| 摘要 | 第3-6页 |
| abstract | 第6-9页 |
| 第1章 引言 | 第13-16页 |
| 第2章 实验材料与方法 | 第16-26页 |
| 2.1 实验对象 | 第16页 |
| 2.2 主要试剂及来源 | 第16-17页 |
| 2.3 主要仪器 | 第17-18页 |
| 2.4 试验器械的准备及灭菌处理 | 第18页 |
| 2.5 相关实验试剂的配制 | 第18-19页 |
| 2.6 WesternBlot中所用一抗信息 | 第19-20页 |
| 2.7 HUVECs的提取与培养传代 | 第20-22页 |
| 2.7.1 HUVECs分离提取 | 第20-21页 |
| 2.7.2 模拟血管内皮细胞OS损伤 | 第21页 |
| 2.7.3 血管内皮OS损伤条件下发生EndMT及自噬、Wnt信号通路发生的变化 | 第21页 |
| 2.7.4 调控自噬及Wnt信号通路对OS损伤内皮细胞功能的保护作用 | 第21-22页 |
| 2.8 分光光度法检测细胞内SOD活性 | 第22页 |
| 2.9 分光光度法检测细胞内MDA含量 | 第22页 |
| 2.10 免疫荧光双标染色分析 | 第22-23页 |
| 2.11 WesternBlot检测 | 第23-25页 |
| 2.11.1 HUVECs总蛋白的提取 | 第23页 |
| 2.11.2 蛋白浓度定量 | 第23-24页 |
| 2.11.3 SDS-PAGE电泳 | 第24-25页 |
| 2.12 流式细胞技术检测细胞凋亡率 | 第25页 |
| 2.13 统计学分析 | 第25-26页 |
| 第3章 结果 | 第26-38页 |
| 3.1 提取原代HUVECs的纯度检测及其生长特点 | 第26-27页 |
| 3.1.1 免疫荧光检测技术检测原代HUVECs细胞纯度 | 第26页 |
| 3.1.2 HUVECs细胞生长特点 | 第26-27页 |
| 3.2 用H2O2模拟OS损伤 | 第27-28页 |
| 3.3 OS条件诱导HUVECs发生EndMT | 第28-31页 |
| 3.4 OS条件下血管内皮细胞中自噬的水平及Wnt信号通路的蛋白表达改变 | 第31页 |
| 3.5 OS条件下细胞凋亡水平增加 | 第31-32页 |
| 3.6 调控自噬及Wnt信号通路调节OS条件下的HUVECs发生EndMT | 第32-34页 |
| 3.7 调控自噬及Wnt信号通路调节OS条件下的HUVECs的凋亡率 | 第34-35页 |
| 3.8 激活Wnt信号通路时上调自噬对OS条件下HUVECs发生的EndMT水平的抑制作用减弱 | 第35-37页 |
| 3.9 调节自噬对OS条件下HUVECs内Wnt信号通路的有负性调控作用 | 第37-38页 |
| 第4章 讨论 | 第38-42页 |
| 4.1 OS诱导HUVECs发生凋亡及EndMT | 第38-39页 |
| 4.2 OS条件下激活自噬及Wnt/β-catenin信号通路 | 第39页 |
| 4.3 自噬调节暴露于OS环境下内皮细胞的功能至少部分通过调节Wnt/β-catenin信号通路 | 第39-42页 |
| 第5章 结论与展望 | 第42-43页 |
| 5.1 结论 | 第42页 |
| 5.2 展望与不足 | 第42-43页 |
| 5.2.1 展望 | 第42页 |
| 5.2.2 不足 | 第42-43页 |
| 致谢 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-47页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第47-48页 |
| 综述 | 第48-54页 |
| 参考文献 | 第53-54页 |
