摘要 | 第5-6页 |
abstract | 第6-7页 |
第一章 文献综述 | 第10-23页 |
1.1 梨小食心虫研究概述 | 第10-11页 |
1.1.1 梨小食心虫生物习性及发生规律 | 第10-11页 |
1.1.2 梨小食心虫的防治 | 第11页 |
1.2 谷胱甘肽-S-转移酶的概述 | 第11-21页 |
1.2.1 谷胱甘肽-S-转移酶的分类和命名 | 第12-13页 |
1.2.2 谷胱甘肽-S-转移酶的结构 | 第13-14页 |
1.2.3 谷胱甘肽-S-转移酶的功能 | 第14-21页 |
1.3 谷胱甘肽-S-转移酶研究进展 | 第21页 |
1.4 研究目的与意义 | 第21-23页 |
第二章 谷胱甘肽-S-转移酶基因的克隆及表达分析 | 第23-41页 |
2.1 材料与仪器 | 第23页 |
2.1.1 供试虫源 | 第23页 |
2.1.2 主要试剂 | 第23页 |
2.2 实验方法 | 第23-28页 |
2.2.1 总RNA的提取 | 第23-24页 |
2.2.2 cDNA的合成 | 第24页 |
2.2.3 引物设计 | 第24-25页 |
2.2.4 ORF克隆 | 第25-27页 |
2.2.5 序列特征分析 | 第27页 |
2.2.6 梨小食心虫GmolGST5和GmolGST6基因的表达分析 | 第27-28页 |
2.3 结果与分析 | 第28-41页 |
2.3.1 梨小食心虫总RNA的提取 | 第28页 |
2.3.2 梨小食心虫开放阅读框 | 第28-29页 |
2.3.3 序列特征分析 | 第29-33页 |
2.3.4 系统发育分析 | 第33-37页 |
2.3.5 梨小食心虫GmolGSTs基因表达分析 | 第37-38页 |
2.3.6 讨论 | 第38-41页 |
第三章 谷胱甘肽-S-转移酶原核表达及功能分析 | 第41-50页 |
3.1 实验材料 | 第41页 |
3.2 实验方法 | 第41-45页 |
3.2.1 表达载体构建 | 第41-42页 |
3.2.2 蛋白表达及纯化 | 第42-44页 |
3.2.3 重组蛋白Western-blot检测 | 第44页 |
3.2.4 酶动力学常数的测定 | 第44页 |
3.2.5 pH和温度对谷胱甘肽-S-转移酶活力的影响 | 第44-45页 |
3.3 结果与分析 | 第45-48页 |
3.3.1 表达载体的构建 | 第45页 |
3.3.2 重组蛋白的表达与纯化 | 第45-47页 |
3.3.3 重组蛋白酶动力学特性 | 第47页 |
3.3.4 pH和温度对谷胱甘肽-S-转移酶活力的影响 | 第47-48页 |
3.4 讨论 | 第48-50页 |
参考文献 | 第50-60页 |
致谢 | 第60-61页 |
作者简介 | 第61页 |