| 摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 缩略词表 | 第9-11页 |
| 第1章 引言 | 第11-15页 |
| 1.1 柯萨奇病毒 B 组 3 型 | 第11-13页 |
| 1.2 VP1 蛋白 | 第13页 |
| 1.3 柯萨奇病毒与高尔基体 | 第13-14页 |
| 1.4 柯萨奇病毒与细胞周期 | 第14页 |
| 1.5 本论文研究基础和研究意义 | 第14-15页 |
| 第2章 材料和方法 | 第15-30页 |
| 2.1 材料 | 第15-20页 |
| 2.1.1 细胞株、病毒株及质粒 | 第15页 |
| 2.1.2 抗体 | 第15页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第15-17页 |
| 2.1.4 主要仪器设备 | 第17页 |
| 2.1.5 主要的溶液成分和试剂的配制 | 第17-20页 |
| 2.2 方法 | 第20-30页 |
| 2.2.1 真核质粒 pBudCE4.1-VP1 的构建 | 第20-24页 |
| 2.2.2 HeLa 细胞培养 | 第24页 |
| 2.2.3 脂质体 2000 进行质粒转染 | 第24-25页 |
| 2.2.4 Western Blotting 检测质粒 pBudCE4.1-VP1 在 HeLa 细胞中的表达 | 第25-27页 |
| 2.2.5 激光共聚焦分析 VP1 转染后对细胞高尔基体结构的影响 | 第27-28页 |
| 2.2.6 MTT 法检测 VP1 蛋白对细胞活性的影响 | 第28页 |
| 2.2.7 流式细胞仪检测质粒 VP1 对 HeLa 细胞周期的影响 | 第28-29页 |
| 2.2.8 图像分析及统计学检验方法 | 第29-30页 |
| 第3章 结果 | 第30-41页 |
| 3.1 质粒 pBudCE4.1-VP1 的构建 | 第30-32页 |
| 3.1.1 VP1 基因的扩增 | 第30页 |
| 3.1.2 重组质粒的酶切分析 | 第30-31页 |
| 3.1.3 重组的 VP1 基因测序 | 第31-32页 |
| 3.2 质粒 pBudCE4.1-VP1 在 HeLa 细胞中的表达 | 第32-34页 |
| 3.2.1 Western blotting 分析质粒转染细胞后 VP1 蛋白的表达情况 | 第32-33页 |
| 3.2.2 激光共聚焦分析质粒 VP1 转染后在 HeLa 细胞中的表达情况 | 第33-34页 |
| 3.3 质粒 pBudCE4.1-VP1 对 HeLa 细胞的影响 | 第34-41页 |
| 3.3.1 质粒 VP1 转染细胞后 HeLa 细胞形态变化 | 第34-36页 |
| 3.3.2 MTT 法检测 VP1 蛋白对细胞活性的影响 | 第36-37页 |
| 3.3.3 激光共聚焦显微镜检测 VP1 对细胞蛋白 GM130 的影响 | 第37-38页 |
| 3.3.4 流式细胞仪检测 VP1 蛋白对细胞周期的影响 | 第38-41页 |
| 第4章 讨论 | 第41-46页 |
| 4.1 质粒构建载体的选择 | 第41-42页 |
| 4.2 VP1 蛋白对细胞活性的影响 | 第42页 |
| 4.3 VP1 蛋白与高尔基体 | 第42-43页 |
| 4.4 VP1 蛋白与细胞周期 | 第43-44页 |
| 4.5 VP1 蛋白与病毒样颗粒疫苗 | 第44-45页 |
| 4.6 VP1 蛋白的核仁定位信号 | 第45-46页 |
| 第5章 结论与展望 | 第46-47页 |
| 5.1 结论 | 第46页 |
| 5.2 下一步研究工作 | 第46-47页 |
| 致谢 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-55页 |
| 附图 | 第55-57页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第57-58页 |
| 综述 | 第58-67页 |
| 参考文献 | 第64-67页 |
