| 摘要 | 第8-9页 |
| 英文摘要 | 第9页 |
| 1 前言 | 第10-20页 |
| 1.1 百合体细胞胚发生的最新研究进展 | 第10-11页 |
| 1.2 植物体细胞胚发生过程中关键miRNA的研究进展 | 第11-14页 |
| 1.2.1 植物miRNA的生物合成 | 第11-12页 |
| 1.2.2 miRNA成熟体参与调控植物体胚发生的研究进展 | 第12-14页 |
| 1.2.3 miRNA前体在体胚发生过程中的研究进展 | 第14页 |
| 1.3 miR171的研究进展 | 第14-16页 |
| 1.3.1 miR171家族的研究进展 | 第15页 |
| 1.3.2 miR171调控植物体细胞胚发生的研究进展 | 第15-16页 |
| 1.4 植物内源诱捕靶标(eTM)的研究进展 | 第16-17页 |
| 1.5 植物miRNA功能的研究进展 | 第17-18页 |
| 1.6 CRISPR/Cas9技术在园艺植物基因组编辑中的研究进展 | 第18-19页 |
| 1.7 本文研究的目的与意义 | 第19-20页 |
| 2 细叶百合pre-miR171a/b的克隆及表达分析 | 第20-29页 |
| 2.1 材料与方法 | 第20-24页 |
| 2.1.1 试验材料 | 第20页 |
| 2.1.2 主要试验仪器设备及耗材 | 第20-21页 |
| 2.1.3 常用试剂及培养基的配制 | 第21页 |
| 2.1.4 百合体胚总RNA提取及cDNA合成 | 第21-22页 |
| 2.1.5 pre-miR171a/b的PCR扩增反应 | 第22页 |
| 2.1.6 PCR扩增产物的纯化、连接、转化及测序 | 第22-23页 |
| 2.1.7 对测序结果进行生物信息学分析 | 第23页 |
| 2.1.8 pre-miR171的qRT-PCR分析 | 第23-24页 |
| 2.1.9 数据分析 | 第24页 |
| 2.2 结果与分析 | 第24-28页 |
| 2.2.1 细叶百合体细胞胚总RNA提取结果 | 第24页 |
| 2.2.2 lpu-pre-miR171a/b的克隆 | 第24-26页 |
| 2.2.3 lpu-pre-miR171a/b二级结构预测 | 第26页 |
| 2.2.4 pre-miR171a/b引物特异性分析 | 第26-27页 |
| 2.2.5 百合体胚发生过程中pre-miR171的表达分析 | 第27-28页 |
| 2.3 讨论 | 第28-29页 |
| 2.3.1 pre-miR171a/b序列分析 | 第28页 |
| 2.3.2 百合体胚发生过程中miR171与pre-miR171表达关联性分析 | 第28-29页 |
| 3 百合体胚发生过程中eTM171表达分析 | 第29-33页 |
| 3.1 材料与方法 | 第29-30页 |
| 3.1.1 试验材料 | 第29页 |
| 3.1.2 RNA提取及cDNA合成 | 第29页 |
| 3.1.3 eTM171的qRT-PCR引物设计 | 第29页 |
| 3.1.4 eTM171的qRT-PCR分析 | 第29页 |
| 3.1.5 数据分析 | 第29-30页 |
| 3.2 结果与分析 | 第30-31页 |
| 3.2.1 eTM171引物特异性分析 | 第30-31页 |
| 3.2.2 百合体胚发生过程中eTM171的表达分析 | 第31页 |
| 3.3 讨论 | 第31-33页 |
| 3.3.1 百合体胚发生过程中miR171及其eTM的表达关联性分析 | 第31-32页 |
| 3.3.2 百合体胚发生过程中eTM-miR171-SCL6调控网络初探 | 第32-33页 |
| 4 细叶百合miR171a/b的载体构建 | 第33-47页 |
| 4.1 材料与方法 | 第33-41页 |
| 4.1.1 主要试剂 | 第33页 |
| 4.1.2 试验所用的菌株与载体 | 第33页 |
| 4.1.3 miR171a/b过表达载体的构建 | 第33-36页 |
| 4.1.4 miR171a/bSTTM表达载体的构建 | 第36-37页 |
| 4.1.5 miR171a/b打靶载体的构建 | 第37-41页 |
| 4.2 结果与分析 | 第41-46页 |
| 4.2.1 miR171a/b过表达载体的构建 | 第41-43页 |
| 4.2.2 miR171a/bSTTM表达载体的构建 | 第43-44页 |
| 4.2.3 百合miR171a/b打靶载体的构建 | 第44-46页 |
| 4.3 讨论 | 第46-47页 |
| 结论 | 第47-48页 |
| 主要创新点 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-58页 |
| 附录 | 第58-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
| 攻读硕士学位期间发表文章 | 第60-61页 |
