| 摘要 | 第2-4页 |
| abstract | 第4-5页 |
| 引言 | 第8-9页 |
| 材料与方法 | 第9-21页 |
| 1 实验材料 | 第9-11页 |
| 1.1 细胞株 | 第9页 |
| 1.2 主要试剂耗材 | 第9-10页 |
| 1.3 主要仪器 | 第10-11页 |
| 2 实验方法 | 第11-21页 |
| 2.1 细胞培养 | 第11页 |
| 2.2 细胞转染 | 第11-12页 |
| 2.3 qPCR检测RNA的相对表达量 | 第12-14页 |
| 2.3.1 细胞总RNA提取 | 第12-13页 |
| 2.3.2 RNA反转录 | 第13页 |
| 2.3.3 qPCR检测RNA的相对表达量 | 第13-14页 |
| 2.4 MTT实验检测细胞增殖 | 第14-15页 |
| 2.5 FCM法检测细胞周期 | 第15页 |
| 2.6 DAPI法检测细胞凋亡小体 | 第15页 |
| 2.7 Caspase3/7法检测发光 | 第15-16页 |
| 2.8 FCM法检测细胞凋亡 | 第16页 |
| 2.9 Transwell小室法检测细胞迁移 | 第16页 |
| 2.10 Transwell小室法检测细胞侵袭 | 第16-17页 |
| 2.11 WB法检测蛋白表达量 | 第17-20页 |
| 2.11.1 试剂配置 | 第17页 |
| 2.11.2 总蛋白的提取 | 第17-18页 |
| 2.11.3 聚丙烯酰胺凝胶配制 | 第18-19页 |
| 2.11.4 蛋白印迹实验 | 第19-20页 |
| 2.12 统计分析 | 第20-21页 |
| 结果 | 第21-29页 |
| 1 RRS1基因在BT549和HMEC细胞中的表达量 | 第21页 |
| 2 RRS1-shRNA感染BT549细胞后RRS1基因的表达量 | 第21-23页 |
| 3 MTT检测RRS1敲减后细胞活力明显下降 | 第23页 |
| 4 FCM法检测RRS1基因被干扰后细胞阻滞在G2期 | 第23-24页 |
| 5 RRS1基因沉默后细胞凋亡增强 | 第24-26页 |
| 5.1 DAPI染色法检测RRS1基因敲减后细胞形态改变,凋亡小体数目增多 | 第24-25页 |
| 5.2 RRS1基因敲减后Caspase3/7发光检测增强 | 第25页 |
| 5.3 FCM法检测RRS1基因沉默后细胞凋亡数目明显增多 | 第25-26页 |
| 6 RRS1基因敲减后细胞的迁移与侵袭能力降低 | 第26-27页 |
| 7 蛋白印迹法法检测P53、MDM2、bax、bcl-2蛋白表达量 | 第27-29页 |
| 讨论 | 第29-31页 |
| 结论 | 第31-32页 |
| 参考文献 | 第32-34页 |
| 综述 | 第34-43页 |
| 综述参考文献 | 第40-43页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第43-44页 |
| 缩略词表 | 第44-45页 |
| 致谢 | 第45-46页 |
