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激活素A对Neuro-2a细胞增殖抑制作用及其机制

提要第4-5页
中文摘要第5-9页
ABSTRACT第9-11页
英文缩略词第15-16页
第1章 文献综述第16-26页
    1.1 Activin第16-19页
        1.1.1 Activin分子特征第16-17页
        1.1.2 Activin受体第17-18页
        1.1.3 Activin的临床意义第18-19页
    1.2 Activin信号传导第19-22页
        1.2.1 Activin受体相互作用蛋白第19-20页
        1.2.2 Activin的信号通路第20-22页
    1.3 ActivinA的生物学作用第22-23页
        1.3.1 ActivinA在神经系统中的生物学作用第22页
        1.3.2 ActivinA抑制肿瘤细胞增殖第22-23页
    1.4 本课题的研究目的、内容与特色第23-26页
        1.4.1 研究内容第23-24页
        1.4.2 本课题的研究创新与特色第24-26页
第2章 材料与方法第26-38页
    2.1 实验材料第26-27页
        2.1.1 细胞系第26页
        2.1.2 实验试剂第26-27页
    2.2 主要试剂的配制第27-29页
        2.2.1 磷酸盐缓冲液1xPBS的配制第27页
        2.2.2 胰蛋白酶消化液的配制第27页
        2.2.3 MTT溶液的配制第27页
        2.2.4 Hoechst33342溶液的配制第27页
        2.2.5 LB培养基的制备第27-28页
        2.2.6 电泳缓冲液(TAE)的配制第28页
        2.2.7 溴乙锭的配制第28-29页
    2.3 实验设备第29页
    2.4 实验方法第29-36页
        2.4.1 ARIP1和ARIP2以及Smad3体外转染Neuro-2a细胞第29-30页
        2.4.2 RT-PCR方法第30-32页
            2.4.2.1 RNA的提取第30页
            2.4.2.2 逆转录第30-31页
            2.4.2.3 PCR第31-32页
        2.4.3 细胞活力和增殖实验第32-33页
            2.4.3.1 MTT实验第32页
            2.4.3.2 BrdU实验第32-33页
        2.4.4 流式细胞术第33页
        2.4.5 细胞形态学分析第33-34页
            2.4.5.1 Giemsa染色第33-34页
            2.4.5.2 Hoechst染色第34页
        2.4.6 ELISA方法第34-35页
            2.4.6.1 ELISA法检测细胞上清ActivinA水平第34-35页
            2.4.6.2 神经递质5-HT检测第35页
        2.4.7 划痕实验第35-36页
    2.5 统计学分析第36-38页
第3章 实验结果第38-54页
    3.1 Neuro-2a细胞自分泌ActivinA第38-39页
    3.2 ActivinA对Neuro-2a细胞生物学活性的影响第39-48页
        3.2.1 Activin受体在Neuro-2a细胞中表达第39页
        3.2.2 ActivinA抑制Neuro-2a细胞增殖第39-41页
        3.2.3 ActivinA处理的Neuro-2a细胞核形态学变化第41-43页
        3.2.4 ActivinA对Neuro-2a细胞凋亡的影响第43-44页
        3.2.5 ActivinA对Neuro-2a细胞形态学的影响第44-45页
        3.2.6 ActivinA对Neuro-2a细胞分泌5-HT的影响第45-46页
        3.2.7 ActivinA对Neuro-2a细胞迁移能力的影响第46-48页
    3.3 ActivinA对Neuro-2a细胞Activin受体和信号分子表达的影响第48-49页
    3.4 过表达ARIP1,2和Smad3对Neuro-2a细胞生物学功能的影响第49-54页
        3.4.1 Neuro-2a细胞瞬时转染ARIP1,2与Smad3质粒第49-51页
        3.4.2 过表达Smad3和ARIP1,2对Neuro-2a细胞活力影响第51-53页
        3.4.3 过表达ARIP1,2对Neuro-2a细胞增殖的影响第53-54页
第4章 讨论第54-58页
    4.1 ActivinA抑制Neuro-2a细胞增殖第54-56页
    4.2 过表达Smad3、ARIP1与ARIP2对Neuro-2a细胞增殖的影响第56-58页
第5章 结论第58-60页
参考文献第60-66页
作者简介及科研成果第66-68页
致谢第68-69页

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