| 摘要 | 第3-4页 |
| abstract | 第4-5页 |
| 1 引言 | 第8-14页 |
| 1.1 研究背景 | 第8页 |
| 1.2 几丁质酶 | 第8-10页 |
| 1.2.1 几丁质酶的结构和特性 | 第8-9页 |
| 1.2.2 几丁质酶的表达调控 | 第9页 |
| 1.2.3 几丁质酶的应用 | 第9-10页 |
| 1.3 植物的抗寒性作用下机理 | 第10-11页 |
| 1.3.1 低温对植物的影响 | 第10页 |
| 1.3.2 植物的抗冻性 | 第10-11页 |
| 1.3.3 低温胁迫的指标检测 | 第11页 |
| 1.4 植物的抗病性作用机理 | 第11-12页 |
| 1.4.1 病菌对植物的影响 | 第11页 |
| 1.4.2 植物的抗病性 | 第11-12页 |
| 1.4.3 病菌胁迫的指标检测 | 第12页 |
| 1.5 转录组测序(RNA-Seq)技术的应用 | 第12页 |
| 1.6 研究意义及技术路线 | 第12-14页 |
| 2 实验材料和方法 | 第14-19页 |
| 2.1 实验材料 | 第14页 |
| 2.1.1 植物材料及培养 | 第14页 |
| 2.1.2 实验试剂及其配制方法 | 第14页 |
| 2.2 菌种及载体的构建 | 第14页 |
| 2.3 实验方法 | 第14页 |
| 2.3.1 拟南芥的遗传转化、筛选、鉴定 | 第14页 |
| 2.4 pBI101-LgChi2转化农杆菌及菌落PCR鉴定 | 第14-15页 |
| 2.5 拟南芥的培养及其转化 | 第15-17页 |
| 2.5.1 对转基因拟南芥的RT-PCR检测 | 第15-16页 |
| 2.5.2 转LgChi2和LgChi1基因几丁质酶活性测定 | 第16页 |
| 2.5.3 真菌胁迫及转LgChi2和LgChi1基因拟南芥几丁质酶活性测定 | 第16-17页 |
| 2.6 转基因拟南芥的表型分析及低温胁迫下,抗氧化物酶酶活性测定 | 第17-18页 |
| 2.6.1 转LgChi2和LgChi1基因表型分析 | 第17页 |
| 2.6.2 低温胁迫下,拟南芥抗氧化物酶的酶活性测定 | 第17-18页 |
| 2.7 转录组数据分析 | 第18-19页 |
| 2.7.1 转录组数据技术方法及流程 | 第18页 |
| 2.7.2 转录组数据分析流程 | 第18-19页 |
| 3 结果与分析 | 第19-32页 |
| 3.1 结果 | 第19-25页 |
| 3.1.1 农杆菌的转化及鉴定 | 第19页 |
| 3.1.2 拟南芥的遗传转化、筛选、鉴定 | 第19-20页 |
| 3.1.4 转化植株中LgChi2基因表达的检测 | 第20页 |
| 3.1.5 低温胁迫与常温下,转基因与野生型拟南芥几丁质酶的活性测定 | 第20-21页 |
| 3.1.6 尖孢镰刀菌胁迫下,几丁质酶活性测定 | 第21-22页 |
| 3.1.7 低温胁迫下,转基因拟南芥的表型分析和抗氧化物酶活测定 | 第22-25页 |
| 3.2 转录组数据的输出 | 第25-28页 |
| 3.2.1 拼接结果统计 | 第25页 |
| 3.2.2 Gene功能注释 | 第25-26页 |
| 3.2.3 基因功能分类 | 第26-28页 |
| 3.3 兴安落叶松几丁质酶基因的GO功能分析 | 第28-29页 |
| 3.3.1 兴安落叶松几丁质酶KEGG注释 | 第28-29页 |
| 3.3.2 兴安落叶松几丁质酶KOG功能注释 | 第29页 |
| 3.4 兴安落叶松几丁质酶家族转录组分析 | 第29-32页 |
| 3.4.1 几丁质酶家族 | 第29-30页 |
| 3.4.2 基因序列比对 | 第30-32页 |
| 4 讨论 | 第32-34页 |
| 4.1 野生型与转基因拟南芥的抗寒性分析 | 第32页 |
| 4.2 野生型与转基因拟南抗氧化酶活性的分析 | 第32页 |
| 4.3 病菌胁迫下,对野生型与转基因拟南芥抗病性分析 | 第32-33页 |
| 4.4 兴安落叶松几丁质酶转录组数据分析 | 第33-34页 |
| 5 结论 | 第34-35页 |
| 致谢 | 第35-36页 |
| 参考文献 | 第36-39页 |
| 作者简介 | 第39页 |
