| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4页 |
| 缩略词 | 第5-9页 |
| 第一章 文献回顾 | 第9-18页 |
| 1.1 肿瘤的发生及死亡率 | 第9页 |
| 1.2 肿瘤目前的治疗方法 | 第9-12页 |
| 1.2.1 肿瘤疫苗 | 第10页 |
| 1.2.2 靶点治疗 | 第10-11页 |
| 1.2.3 单克隆抗体类免疫检查点抑制 | 第11页 |
| 1.2.4 CAR-T细胞 | 第11-12页 |
| 1.2.5 生物应答调节剂 | 第12页 |
| 1.3 肿瘤与免疫 | 第12-16页 |
| 1.3.1 免疫细胞 | 第14-15页 |
| 1.3.2 细胞因子 | 第15-16页 |
| 1.4 纳秒脉冲电场 | 第16-18页 |
| 1.4.1 纳秒脉冲的应用 | 第16-17页 |
| 1.4.2 纳秒脉冲与恶性黑色素瘤的研究 | 第17-18页 |
| 第二章 纳秒脉冲电场消融恶性黑色素瘤引起系统性免疫的改变 | 第18-35页 |
| 序言 | 第18页 |
| 2.1 实验材料 | 第18-19页 |
| 2.1.1 实验仪器 | 第18-19页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第19页 |
| 2.2.溶液配制 | 第19-21页 |
| 2.2.1 DMEM高糖培养基的配制 | 第19-20页 |
| 2.2.2 双抗溶液的配制 | 第20页 |
| 2.2.3 RPMI-1640 培养基的配制 | 第20页 |
| 2.2.4 细胞培养用无菌PBS溶液 | 第20页 |
| 2.2.5 红细胞裂解液的配制 | 第20页 |
| 2.2.6 胎牛血清的灭活 | 第20-21页 |
| 2.3 实验设备 | 第21页 |
| 2.4 细胞复苏、培养、传代、冻存 | 第21-23页 |
| 2.4.1 细胞复苏 | 第21-22页 |
| 2.4.2 细胞培养 | 第22页 |
| 2.4.3 细胞传代 | 第22页 |
| 2.4.4 细胞冻存 | 第22-23页 |
| 2.5 C57小鼠皮下移植瘤的建立 | 第23页 |
| 2.5.1 细胞计数准备 | 第23页 |
| 2.5.2 实验动物准备 | 第23页 |
| 2.5.3 肿瘤细胞接种 | 第23页 |
| 2.6 实验分组、nsPEFs治疗荷瘤小鼠 | 第23-24页 |
| 2.7 荷瘤小鼠免疫指标检测 | 第24-26页 |
| 2.7.1 小鼠血清提取 | 第24页 |
| 2.7.2 小鼠脾淋巴细胞的制备 | 第24页 |
| 2.7.3 T淋巴细胞的分离 | 第24-25页 |
| 2.7.4 CCK-8 试剂盒检测T细胞的增殖 | 第25页 |
| 2.7.5 流式细胞仪检测CD3~+CD4~+T细胞、CD3~+CD8~+T细胞、抑制性T细胞(Treg)和髓源抑制性细胞(MDSC)比例 | 第25页 |
| 2.7.6 ELISA检测小鼠血清TNF-α、IFN－γ、IL－2、TGF－β、IL－10 水平 | 第25-26页 |
| 2.8 统计学分析 | 第26页 |
| 2.9 实验结果 | 第26-31页 |
| 2.9.1 肿瘤模型的建立 | 第26-27页 |
| 2.9.2 荷瘤小鼠的生存状况 | 第27页 |
| 2.9.3 30 KV/cm 100 ns 200 次脉冲肿瘤的消融结果更好 | 第27-28页 |
| 2.9.4 30 KV/cm 100 ns 200 次脉冲处理荷瘤小鼠后T淋巴细胞活性增加 | 第28-29页 |
| 2.9.5 流式细胞仪检测CD3~+CD4~+T、CD3~+CD8~+T细胞、Treg细胞和MDSC的结果 | 第29-30页 |
| 2.9.6 ELISA法检测血清IL－2、IL－10、IFN－Y、TGF－β，TNF-α 的结果 | 第30-31页 |
| 2.10 讨论 | 第31-33页 |
| 2.11 总结及展望 | 第33-35页 |
| 2.11.1 全文总结 | 第33-34页 |
| 2.11.2 主要结论 | 第34页 |
| 2.11.3 本文创新点 | 第34页 |
| 2.11.4 展望 | 第34-35页 |
| 参考文献 | 第35-41页 |
| 在学期间的研究成果 | 第41-42页 |
| 致谢 | 第42-43页 |
| 引导组织再生一例 | 第43-52页 |
| 参考文献 | 第51-52页 |
