2对Neuro-2a细胞增殖的影响 | 第53-54页 |
第4章 讨论 | 第54-58页 |
4.1 ActivinA抑制Neuro-2a细胞增殖 | 第54-56页 |
4.2 过表达Smad3、ARIP1与ARIP2对Neuro-2a细胞增殖的影响 | 第56-58页 |
第5章 结论 | 第58-60页 |
参考文献 | 第60-66页 |
作者简介及科研成果 | 第66-68页 |
致谢 | 第68-69页 |