摘要 | 第2-4页 |
Abstract | 第4-5页 |
引言 | 第9-11页 |
第一部分 骨髓间充质干细胞环氧化酶2及聚蛋白多糖酶1沉默与胰岛素样生长因子1过表达 | 第11-34页 |
第一章 材料与方法 | 第12-21页 |
1.1 主要试剂及仪器 | 第12-13页 |
1.2 细胞培养与鉴定 | 第13-16页 |
1.2.1 人骨髓间充质干细胞的分离和培养 | 第13-14页 |
1.2.2 人骨髓间充质干细胞的传代 | 第14-15页 |
1.2.3 人骨髓间充质干细胞的生长曲线测定 | 第15页 |
1.2.4 人骨髓间充质干细胞的标志物鉴定 | 第15页 |
1.2.5人骨髓间充质干细胞多向分化潜能的鉴定 | 第15-16页 |
1.2.5.1 成骨诱导分化 | 第15-16页 |
1.2.5.2 成软骨诱导分化 | 第16页 |
1.2.5.3 成脂诱导分化 | 第16页 |
1.3 慢病毒载体构建与基因转染表达检测 | 第16-20页 |
1.3.1 慢病毒载体的构建 | 第16-18页 |
1.3.2 预实验 | 第18页 |
1.3.3 实验分组 | 第18页 |
1.3.4 基因转染及观察 | 第18-19页 |
1.3.5 RT-PCR检测三种基因的表达 | 第19-20页 |
1.3.6 Western Blotting检测 | 第20页 |
1.3.7 h IGF-1 检测 | 第20页 |
1.4 统计学分析 | 第20-21页 |
第二章 实验结果 | 第21-31页 |
2.1 骨髓间充质干细胞干细胞的鉴定 | 第21-27页 |
2.1.1骨髓间充质干细胞形态 | 第21-22页 |
2.1.2 生长曲线的测定 | 第22-23页 |
2.1.3骨髓间充质干细胞表面抗原标记物鉴定 | 第23-25页 |
2.1.4人骨髓间充质干细胞成骨、成软骨、成脂分化后鉴定172.2 基因转染后的鉴定 | 第25-27页 |
2.2 基因转染后的鉴定 | 第27-31页 |
2.2.1基因转染后倒置荧光显微镜观察 | 第27-28页 |
2.2.2 RT-PCR检测m RNA表达 | 第28-29页 |
2.2.3 Western Blotting检测蛋白表达 | 第29-30页 |
2.2.4 ELISA检测IGF-1 表达 | 第30-31页 |
第三章 讨论 | 第31-34页 |
第二部分 超声空化效应促人骨髓间充质干细胞体内归巢的实验研究 | 第34-46页 |
第一章 材料与方法 | 第35-38页 |
0 材料 | 第35页 |
1 主要试剂 | 第35页 |
2 方法 | 第35-37页 |
2.1 建立类风湿性关节炎的兔模型 | 第35-36页 |
2.2 关节炎模型的检测 | 第36页 |
2.2.1 组织学观察 | 第36页 |
2.2.2关节肿胀情况及皮温测量 | 第36页 |
2.3实验分组及细胞移植 | 第36-37页 |
2.3.1 实验分组 | 第36页 |
2.3.2 细胞移植及检测 | 第36-37页 |
2.3.3 RT-PCR检测滑膜组织中目的基因 | 第37页 |
3 统计学处理 | 第37-38页 |
第二章 实验结果 | 第38-44页 |
1 兔关节炎模型的建立 | 第38-39页 |
1.1 动物状态观察 | 第38页 |
1.2 膝关节直径测量 | 第38页 |
1.3 膝关节皮温测量 | 第38-39页 |
1.4 组织学检查 | 第39页 |
2.骨髓间充质干细胞归巢效应的检测 | 第39-44页 |
2.1 组织形态观察 | 第40-42页 |
2.2 RT-PCR检测 | 第42-44页 |
第三章 讨论 | 第44-46页 |
结论 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-52页 |
综述 | 第52-60页 |
综述参考文献 | 第58-60页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第60-61页 |
致谢 | 第61-62页 |