| 中文摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 1、引言 | 第9-23页 |
| 1.1 杆状病毒概述 | 第9-12页 |
| 1.1.1 杆状病毒简介 | 第9页 |
| 1.1.2 杆状病毒的分类 | 第9-10页 |
| 1.1.3 杆状病毒的双相复制周期 | 第10-12页 |
| 1.1.4 AcMNPV简介 | 第12页 |
| 1.2 AcMNPV的pk1基因 | 第12-14页 |
| 1.2.1 蛋白激酶 | 第12-13页 |
| 1.2.2 AcMNPV的蛋白激酶基因pk1 | 第13-14页 |
| 1.3 AcMNPV的泛素基因 | 第14-17页 |
| 1.3.1 泛素-蛋白酶体途径与病毒的关系 | 第14-15页 |
| 1.3.2 杆状病毒的泛素基因 | 第15-17页 |
| 1.4 ACMNPV的p6.9基因 | 第17页 |
| 1.5 蛋白质相互作用的研究 | 第17-21页 |
| 1.5.1 病毒与宿主细胞的相互作用 | 第17-19页 |
| 1.5.2 杆状病毒与宿主细胞相互作用研究 | 第19-20页 |
| 1.5.3 蛋白质相互作用的研究方法 | 第20-21页 |
| 1.6 本研究的目的和意义 | 第21-23页 |
| 2、材料与方法 | 第23-40页 |
| 2.1 实验材料 | 第23-27页 |
| 2.1.1 菌株和质粒 | 第23页 |
| 2.1.2 细胞和病毒 | 第23页 |
| 2.1.3 工具酶和试剂盒 | 第23-24页 |
| 2.1.4 化学试剂 | 第24页 |
| 2.1.5 常用储存液 | 第24页 |
| 2.1.6 常用缓冲液 | 第24页 |
| 2.1.7 培养基 | 第24-25页 |
| 2.1.8 酵母双杂交所用试剂 | 第25页 |
| 2.1.9 聚丙烯凝胶电泳(SDS-PAGE)及Western blot blotting所用试剂 | 第25-26页 |
| 2.1.10 主要仪器设备 | 第26-27页 |
| 2.2 实验方法 | 第27-40页 |
| 2.2.1 基因克隆操作方法 | 第27-29页 |
| 2.2.2 酵母双杂交筛选草地贪夜蛾细胞系IPLB-Sf9 cDNA文库 | 第29-33页 |
| 2.2.3 蛋白PK1和10-5的表达、纯化与多克隆抗体制备 | 第33-36页 |
| 2.2.4 体外pull down实验 | 第36-37页 |
| 2.2.5 Sf9细胞培养及病毒感染 | 第37-38页 |
| 2.2.6 免疫共沉淀 | 第38页 |
| 2.2.7 细胞转染 | 第38-40页 |
| 3、实验结果 | 第40-62页 |
| 3.1 与AcMNPV PK1相互作用的Sf9细胞蛋白的筛选和鉴定 | 第40-56页 |
| 3.1.1 与AcMNPV PK1相互作用的Sf9细胞蛋白基因的筛选 | 第40-43页 |
| 3.1.2 AcMNPV PK1与Sf9细胞10-5的相互作用分析 | 第43-51页 |
| 3.1.3 AcMNPV pk1瞬时表达对Sf9细胞的影响 | 第51-56页 |
| 3.2 与AcMNPV泛素蛋白相互作用的Sf9细胞蛋白基因的筛选和鉴定 | 第56-59页 |
| 3.2.1 诱饵载体pGBKT7-vubi载体的构建 | 第56-57页 |
| 3.2.2 BD-UBI融合蛋白的自激活和毒性检测 | 第57页 |
| 3.2.3 病毒泛素可能与多个Sf9细胞蛋白发生相互作用 | 第57-59页 |
| 3.3 与AcMNPVP6.9蛋白相互作用的Sf9细胞蛋白基因的筛选和鉴定 | 第59-62页 |
| 3.3.1 诱饵载体pGBKT7-p6.9载体的构建 | 第59页 |
| 3.3.2 BD-P6.9融合蛋白的自激活和毒性检测 | 第59-60页 |
| 3.3.3 P6.9可能与多个Sf9细胞蛋白发生相互作用 | 第60-62页 |
| 4、讨论 | 第62-67页 |
| 4.1 酵母双杂交技术在病毒学研究中的应用 | 第62-63页 |
| 4.2 AcMNPV PK1与Sf9细胞蛋白的相互作用 | 第63-65页 |
| 4.3 杆状病毒泛素的作用 | 第65-67页 |
| 参考文献 | 第67-71页 |
| 在校期间撰写论文 | 第71-72页 |
| 致谢 | 第72页 |
