中文摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
主要英文缩略词表 | 第10-11页 |
一、前言 | 第11-14页 |
1.1 脊髓损伤 | 第11页 |
1.2 星型胶质细胞 | 第11-12页 |
1.3 脑红蛋白 | 第12-14页 |
二、材料与方法 | 第14-26页 |
2.1 材料 | 第14-18页 |
2.1.1 主要仪器设备 | 第14-15页 |
2.1.2 实验动物及细胞 | 第15页 |
2.1.3 主要试剂及其配制 | 第15-18页 |
2.2 方法 | 第18-22页 |
2.2.1 脊髓损伤模型建立 | 第18页 |
2.2.2 脊髓损伤组织灌注及取材 | 第18页 |
2.2.3 HE染色 | 第18-19页 |
2.2.4 脊髓损伤冰冻切片制作及免疫荧光染色 | 第19页 |
2.2.5 大鼠脊髓星型胶质细胞取材及鉴定 | 第19-20页 |
2.2.6 星型胶质细胞传代、换液与种板 | 第20页 |
2.2.7 星型胶质细胞爬片制作及GFAP、Ngb免疫荧光染色 | 第20-21页 |
2.2.7.1 细胞爬片制作 | 第20-21页 |
2.2.7.2 细胞爬片免疫荧光染色 | 第21页 |
2.2.8 不同剂量过氧化氢处理对星型胶质细胞活力的影响 | 第21页 |
2.2.9 AnnexinV/PI染色检测细胞凋亡情况 | 第21-22页 |
2.3 | 第22-26页 |
2.3.1 过氧化氢细胞毒性检测 | 第22页 |
2.3.2 流式细胞术检测星型胶质细胞内ROS生成情况 | 第22页 |
2.3.3 qRT-PCR检测Ngb、SOD_2、GFAP、CATmRNA表达 | 第22-25页 |
2.3.3.1 Trizol法提取总RNA | 第22-23页 |
2.3.3.2 逆转录反应 | 第23-24页 |
2.3.3.3 实时荧光定量PCR反应(qRT-PCR) | 第24-25页 |
2.3.4 统计学分析 | 第25-26页 |
三、结果 | 第26-36页 |
3.1 脊髓损伤形态学改变 | 第26页 |
3.2 脊髓损伤HE染色变化 | 第26-27页 |
3.3 脊髓损伤促进星型胶质细胞Ngb表达 | 第27-28页 |
3.4 大鼠脊髓星型胶质细胞纯度鉴定及GFAP与Ngb共表达情况 | 第28-29页 |
3.5 过氧化氢处理降低星型胶质细胞活力 | 第29-30页 |
3.6 过氧化氢促进星型胶质细胞释放LDH | 第30页 |
3.7 过氧化氢诱导星型胶质细胞发生凋亡 | 第30-32页 |
3.8 过氧化氢诱导星型胶质细胞生成ROS | 第32-34页 |
3.9 过氧化氢诱导Ngb、SOD_2、GFAP、CATmRNA表达 | 第34-36页 |
四、讨论 | 第36-39页 |
五、结论 | 第39-40页 |
六、参考文献 | 第40-44页 |
七、文献综述 | 第44-54页 |
参考文献 | 第50-54页 |
八、附录 | 第54-55页 |
致谢 | 第55页 |