| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 第一章 引言 | 第13-44页 |
| 1.1 Wnt信号通路 | 第13-22页 |
| 1.1.1 Wnt信号通路概述 | 第13-15页 |
| 1.1.2 经典Wnt信号通路 | 第15-16页 |
| 1.1.3 非经典Wnt信号通路 | 第16-19页 |
| 1.1.4 Wnt信号通路与人类疾病 | 第19-22页 |
| 1.2 RSPOs/Rspos蛋白家族 | 第22-33页 |
| 1.2.1 RSPOs/Rspos蛋白家族概述 | 第22页 |
| 1.2.2 RSPOs的发现及其进化 | 第22-23页 |
| 1.2.3 R-spondin基因表达和蛋白结构 | 第23-24页 |
| 1.2.4 RSPOs/Rspos与Wnt信号通路 | 第24-28页 |
| 1.2.5 RSPOs/Rspos的体内生物学功能 | 第28-31页 |
| 1.2.6 RSPOs/Rspos对特定组织的细胞生物学调控 | 第31-33页 |
| 1.2.7 RSPOs/Rspos与癌症 | 第33页 |
| 1.3 斑马鱼及其早期胚胎发育研究 | 第33-41页 |
| 1.3.1 模式生物斑马鱼 | 第33-35页 |
| 1.3.2 斑马鱼早期胚胎发育 | 第35-36页 |
| 1.3.3 经典Wnt信号通路与胚胎前后端及背腹轴分化 | 第36-37页 |
| 1.3.4 非经典Wnt信号通路与胚胎原肠化运动 | 第37-41页 |
| 1.4 立体依据和研究意义 | 第41-44页 |
| 第二章 斑马鱼Rspo3通过拮抗经典Wnt信号通路调控胚胎背腹轴和前后端发育 | 第44-87页 |
| 2.1 引言 | 第44-45页 |
| 2.2 材料方法 | 第45-60页 |
| 2.2.1 化学和生物试剂 | 第45-46页 |
| 2.2.2 实验仪器 | 第46页 |
| 2.2.3 实验动物 | 第46-47页 |
| 2.2.4 质粒构建 | 第47-48页 |
| 2.2.5 RNA的提取 | 第48页 |
| 2.2.6 半定量RT-PCR | 第48-50页 |
| 2.2.7 原位杂交探针的合成 | 第50-51页 |
| 2.2.8 整胚原位杂交 | 第51-54页 |
| 2.2.9 mRNA的体外合成 | 第54-55页 |
| 2.2.10 吗啡啉反义寡聚核苷酸(Morpholino antisense oligos,Morpholino或MO)的设计与合成 | 第55页 |
| 2.2.11 显微注射 | 第55-56页 |
| 2.2.12 定量RT-PCR(Quantitat ive RT-PCR,qPCR) | 第56页 |
| 2.2.13 荧光素酶活性检测(Luciferase assay) | 第56-58页 |
| 2.2.14 蛋白印迹及免疫共沉淀(Western blotCoimmunoprecipitation) | 第58-60页 |
| 2.2.15 统计分析 | 第60页 |
| 2.3 实验结果 | 第60-81页 |
| 2.3.1 斑马鱼和其他辐鳍鱼类Rspo3都有特殊的基因组和蛋白质结构 | 第60-63页 |
| 2.3.2 斑马鱼rspo3基因在早期胚胎中的时空表达谱分析 | 第63-64页 |
| 2.3.3 在斑马鱼胚胎中rspo3调控胚胎早期背腹及前后端发育 | 第64-69页 |
| 2.3.4 斑马鱼Rspo3不促进母源Wnt/β-catenin信号通路 | 第69-70页 |
| 2.3.5 在斑马鱼胚胎中Rspo3抑制Wnt/β-catenin信号通路 | 第70-74页 |
| 2.3.6 斑马鱼Rspo3负调控Wnt/β-catenin信号通路作用于Lrp6受体下游,蛋白降解复合体上游 | 第74-77页 |
| 2.3.7 斑马鱼rspo3影响Caveolin 1a介导的Lrp6信号的内化 | 第77-79页 |
| 2.3.8 人RSP03在斑马鱼胚胎中有类似的作用 | 第79-81页 |
| 2.4 讨论 | 第81-87页 |
| 第三章 斑马鱼Rspo1通过抑制非经典Wnt/PCP信号通路调控胚胎汇聚延伸运动 | 第87-104页 |
| 3.1 引言 | 第87-89页 |
| 3.2 材料方法 | 第89-92页 |
| 3.2.1 化学和生物试剂 | 第89页 |
| 3.2.2 实验仪器 | 第89页 |
| 3.2.3 实验动物 | 第89页 |
| 3.2.4 质粒构建 | 第89-90页 |
| 3.2.5 RNA的提取 | 第90页 |
| 3.2.6 半定量RT-PCR | 第90-91页 |
| 3.2.7 原位杂交探针的合成 | 第91-92页 |
| 3.2.8 整胚原位杂交 | 第92页 |
| 3.2.9 mRNA的体外合成 | 第92页 |
| 3.2.10 吗啡啉反义寡聚核苷酸(Morpholino antisense oligos,Morpholino或MO)的设计与合成 | 第92页 |
| 3.2.11 显微注射 | 第92页 |
| 3.2.12 荧光素酶活性检测(Luciferase assay) | 第92页 |
| 3.2.13 蛋白印迹(Western blot) | 第92页 |
| 3.2.14 统计分析 | 第92页 |
| 3.3 实验结果 | 第92-101页 |
| 3.3.1 斑马鱼rspo1的时空表达谱分析 | 第93-94页 |
| 3.3.2 斑马鱼Rspo1调控胚胎汇聚延伸运动 | 第94-95页 |
| 3.3.3 敲降斑马鱼rspo1基因影响胚胎汇聚延伸运动 | 第95-97页 |
| 3.3.4 斑马鱼胚胎中Rspo1抑制非经典Wnt/PCP信号通路 | 第97-99页 |
| 3.3.5 斑马鱼Rspo1参与调控非经典Wnt信号通路 | 第99-101页 |
| 3.4 讨论 | 第101-104页 |
| 第四章 总结与展望 | 第104-110页 |
| 参考文献 | 第110-123页 |
| 致谢 | 第123-125页 |
| 个人简历 | 第125-126页 |
| 博士期间发表和撰写的学术论文 | 第126页 |
