| 摘要 | 第3-4页 |
| abstract | 第4页 |
| 缩略语表 | 第8-9页 |
| 1 前言 | 第9-21页 |
| 1.1 猪细小病毒病概述 | 第9页 |
| 1.2 猪细小病毒 | 第9-18页 |
| 1.2.1 形态结构 | 第9-10页 |
| 1.2.2 理化特性 | 第10页 |
| 1.2.3 培养特性 | 第10页 |
| 1.2.4 PPV的毒株分型 | 第10-11页 |
| 1.2.5 PPV的基因组结构 | 第11-12页 |
| 1.2.6 流行病学 | 第12-13页 |
| 1.2.7 临床症状 | 第13页 |
| 1.2.8 PPI的诊断 | 第13-16页 |
| 1.2.9 PPV的预防 | 第16-18页 |
| 1.3 PPI流行现状 | 第18页 |
| 1.4 病毒样颗粒概述 | 第18-20页 |
| 1.4.1 病毒样颗粒 | 第18-19页 |
| 1.4.2 病毒样颗粒疫苗的表达系统 | 第19-20页 |
| 1.5 本研究的目的和意义 | 第20-21页 |
| 2 材料与方法 | 第21-28页 |
| 2.1 材料 | 第21-22页 |
| 2.1.1 病毒 | 第21页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第21页 |
| 2.1.3 主要仪器与设备 | 第21页 |
| 2.1.4 试验所用溶液的配制 | 第21-22页 |
| 2.2 PPV基因组序列的测定 | 第22-26页 |
| 2.2.1 引物设计合成 | 第22-23页 |
| 2.2.2 PCR扩增 | 第23页 |
| 2.2.3 琼脂糖凝胶电泳 | 第23页 |
| 2.2.4 PCR产物的纯化 | 第23-24页 |
| 2.2.5 目的片段与pEASY-Blunt载体连接转化 | 第24页 |
| 2.2.6 阳性克隆菌的筛选 | 第24-25页 |
| 2.2.7 重组质粒DNA的提取 | 第25页 |
| 2.2.8 重组阳性质粒PCR鉴定 | 第25页 |
| 2.2.9 重组阳性质粒双酶切鉴定 | 第25-26页 |
| 2.2.10 重组阳性质粒测序鉴定 | 第26页 |
| 2.3 PPVRPBS2501株VP2基因原核表达 | 第26-28页 |
| 2.3.1 PPVVP2全长基因的合成 | 第26页 |
| 2.3.2 重组质粒pET-32a-VP2PCR鉴定 | 第26页 |
| 2.3.3 重组质粒pET-32a-VP2双酶切鉴定 | 第26-27页 |
| 2.3.5 重组VP2基因编码蛋白的原核诱导表达 | 第27页 |
| 2.3.6 SDS-PAGE电泳分析 | 第27-28页 |
| 2.3.7 重组蛋白纯化 | 第28页 |
| 2.3.8 重组蛋白WesternBlot鉴定 | 第28页 |
| 3 结果 | 第28-42页 |
| 3.1 PPV基因组各片段PCR扩增结果 | 第28-29页 |
| 3.2 重组克隆质粒双酶切鉴定结果 | 第29-31页 |
| 3.3 克隆测序及拼接结果 | 第31-34页 |
| 3.4 RPBS2501株核苷酸序列及主要基因核苷酸序列比对分析结果 | 第34-39页 |
| 3.4.1 RPBS2501株核苷酸序列比对分析结果 | 第34-35页 |
| 3.4.2 RPBS2501株NS基因核苷酸序列比对分析结果 | 第35-36页 |
| 3.4.3 RPBS2501株VP2基因核苷酸序列比对分析结果 | 第36-39页 |
| 3.5 VP2重组表达质粒构建结果 | 第39-42页 |
| 3.5.1 重组质粒鉴定结果 | 第39-40页 |
| 3.5.2 重组VP2蛋白SDS-PAGE分析结果 | 第40-41页 |
| 3.5.3 重组VP2蛋白的纯化结果 | 第41页 |
| 3.5.4 WesternBlot检测结果 | 第41-42页 |
| 4 讨论 | 第42页 |
| 5 结论 | 第42-44页 |
| 致谢 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-51页 |
| 作者简介 | 第51页 |
