摘要 | 第3-7页 |
abstract | 第7-11页 |
缩略词对照表 | 第14-16页 |
引言 | 第16-19页 |
第一部分 Vaspin对TNF-α诱导的H9C2细胞损伤的影响及机制 | 第19-43页 |
1、实验材料与方法 | 第19-29页 |
1.1 大鼠心肌细胞系H9C | 第19页 |
1.2 主要试剂及产地 | 第19-20页 |
1.3 主要仪器及设备 | 第20-21页 |
1.4 实验器械的准备及灭菌 | 第21页 |
1.5 主要实验试剂的配置 | 第21-23页 |
1.6 Westernblot中所用的一抗及使用方法 | 第23页 |
1.7 H9C2细胞的体外培养 | 第23-24页 |
1.8 TNF-α对H9C2细胞凋亡及自噬的影响 | 第24-25页 |
1.9 干预自噬对TNF-α诱导的H9C2细胞凋亡的影响 | 第25-26页 |
1.10 Vaspin对H9C2细胞活性的影响及其机制 | 第26页 |
1.11 蛋白质印迹法(Westernblot) | 第26-27页 |
1.12 单丹磺酰尸胺(MDC)染色 | 第27-28页 |
1.13 MTT检测细胞存活率 | 第28页 |
1.14 ATP含量检测 | 第28页 |
1.15 透射电镜观察细胞自噬体 | 第28-29页 |
1.16 统计学分析 | 第29页 |
2.结果 | 第29-40页 |
2.1 TNF-α诱导H9C2细胞凋亡 | 第29-30页 |
2.2 TNF-α抑制H9C2细胞自噬 | 第30-31页 |
2.3 上调自噬抑制TNF-α诱导的H9C2凋亡 | 第31-32页 |
2.4 Vaspin抑制TNF-α诱导的H9C2细胞凋亡 | 第32-35页 |
2.5 Vaspin促进H9C2细胞自噬 | 第35-38页 |
2.6 Vaspin通过抑制PI3K/AKT/mTOR通路促进自噬改善细胞凋亡 | 第38-40页 |
3.讨论 | 第40-43页 |
第二部分 Vaspin对糖尿病心肌病大鼠心肌纤维化及心功能的影响 | 第43-52页 |
1.实验材料与方法 | 第43-46页 |
1.1 动物 | 第43页 |
1.2 主要试剂及产地 | 第43-44页 |
1.3 主要仪器及设备 | 第44页 |
1.4 SD大鼠糖尿病心肌病模型的制作 | 第44页 |
1.5 大鼠空腹血糖检测 | 第44页 |
1.6 大鼠心脏彩超 | 第44页 |
1.7 酶联免疫吸附试实验(ELISA) | 第44-45页 |
1.8 制作石蜡切片 | 第45页 |
1.9 苏木精-伊红(HE)染色 | 第45页 |
1.10 Masson染色 | 第45页 |
1.11 蛋白印迹(Westernblot) | 第45页 |
1.12 数据分析 | 第45-46页 |
2.结果 | 第46-49页 |
2.1 各组大鼠体重及空腹血糖的变化 | 第46页 |
2.2 各组大鼠血清中TNF-α改变 | 第46页 |
2.3 各组大鼠的心功能改变 | 第46-47页 |
2.4 大鼠心肌组织中自噬及凋亡相关蛋白水平的表达变化 | 第47-48页 |
2.5 Vaspin干预对糖尿病心肌病大鼠心肌纤维化的影响 | 第48-49页 |
3 讨论 | 第49-52页 |
结论与展望 | 第52-53页 |
1、结论 | 第52页 |
2、展望与不足 | 第52-53页 |
致谢 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-59页 |
攻读学位期间发表论文 | 第59-60页 |
综述 | 第60-69页 |
参考文献 | 第66-69页 |