| 致谢 | 第5-6页 |
| 中文摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 缩略词 | 第10-12页 |
| 目次 | 第12-16页 |
| 绪论 | 第16-19页 |
| 1 第一章 种子细胞肌腱干/祖细胞(TSPCs)的分离和鉴定 | 第19-37页 |
| 1.1 引言 | 第19-21页 |
| 1.2 实验试剂与仪器 | 第21-23页 |
| 1.2.1 材料和试剂 | 第21页 |
| 1.2.2 实验仪器及材料 | 第21-22页 |
| 1.2.3 相关溶液的配置 | 第22-23页 |
| 1.3 实验方法 | 第23-29页 |
| 1.3.1 TSPCs细胞分离和培养 | 第23页 |
| 1.3.2 hMSCs细胞分离和培养 | 第23-25页 |
| 1.3.3 细胞增殖检测 | 第25页 |
| 1.3.4 TSPCs的鉴定 | 第25-27页 |
| 1.3.5 组织学检测及评价 | 第27-29页 |
| 1.4 实验结果 | 第29-34页 |
| 1.4.1 TSPCs的分离 | 第29页 |
| 1.4.2 TSPCs的克隆形成能力鉴定 | 第29页 |
| 1.4.3 TSPCs的表面标志物鉴定 | 第29页 |
| 1.4.4 TSPCs的三系分化能力鉴定 | 第29-31页 |
| 1.4.5 TSPCs的增殖能力 | 第31-32页 |
| 1.4.6 TSPCs的标志基因筛选 | 第32-34页 |
| 1.5 讨论 | 第34-37页 |
| 2 第二章 中间纤维巢蛋白在肌腱干细胞的功能研究 | 第37-76页 |
| 2.1 引言 | 第37-39页 |
| 2.2 实验试剂与仪器 | 第39-41页 |
| 2.2.1 材料 | 第39-40页 |
| 2.2.2 实验仪器 | 第40页 |
| 2.2.3 试剂配制 | 第40-41页 |
| 2.3 实验方法 | 第41-50页 |
| 2.3.1 siRNA转染步骤 | 第41-42页 |
| 2.3.2 靶细胞感染预实验 | 第42-43页 |
| 2.3.3 病毒感染hTSPCs细胞及稳定转染细胞株筛选 | 第43页 |
| 2.3.4 EdU检测细胞增殖 | 第43-44页 |
| 2.3.5 免疫组化 | 第44-45页 |
| 2.3.6 冰冻切片快速染色法 | 第45页 |
| 2.3.7 免疫荧光 | 第45-46页 |
| 2.3.8 提取RNA | 第46-47页 |
| 2.3.9 逆转录合成cDNA | 第47页 |
| 2.3.10 实时荧光定量PCR(real time PCR) | 第47-48页 |
| 2.3.11 Western-blot | 第48-49页 |
| 2.3.12 体外组织工程肌腱的制备 | 第49页 |
| 2.3.13 其余方法同第一章 | 第49-50页 |
| 2.4 实验结果 | 第50-73页 |
| 2.4.1 巢蛋白Nestin在肌腱组织的表达 | 第50-56页 |
| 2.4.2 巢蛋白在肌腱干细胞的表达 | 第56-59页 |
| 2.4.3 巢蛋白在肌腱干细胞中的功能研究 | 第59-73页 |
| 2.5 讨论 | 第73-76页 |
| 3 第三章 平行纳米纤维诱导肌腱干细胞分化促肌腱再生研究 | 第76-101页 |
| 3.1 引言 | 第76-78页 |
| 3.2 实验试剂与仪器 | 第78-79页 |
| 3.2.1 材料和试剂 | 第78-79页 |
| 3.2.2 实验仪器 | 第79页 |
| 3.2.3 相关溶液的配制 | 第79页 |
| 3.2.4 其余试剂仪器 | 第79页 |
| 3.3 实验方法 | 第79-87页 |
| 3.3.1 多聚右旋乳酸支架的制备 | 第79-80页 |
| 3.3.2 多聚右旋乳酸支架的结构形态 | 第80页 |
| 3.3.3 生物力学测定 | 第80页 |
| 3.3.4 纳米纤维支架在体内的生物相容性 | 第80-81页 |
| 3.3.5 扫描电子显微镜观察细胞在材料上的生长 | 第81页 |
| 3.3.6 体内异位肌腱再生模型 | 第81页 |
| 3.3.7 体内实验细胞追踪Dil染色 | 第81页 |
| 3.3.8 损伤肌腱模型 | 第81-82页 |
| 3.3.9 组织学检测 | 第82-83页 |
| 3.3.10 透射电镜检测组织工程肌腱的胶原纤维微观结构 | 第83-84页 |
| 3.3.11 力学测试 | 第84页 |
| 3.3.12 胶原含量测定 | 第84-85页 |
| 3.3.13 肌腱组织学评分标准 | 第85-86页 |
| 3.3.14 其余方法同第一、二章 | 第86-87页 |
| 3.4 实验结果 | 第87-98页 |
| 3.4.1 纳米纤维材料形态学和力学鉴定 | 第87-88页 |
| 3.4.2 生长在纳米纤维上的细胞形态和增殖研究 | 第88-90页 |
| 3.4.3 不同排列的纳米纤维对于细胞分化的研究 | 第90-94页 |
| 3.4.4 纳米纤维材料作为肌腱支架的体内评估 | 第94-98页 |
| 3.5 讨论 | 第98-101页 |
| 4 第四章 不同来源的脱细胞基质对于肌腱干细胞命运决定的影响 | 第101-119页 |
| 4.1 引言 | 第101-102页 |
| 4.2 实验试剂与仪器 | 第102-103页 |
| 4.2.1 试剂及材料 | 第102-103页 |
| 4.2.2 实验仪器 | 第103页 |
| 4.2.3 其余试剂仪器 | 第103页 |
| 4.3 实验方法 | 第103-105页 |
| 4.3.1 脱细胞基质的制备 | 第103-104页 |
| 4.3.2 碱性磷酸酶活性测试和茜素红染色定量 | 第104页 |
| 4.3.3 其余方法同第一、二、三章 | 第104-105页 |
| 4.4 实验结果 | 第105-116页 |
| 4.4.1 脱细胞生物支架制造和特性描述 | 第105-106页 |
| 4.4.2 生长在脱细胞基质上的细胞的形态学及增殖评估 | 第106-107页 |
| 4.4.3 脱细胞基质支架诱导的细胞分化 | 第107-110页 |
| 4.4.4 ECM促进TSPCs异位形成肌腱 | 第110-112页 |
| 4.4.5 TSPCs+ECM促进大鼠跟腱的再生 | 第112-116页 |
| 4.5 讨论 | 第116-119页 |
| 5 总结 | 第119-121页 |
| 参考文献 | 第121-130页 |
| 综述 | 第130-138页 |
| 参考文献 | 第135-138页 |
| 作者简历及在读期间所取得的科研成果 | 第138-139页 |
