摘要 | 第5-7页 |
ABSTRACT | 第7-8页 |
缩写对照表 | 第9-12页 |
1 文献综述 | 第12-25页 |
1.1 家禽卵泡发育概述 | 第12-18页 |
1.1.1 家禽卵泡的分类 | 第12-13页 |
1.1.2 家禽卵泡发育的特点 | 第13页 |
1.1.3 家禽成熟卵泡的结构 | 第13-14页 |
1.1.4 家禽卵泡发育的调控 | 第14-18页 |
1.2 颗粒细胞在卵泡发育中的作用 | 第18-20页 |
1.2.1 颗粒细胞在卵泡选择中的作用 | 第18-19页 |
1.2.2 颗粒细胞在类固醇激素合成中的作用 | 第19-20页 |
1.3 BMP6基因的研究进展 | 第20-25页 |
1.3.1 BMPs家族概况 | 第20页 |
1.3.2 BMP6的信号调节 | 第20-21页 |
1.3.3 BMP6的生物学功能 | 第21-25页 |
1.4 本研究的主要内容和目的意义 | 第25页 |
2 材料与方法 | 第25-37页 |
2.1 试验材料 | 第25-27页 |
2.1.1 试验动物 | 第25页 |
2.1.2 主要试剂及试剂盒 | 第25-26页 |
2.1.3 主要试剂配制 | 第26页 |
2.1.4 主要仪器设备 | 第26-27页 |
2.1.5 主要应用的生物学软件 | 第27页 |
2.2 试验方法 | 第27-37页 |
2.2.1 卵泡采集 | 第27页 |
2.2.2 卵泡组织总RNA提取 | 第27-28页 |
2.2.3 组织总RNA质量和浓度的检测 | 第28页 |
2.2.4 组织总RNA反转录 | 第28-29页 |
2.2.5 卵泡组织总蛋白提取 | 第29页 |
2.2.6 鸡原代颗粒细胞的分离培养 | 第29-30页 |
2.2.7 细胞活性、细胞增殖-毒性检测(CCK-8) | 第30页 |
2.2.8 BMP6蛋白处理颗粒细胞 | 第30-31页 |
2.2.9 BMP6蛋白及FSH处理颗粒细胞 | 第31页 |
2.2.10 颗粒细胞总RNA提取 | 第31页 |
2.2.11 颗粒细胞总蛋白提取 | 第31页 |
2.2.12 实时荧光定量 | 第31-32页 |
2.2.13 Western blot | 第32-36页 |
2.2.14 Elisa检测 | 第36-37页 |
2.3 数据分析 | 第37页 |
3 结果与分析 | 第37-48页 |
3.1 BMP6在鸡不同时期卵泡中的表达 | 第37-40页 |
3.1.1 组织RNA提取效果的检测 | 第37-38页 |
3.1.2 BMP6 mRNA在鸡不同时期卵泡中的表达 | 第38-39页 |
3.1.3 BMP6蛋白在鸡不同时期卵泡中的表达 | 第39-40页 |
3.2 BMP6蛋白对体外培养颗粒细胞的影响 | 第40-47页 |
3.2.1 鸡卵泡颗粒细胞体外培养的形态学观察 | 第40-42页 |
3.2.2 BMP6促进卵泡颗粒细胞增殖 | 第42-43页 |
3.2.3 荧光定量检测孕酮合成相关基因的mRNA水平变化 | 第43-45页 |
3.2.4 Western blot检测孕酮合成相关基因的蛋白水平变化 | 第45-47页 |
3.3 BMP6蛋白及FSH对卵泡颗粒细胞孕酮分泌的影响 | 第47-48页 |
4 讨论 | 第48-50页 |
4.1 BMP6在鸡不同时期卵泡中的差异表达分析 | 第48-49页 |
4.2 BMP6对鸡卵泡颗粒细胞增殖的影响 | 第49页 |
4.3 BMP6对孕酮合成调控基因StAR、3β-HSD及其蛋白的影响 | 第49-50页 |
4.4 BMP6对鸡卵泡颗粒细胞孕酮分泌的影响 | 第50页 |
5 结论 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-58页 |
致谢 | 第58-59页 |
攻读硕士学位期间发表的论文和授权专利 | 第59页 |