| 摘要 | 第2-3页 |
| Abstract | 第3-4页 |
| 前言 | 第7-15页 |
| 1 疫霉菌与植物互作 | 第7-8页 |
| 2 疫霉菌的效应蛋白 | 第8-11页 |
| 2.1 胞内效应蛋白 | 第9-10页 |
| 2.2 胞外效应蛋白 | 第10-11页 |
| 3 疫霉菌基因功能分析方法 | 第11-15页 |
| 3.1 干扰基因表达的方法 | 第11-12页 |
| 3.2 缺失特定基因的方法 | 第12-13页 |
| 3.3 促使基因表达的方法 | 第13-15页 |
| 材料与方法 | 第15-29页 |
| 1 供试菌株与植物材料 | 第15页 |
| 2 主要质粒载体 | 第15页 |
| 3 核酸操作 | 第15-19页 |
| 3.1 基因组DNA的提取 | 第15-16页 |
| 3.2 总RNA的提取和cDNA合成 | 第16-17页 |
| 3.3 质粒DNA的提取 | 第17-18页 |
| 3.4 DNA片段的胶回收纯化 | 第18页 |
| 3.5 qPCR分析 | 第18-19页 |
| 4 载体的构建 | 第19-23页 |
| 4.1 常规载体构建 | 第19-21页 |
| 4.2 HDR载体构建 | 第21-22页 |
| 4.3 sgRNA载体构建 | 第22-23页 |
| 5 感受态的制备与转化 | 第23-25页 |
| 5.1 大肠杆菌DH5α | 第23-24页 |
| 5.2 农杆菌GV3101 | 第24-25页 |
| 6 农杆菌介导的瞬时表达 | 第25页 |
| 7 辣椒疫霉的基因敲除和回补 | 第25-28页 |
| 7.1 原生质体的转化 | 第25-27页 |
| 7.2 转化子的筛选 | 第27页 |
| 7.3 转化子的致病力分析 | 第27-28页 |
| 7.4 转化子的形态学性状测定 | 第28页 |
| 8 数据统计分析 | 第28-29页 |
| 结果与分析 | 第29-43页 |
| 1 SCR82的序列多态性及毒性表型 | 第29-31页 |
| 1.1 SCR82的序列多态性分析 | 第29-30页 |
| 1.2 SCR82引起茄科植物细胞死亡 | 第30-31页 |
| 2 SCR82是辣椒疫霉致病过程中的毒性因子 | 第31-37页 |
| 2.1 scr82基因敲除 | 第31-35页 |
| 2.2 scr82基因回补 | 第35-37页 |
| 3 scr82的表达导致植物体内抗性相关基因的上调表达 | 第37-39页 |
| 4 植物中响应SCR82作用的类受体激酶基因 | 第39-43页 |
| 讨论 | 第43-46页 |
| 1 SCR82是辣椒疫霉致病过程中的一个毒性因子 | 第43-44页 |
| 2 SCR82可能靶向植物类受体激酶 | 第44-46页 |
| 展望 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-56页 |
| 附录一 本论文所使用的培养基及材料 | 第56-65页 |
| 附录二 本论文所使用的仪器设备 | 第65-66页 |
| 致谢 | 第66-67页 |
| 攻读学位期间发表的论文 | 第67-68页 |