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南蛇藤茎提取物通过肿瘤相关巨噬细胞干预胶质母细胞瘤的机制研究

中文摘要第3-7页
英文摘要第7-11页
符号说明第15-18页
前言第18-24页
    参考文献第21-24页
第一部分 南蛇藤茎提取物对人胶质母细胞瘤U87和U251细胞的迁移、侵袭性影响和分子机制研究第24-42页
    1 材料第24-28页
        1.1 药品第24页
        1.2 细胞株第24页
        1.3 实验试剂第24-26页
        1.4 主要仪器第26页
        1.5 主要试剂配制第26-28页
    2 方法第28-33页
        2.1 药物准备第28页
        2.2 细胞培养第28-29页
        2.3 细胞活力实验(MTT法)第29页
        2.4 细胞-基质黏附实验第29页
        2.5 细胞侵袭和迁移实验第29-30页
        2.6 Western blot实验第30-32页
        2.7 明胶电泳酶谱法检测MMPs-2和MMPs-9第32页
        2.8 免疫荧光染色第32-33页
        2.9 结果统计学处理第33页
    3 结果第33-37页
        3.1 COE对人胶质母细胞瘤U87和U251细胞活力的影响第33-34页
        3.2 COE抑制人胶质母细胞瘤U87和U251细胞的黏附力第34-35页
        3.3 COE对人胶质母细胞瘤U87和U251细胞瘤侵袭和迁移力的影响第35-36页
        3.4 COE对U87和U251细胞EMT相关蛋白和MMP-2,9活力影响第36页
        3.5 COE对U87和U251细胞肌动蛋白装配的影响第36-37页
    4 讨论第37-40页
    参考文献第40-42页
第二部分 南蛇藤茎提取物影响人胶质母细胞瘤细胞株U251的增殖和凋亡及其机制的研究第42-55页
    1 材料第42-44页
        1.1 药品第42页
        1.2 细胞株第42页
        1.3 实验试剂第42-43页
        1.4 主要仪器第43-44页
        1.5 主要试剂配制第44页
    2 方法第44-46页
        2.1 药物准备第44页
        2.2 细胞培养第44-45页
        2.3 细胞活力实验第45页
        2.4 流式细胞仪检测COE对U251细胞增殖的影响第45页
        2.5 流式细胞仪检测COE对U251细胞凋亡作用的影响第45页
        2.6 透射电镜观察COE干预后人胶质母细胞瘤细胞U251形态学改变第45-46页
        2.7 Westen Blot检测凋亡相关蛋白第46页
        2.8 统计学处理第46页
    3 结果第46-51页
        3.1 COE对人胶质母细胞瘤U251细胞活力的影响第46-47页
        3.2 COE对人胶质母细胞瘤U251细胞增殖的影响第47-48页
        3.3 COE对人胶质母细胞瘤U251细胞凋亡的影响第48-49页
        3.4 COE对人胶质母细胞瘤U251超微形态的影响第49-50页
        3.5 COE对U251细胞凋亡相关蛋白的影响第50-51页
    4 讨论第51-52页
    参考文献第52-55页
第三部分 南蛇藤茎提取物通过对CSF-1/IL-34/CSF-1R通路作用肿瘤相关巨噬细胞进而影响胶质母细胞瘤增殖及凋亡的机制研究第55-84页
    1 材料第55-59页
        1.1 组织及病理切片来源第55-56页
        1.2 细胞株第56页
        1.3 质粒第56页
        1.4 实验试剂第56-58页
        1.5 主要仪器第58页
        1.6 主要试剂配制第58-59页
    2 方法第59-67页
        2.1 组织切片HE染色及免疫组化染色第59-60页
        2.2 实时荧光定量PCR(RT-qPCR)实验第60-62页
        2.3 体外建立共培养模型第62-63页
        2.4 瑞氏染色第63页
        2.5 流式细胞仪检测M2样巨噬细胞表面标记第63页
        2.6 免疫荧光染色检测共培养体系中CSF-1通路相关蛋白表达第63页
        2.7 构建IL-34敲除THP-1细胞系第63-66页
        2.8 Western Blot检测第66页
        2.9 琼脂糖胶电泳第66页
        2.10 流式细胞仪检测共培养细胞U251增殖和凋亡第66页
        2.11 建立人胶质母细胞瘤移植瘤裸鼠模型第66-67页
        2.12 统计学处理第67页
    3 结果第67-79页
        3.1 CSF-1、IL-34和CSF-1R在胶质母细胞瘤组织中的表达第67-68页
        3.2 PMA诱导THP-1分化,体外构建肿瘤微环境共培养模型第68-70页
        3.3 CSF-1/IL-34/CSF-1R通路在共培养体系中表达情况第70-71页
        3.4 COE对共培养体系中TAMs中CSF-1/IL-34/CSF-1R通路的影响第71-72页
        3.5 IL-34敲除M2样巨噬细胞的构建及鉴定第72-76页
        3.6 COE对共培养体系中U251细胞凋亡及增殖的作用第76-77页
        3.7 COE对裸鼠胶质母细胞皮下移植瘤生长的影响第77-79页
    4 讨论第79-81页
    参考文献第81-84页
结语第84-85页
文献综述一第85-93页
    参考文献第89-93页
文献综述二第93-101页
    参考文献第97-101页
致谢第101-102页
攻读博士期间发表的学术论文目录第102-103页

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