中文摘要 | 第3-7页 |
英文摘要 | 第7-11页 |
符号说明 | 第15-18页 |
前言 | 第18-24页 |
参考文献 | 第21-24页 |
第一部分 南蛇藤茎提取物对人胶质母细胞瘤U87和U251细胞的迁移、侵袭性影响和分子机制研究 | 第24-42页 |
1 材料 | 第24-28页 |
1.1 药品 | 第24页 |
1.2 细胞株 | 第24页 |
1.3 实验试剂 | 第24-26页 |
1.4 主要仪器 | 第26页 |
1.5 主要试剂配制 | 第26-28页 |
2 方法 | 第28-33页 |
2.1 药物准备 | 第28页 |
2.2 细胞培养 | 第28-29页 |
2.3 细胞活力实验(MTT法) | 第29页 |
2.4 细胞-基质黏附实验 | 第29页 |
2.5 细胞侵袭和迁移实验 | 第29-30页 |
2.6 Western blot实验 | 第30-32页 |
2.7 明胶电泳酶谱法检测MMPs-2和MMPs-9 | 第32页 |
2.8 免疫荧光染色 | 第32-33页 |
2.9 结果统计学处理 | 第33页 |
3 结果 | 第33-37页 |
3.1 COE对人胶质母细胞瘤U87和U251细胞活力的影响 | 第33-34页 |
3.2 COE抑制人胶质母细胞瘤U87和U251细胞的黏附力 | 第34-35页 |
3.3 COE对人胶质母细胞瘤U87和U251细胞瘤侵袭和迁移力的影响 | 第35-36页 |
3.4 COE对U87和U251细胞EMT相关蛋白和MMP-2,9活力影响 | 第36页 |
3.5 COE对U87和U251细胞肌动蛋白装配的影响 | 第36-37页 |
4 讨论 | 第37-40页 |
参考文献 | 第40-42页 |
第二部分 南蛇藤茎提取物影响人胶质母细胞瘤细胞株U251的增殖和凋亡及其机制的研究 | 第42-55页 |
1 材料 | 第42-44页 |
1.1 药品 | 第42页 |
1.2 细胞株 | 第42页 |
1.3 实验试剂 | 第42-43页 |
1.4 主要仪器 | 第43-44页 |
1.5 主要试剂配制 | 第44页 |
2 方法 | 第44-46页 |
2.1 药物准备 | 第44页 |
2.2 细胞培养 | 第44-45页 |
2.3 细胞活力实验 | 第45页 |
2.4 流式细胞仪检测COE对U251细胞增殖的影响 | 第45页 |
2.5 流式细胞仪检测COE对U251细胞凋亡作用的影响 | 第45页 |
2.6 透射电镜观察COE干预后人胶质母细胞瘤细胞U251形态学改变 | 第45-46页 |
2.7 Westen Blot检测凋亡相关蛋白 | 第46页 |
2.8 统计学处理 | 第46页 |
3 结果 | 第46-51页 |
3.1 COE对人胶质母细胞瘤U251细胞活力的影响 | 第46-47页 |
3.2 COE对人胶质母细胞瘤U251细胞增殖的影响 | 第47-48页 |
3.3 COE对人胶质母细胞瘤U251细胞凋亡的影响 | 第48-49页 |
3.4 COE对人胶质母细胞瘤U251超微形态的影响 | 第49-50页 |
3.5 COE对U251细胞凋亡相关蛋白的影响 | 第50-51页 |
4 讨论 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-55页 |
第三部分 南蛇藤茎提取物通过对CSF-1/IL-34/CSF-1R通路作用肿瘤相关巨噬细胞进而影响胶质母细胞瘤增殖及凋亡的机制研究 | 第55-84页 |
1 材料 | 第55-59页 |
1.1 组织及病理切片来源 | 第55-56页 |
1.2 细胞株 | 第56页 |
1.3 质粒 | 第56页 |
1.4 实验试剂 | 第56-58页 |
1.5 主要仪器 | 第58页 |
1.6 主要试剂配制 | 第58-59页 |
2 方法 | 第59-67页 |
2.1 组织切片HE染色及免疫组化染色 | 第59-60页 |
2.2 实时荧光定量PCR(RT-qPCR)实验 | 第60-62页 |
2.3 体外建立共培养模型 | 第62-63页 |
2.4 瑞氏染色 | 第63页 |
2.5 流式细胞仪检测M2样巨噬细胞表面标记 | 第63页 |
2.6 免疫荧光染色检测共培养体系中CSF-1通路相关蛋白表达 | 第63页 |
2.7 构建IL-34敲除THP-1细胞系 | 第63-66页 |
2.8 Western Blot检测 | 第66页 |
2.9 琼脂糖胶电泳 | 第66页 |
2.10 流式细胞仪检测共培养细胞U251增殖和凋亡 | 第66页 |
2.11 建立人胶质母细胞瘤移植瘤裸鼠模型 | 第66-67页 |
2.12 统计学处理 | 第67页 |
3 结果 | 第67-79页 |
3.1 CSF-1、IL-34和CSF-1R在胶质母细胞瘤组织中的表达 | 第67-68页 |
3.2 PMA诱导THP-1分化,体外构建肿瘤微环境共培养模型 | 第68-70页 |
3.3 CSF-1/IL-34/CSF-1R通路在共培养体系中表达情况 | 第70-71页 |
3.4 COE对共培养体系中TAMs中CSF-1/IL-34/CSF-1R通路的影响 | 第71-72页 |
3.5 IL-34敲除M2样巨噬细胞的构建及鉴定 | 第72-76页 |
3.6 COE对共培养体系中U251细胞凋亡及增殖的作用 | 第76-77页 |
3.7 COE对裸鼠胶质母细胞皮下移植瘤生长的影响 | 第77-79页 |
4 讨论 | 第79-81页 |
参考文献 | 第81-84页 |
结语 | 第84-85页 |
文献综述一 | 第85-93页 |
参考文献 | 第89-93页 |
文献综述二 | 第93-101页 |
参考文献 | 第97-101页 |
致谢 | 第101-102页 |
攻读博士期间发表的学术论文目录 | 第102-103页 |